侯学文
- 作品数：60 被引量：332H指数：11
- 供职机构：华南农业大学更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生化学工程更多>>
- 采用酵母双杂交技术研究OsRUS1与OsRUS2.1之间的相互作用被引量：1
- 2012年
- 为了研究OsRUS1(ROOTUV-B SENSITIVE1)与OsRUS2.1(ROOTUV-B SENSITIVE2.1)之间是否具有相互作用以及通过何种结构域相互作用,采用酵母双杂交技术开展了如下工作。根据对OsRUS1与OsRUS2.1的DUF647结构域分布的分析,分别采用分子克隆技术将OsRUS1的4个不同片段[OsRUS1(1～1782)、OsRUS1(1～504)、OsRUS1(510～1282)和Os-RUS1(1188～1782)]克隆到诱饵载体pGBKT7上,并将OsRUS2.1的4个不同片段[OsRUS2.1(1～1317)、OsRUS2.1(1～138)、OsRUS2.1(139～879)和OsRUS2.1(880～1317)]克隆到猎物载体pGADT7上,酶切和测序结果表明诱饵和猎物载体构建成功,读码框正确。将所构建的4个OsRUS1诱饵载体和4个OsRUS2.1猎物载体质粒依次转化酵母AH109,研究转化AH109菌落在营养缺陷型培养液SD-Trp-DO或SD-Leu-DO上的生长情况,以及对报告基因ADE、HIS、MEL1和LacZ的激活情况,表明它们均没有对酵母菌株AH109产生毒性和自激活活性。再将4个OsRUS1诱饵载体和4个OsRUS2.1猎物载体的16种组合分别共转化酵母AH109,共转化菌株能在二缺营养缺陷板SD-Trp-Leu-DO上生长良好,但不能在四缺营养缺陷板SD-Trp-Leu-Ade-His-DO上生长,也不能激活MEL1和LacZ报告基因。这些结果表明OsRUS1与OsRUS2.1之间没有直接的相互作用。
- 潘家强侯学文
- 关键词：酵母双杂交相互作用自激活
- OsRUS1酵母双杂交诱饵载体的构建及其自激活作用检测被引量：3
- 2012年
- 采用PCR技术扩增水稻(Oryza sativa L)根UV-B敏感基因1(ROOT UV-B SENSITIVE 1,RUS1)四个不同片段[OsRUS1(1-1782)、OsRUS1(1-504)、OsRUS1(510-1282)、OsRUS1(1188-1782)],连接到T载体pMD18-T-Simple上,测序无误后分别亚克隆到诱饵载体pGBKT7上,酶切和测序结果表明构建的4个OsRUS1基因片段的诱饵载体构建成功,读码框正确;转化重组载体于酵母感受态细胞Y187中,用LacZ、MEL1活性检测法和营养缺陷型培养基SD-Trp-DO培养法进行自激活检测和毒性检测,结果表明诱饵载体对酵母菌株Y187没有转录激活活性和毒害作用。说明构建的4个OsRUS1基因片段的诱饵载体可以用于酵母双杂交系统中,为下一步从水稻cDNA文库中筛选互作蛋白奠定了基础。
- 潘家强侯学文
- 关键词：诱饵载体酵母双杂交自激活毒性检测
- 蚓激酶F-Ⅲ-1基因植物表达载体的构建
- 2015年
- [目的]探讨蚓激酶F-III-1基因在烟草中的高效表达。[方法]以经烟草密码子优化、人工合成的蚓激酶成熟肽F-III-1为目的基因,以p CAMBIA3301和p BA002质粒为基础,构建由35S启动子调控、抗草铵膦基因(bar)为选择标记的植物表达载体。[结果]成功构建了4个植物表达载体,分别是p CAMBIA3301-F-III-1、p CAMBIA3301-F-III-1-6x His、p BA002-F-III-1和p BA002-F-III-1-6x His。[结论]4个植物表达载体的成功构建为探讨蚓激酶在植物中的表达及其植物反应器生产奠定了基础。
- 陈臻毅侯学文苏志坚邱道寿
- 关键词：蚓激酶植物表达载体
- 立体选择性水解CPBAc酵母菌株的筛选方法
- 本发明针对CPBAc和CPBA的化学性质和多数酵母菌的生长具有嗜酸性的特点，提供了一种pH3.0－4.5下能立体选择性水解CPBAc的酵母菌菌株的筛选方法以获得单一异构体的CPBA。该方法包括以下步骤：富集培养、初筛和复...
- 侯学文杨淑莲徐汉虹廖美德
- 文献传递
- 海芋凝集素AML的原核表达及其多克隆抗体制备
- 2010年
- 为了制备海芋凝集素(Alocasia macrorrhiza lectin,简写AML)的多克隆抗体,分别构建了AML全长及部分片段的原核表达载体,并利用获得的原核表达的AML片段免疫新西兰雄兔获得抗血清。结果表明,含AML全长的原核表达载体pET30a(+)-AMLcDNA的原核表达宿主菌株Rosetta(DE3),在加入不同浓度的诱导剂IPTG后,菌液浓度出现短暂增加后逐渐下降,且下降幅度与加入的IPTG浓度呈正相关,同时用SDS-PAGE电泳法未检测到预期融合蛋白的形成;而含AML片段的原核表达载体pET30a(+)-AMLcDNA(270-613)的原核表达宿主菌株Rosetta(DE3),在IPTG诱导下能正常生长,且能诱导出预期大小的融合蛋白。利用制备型SDS-PAGE法纯化此融合蛋白作为抗原免疫新西兰雄兔获得抗血清,用该抗血清作为一抗进行Western blot,在海芋块茎、叶、叶柄和诱导菌体中均能检测到相应分子量的AML条带,表明制备的AML多克隆抗体可以用于检测AML。
- 侯学文黄剑威何国卿
- 关键词：原核表达多克隆抗体
- 基因组测序新方案
- 1998年
- 人类基因组计划（ＨＧＰ）也许是本世纪末、下世纪初的最为宏伟及具有深远影响的分子生物学工程。该计划的主要目的是获得人类２４条不同染色体的物理图谱和基因图谱，以及核苷酸全序列。这项计划最初由美国国立卫生研究院（ＮＩＨ）和能源部于１９９０年发起，现已有中国...
- 侯学文郑穗平
- 关键词：人类基因组计划基因测序BAC文库
- 海芋凝集素对几种鳞翅目昆虫的毒杀活性被引量：4
- 2007年
- 采用饲喂、口腔灌注、腹足注射和喷雾等方法,比较了海芋凝集素粗品对3种鳞翅目昆虫菜粉蝶、亚洲玉米螟和斜纹夜蛾幼虫的毒杀活性。结果表明:海芋凝集素粗品对受试昆虫有一定的胃毒和触杀活性,其中海芋块茎凝集素粗品口腔灌注菜粉蝶幼虫的胃毒活性最高,5%海芋块茎凝集素粗品处理后5、6 d,菜粉蝶幼虫的死亡率分别为62.5%和75.0%,表明海芋凝集素对昆虫的胃毒是其主要作用方式。
- 潘科黄炳球侯学文
- 关键词：菜粉蝶斜纹夜蛾亚洲玉米螟毒杀活性
- 悬浮培养玫瑰茄细胞的生长及泛醌合成的代谢调控
- 本论文以华南理工大学生物工程实验室多年来驯化培养的玫瑰茄（Hibiscus sadariffa Linn）白色细胞株为实验材料,以Gamborg B
- 侯学文
- 关键词：玫瑰茄细胞泛醌动力学模型硝酸还原酶代谢调控
- CRISPR/Cas9基因组编辑技术在植物基因功能研究及植物改良中的应用被引量：22
- 2015年
- CRISPR/Cas是发现于细菌和古细菌基因组中的特殊结构,参与细菌和古细菌破坏噬菌体和外源质粒的免疫保护。科学家将II型CRISPR/Cas改造成为一个组装简便、高效和精准的基因组编辑工具,并迅速在动物、植物和微生物基因功能研究和遗传改造中获得广泛应用。本文介绍CRISPR/Cas9技术出现近两年来,在水稻、小麦、高粱、拟南芥、烟草、甜橙等植物中的研究情况,在此基础上对该技术的优点和需要进一步改进的地方提出了看法。
- 曾秀英侯学文
- 关键词：植物改良
- 植物凝集素在病虫害防治中的研究进展被引量：35
- 2002年
- 植物凝集素是一种含有非催化结构域并能可逆结合到特异单糖或寡糖上的植物 (糖 )蛋白。植物凝集素的抗病虫作用与它最重要的性质糖结合专一性有关。由于其特定的作用机理 ,人们愈来愈多地把它用于病虫害防治。本文综述了植物凝集素的生理作用。
- 潘科黄炳球侯学文
- 关键词：病虫害防治植物凝集素抗性机理生理作用基因工程
