于寒颖
- 作品数：22 被引量：148H指数：6
- 供职机构：东北石油大学更多>>
- 发文基金：黑龙江省自然科学基金国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学化学工程环境科学与工程更多>>
- 一种用于野外地质勘探中的太阳能爆闪灯
- 一种用于野外地质勘探中的太阳能爆闪灯。主要解决现有地质勘探用具中缺乏此类产品的问题。其特征在于：所述太阳能爆闪灯还包括红色爆闪灯和黄色爆闪灯以及LED照明灯；分体式支撑框架的侧面上分别开有红色爆闪灯嵌入式固定槽和黄色爆闪...
- 刘为付于寒颖
- 文献传递
- 一种油田采出液中硫化物含量测定装置
- 本实用新型涉及的是一种油田采出液中硫化物含量测定装置，这种油田采出液中硫化物含量测定装置包括库仑仪、电解池、磁力搅拌器、计算机，电解池内放入一对指示电极和一对电解电极，库仑仪的信号线连接电解池的一对指示电极，库仑仪的电解...
- 王志华钟会影尹洪军于寒颖
- 文献传递
- 核盘菌EPSP合酶基因在大肠杆菌中的表达被引量：1
- 2006年
- 不含有内含子的核盘菌arom基因已经被扩增、测序.该基因编码五功能的AROM蛋白.为了大量获得核盘菌AROM蛋白的结构域之一5-烯醇丙酮酰莽草酸-3-磷酸合酶(EPSPS),将该菌arom基因编码脱氢奎尼酸合酶(DHQS)和EPSPS两结构域的DNA序列和只编码EPSPS结构域的DNA序列分别克隆入载体pGEX-4t-2和载体pET28b中,构建了4个表达载体pGEX-DE、pGEX-E、pET-DE和pET-E,并将其转入大肠杆菌DH5α、大肠杆菌BL21(DE3)或大肠杆菌JM109中表达.酶活测定和SDS-PAGE分析结果显示,上述编码序列在大肠杆菌细胞内获得了表达,含有表达载体pGEX-E、pET-DE和pET-E的大肠杆菌BL21(DE3)转化子具有EPSPS的催化活性,说明核盘菌arom基因的这些DNA片段可以被单独表达.核盘菌EPSPS异源表达系统的建立为该酶的抑制剂设计奠定了基础.
- 于寒颖杨谦
- 关键词：基因表达核盘菌大肠杆菌
- 球毛壳菌几丁质酶3基因的序列分析被引量：4
- 2004年
- 根据EST分析的结果 ,从cDNA文库中挑取几丁质酶 3基因的克隆进行了测序并序列分析。结果表明 :cDNA文库中几丁质酶 3基因的克隆插入片断大小为 12 6 8bp;用Phrap软件拼接出来的几丁质酶 3的表达序列标签拼接序列与实际序列不完全吻合。因此 ,在EST分析中不用Phrap软件为好。
- 金红星杨谦高兴喜于寒颖宋金柱
- 关键词：球毛壳菌几丁质酶基因生物防治
- 核盘菌AROM蛋白的三级结构分析
- 2007年
- 核盘菌编码AROM蛋白的arom基因已经被克隆测序,本文根据该基因翻译的氨基酸序列用同源模建方法和从头模建方法分析了AROM蛋白各结构域的三级结构和功能位点,以及该蛋白二聚体可能的组装方式。结果表明,核盘菌AROM蛋白的脱氢奎尼酸合酶结构域进一步由N-端含有一个Rossmann折叠的α/β结构域和C-端的α螺旋结构域组成;5-烯醇丙酮酰莽草酸-3-磷酸合酶结构域则由两个相似结构域组成,每个结构域含有不同拷贝数的β折叠和α螺旋;莽草酸激酶结构域的N-端由三个β折叠组成;脱氢奎尼酸酶结构域为(α2β2)3多肽,在N-端有一对反平行的β链,在C-端有loop环;莽草酸脱氢酶结构域含有一个由α/β组成的催化结构域和一个含有Rossmann折叠的NADPH结合结构域。
- 于寒颖杨谦
- 关键词：核盘菌
- Dactylellina cionopaga捕食线虫相关基因的研究
- 捕食线虫真菌是一种重要的潜在的防治寄生性线虫的微生物。研究该类真菌侵染线虫相关基因的功能，阐释食线虫真菌侵染线虫的分子机制，是开展生物防治、改良生物防治因子的理论基础。Dactylellina cionpaga是能够产生...
- 于寒颖
- 关键词：食线虫真菌生物防治
- 树状多节孢原生质体的制备和再生被引量：13
- 2001年
- 研究了酶系组成、酶解时间、酶解温度、渗透压稳定剂、pH值、培养基成分、培养方式、预处理、保护剂等因素对紫杉醇产生菌树状多节孢原生质体制备和再生的影响 .结果表明 :将树状多节孢在PDA液体培养基中静止培养 2～3d ,离心收集菌体 ,用 pH 5 .5～ 6 .0的 0 .7mol/L的NaCl配制成的含有 3%纤维素酶、2 %蜗牛酶和 1%溶菌酶的复合酶 ,30℃恒温酶解 9h ,原生质体制备率最高。但是考虑到原生质体的再生 ,以酶解 7h左右为宜 .获得的原生质体经过纯化 ,用 0 .7mol/LNaCl配制的PDA再生培养基进行双层平板培养法再生 ,原生质体的再生率最高 .本研究为以后通过原生质体诱变、转化、融合构建紫杉醇工程菌株奠定了基础 .图 3表 9参
- 孙剑秋于寒颖张鹏张彦丰凌洪博解玉红周东坡平文祥
- 关键词：树状多节孢原生质体紫杉醇微生物发酵
- 石油烃降解酶及其基因的结构、功能和表达调控被引量：10
- 2012年
- 研究烃降解酶及其基因是进行石油微生物分子检测和工程菌构建的重要基础.本文对目前烃降解酶及其基因的结构、功能和调控机制的最新研究进展进行了总结.催化烷烃好氧降解的起始酶有几类加氧酶,膜整合甲烷单加氧酶、萘-1,2-双加氧酶和异丙苯双加氧酶的晶体结构已经被解析.烷基或芳基琥珀酸合酶催化烃厌氧代谢的主要起始反应,而Azoarcus sp.乙苯厌氧代谢起始反应由乙苯脱氢酶催化.在细菌中,烃代谢相关基因主要通过形成操纵子进行表达调控,基因转录受烃或类似物诱导,并受细胞全局调控.一些微生物由于存在多种烃代谢途径而可能具有复杂的基因调控机制.此外,生态学研究表明,环境中烃降解基因的诱导动态与实验室内纯培养分析不同.在分析石油降解工程菌构建有待解决问题的基础上,提出了烃代谢综合调控和环境中相关酶及基因诱导研究的重要性,并对未来烃降解酶及其基因在有毒物降解理论研究和生物修复上的应用进行了展望.
- 于寒颖杨慧
- 关键词：石油微生物加氧酶基因表达调控
- 5种除草剂对核盘菌生长的初步测定被引量：1
- 2005年
- 在实验室条件下研究了不同浓度莠去津、百草枯、农达、2 4 D丁酯和灭草松对核盘菌菌丝生长、菌核萌发和菌核生长的影响。结果表明:5种化学除草剂均不抑制或促进核盘菌菌核的萌发;核盘菌在含有生产上推荐使用浓度的莠去津、农达和2 4 D丁酯的基本培养基上菌丝生长速度与对照相比差异不显著,而在含有推荐使用浓度的百草枯和灭草松的基本培养基上菌丝生长速度与对照相比受到极显著的抑制;推荐浓度的农达、莠去津和百草枯不影响菌核成熟,推荐浓度的2 4 D丁酯完全抑制菌核生长,而推荐浓度的灭草松部分抑制菌核生成。认为在杂草综合治理中,若使用核盘菌作为生物除草剂,可以配合使用农达和莠去津。
- 于寒颖杨谦金红星
- 关键词：除草剂核盘菌生物防治
- 核盘菌arom基因的克隆及其在酿酒酵母中的表达被引量：4
- 2006年
- 核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)arom基因已经被克隆、测序。该基因编码的AROM蛋白是芳香族氨基酸合成途径中催化第二步到第六步的五功能多肽。为了对扩增的核盘菌arom基因进行功能验证和探索大量获得AROM蛋白的成熟方法,克隆了arom基因的编码框序列,并将其与载体pYES2连接,构建了酵母表达载体pYES2-arom。用LiAc/SSDNA/PEG方法将该表达载体转入酿酒酵母H158(Saccharomyces cerevisiaeH158)中。酶活测定、RT-PCR和Northern杂交结果显示,核盘菌arom基因在酿酒酵母胞内获得了表达,转化子具有AROM蛋白结构域之一5-烯醇丙酮酰莽草酸-3-磷酸合酶的催化活性。不同培养时间取样样品的酶活检测结果表明,当转化子在30℃的条件下,在SC-U酵母尿嘧啶营养缺陷型选择培养基中以180r/min被振荡培养时,其外源AROM蛋白的5-烯醇丙酮酰莽草酸-3-磷酸合酶酶活在培养72h达到最高。
- 于寒颖杨谦
- 关键词：核盘菌基因表达酿酒酵母
