侯鑫 作品数:33 被引量:269 H指数:10 供职机构: 内蒙古大学生命科学学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 转基因生物新品种培育专项 International Plant Genetic Resources Institute /Bioversity International 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 医药卫生 文化科学 更多>>
内蒙古白绒山羊IGF-IR基因cDNA克隆及组织表达特异性分析 2012年 旨在克隆内蒙古白绒山羊IGF-IR基因并分析其基本表达模式。采用RT-PCR克隆基因,将得到的IGF-IR基因cDNA片段的核苷酸序列及其编码的氨基酸序列进行生物信息学分析。半定量RT-PCR进行组织特异性表达检测。获得了内蒙古白绒山羊IGF-IR基因3'端编码区2 118 bp的cDNA序列(JN200823),编码705个氨基酸残基。核苷酸序列与牛的IGF-IR(XM606794.3)基因同源性为98%,相应的氨基酸序列同源性为99%。SMART分析表明,推导出的编码蛋白具有跨膜域,酪氨酸激酶催化域。半定量RT-PCR检测表明,IGF-IR基因在绒山羊脑、胰腺、肝、肾组织中均有表达。 宝梅英 赵荷雅 杨娇馥 鲍文蕾 李彬 杨军 侯鑫 王志钢关键词:IGF-IR 组织特异性表达 大肠杆菌-长双歧杆菌穿梭载体的构建及PTEN在长双歧杆菌中的表达 被引量:21 2006年 长双歧杆菌可特异地定植于实体瘤低氧区,可用做肿瘤靶向性基因治疗的载体,而构建大肠杆菌-长双歧杆菌穿梭质粒则被证明是外源基因在长双歧杆菌中稳定表达的有效途径。为了构建能在长双歧杆菌中稳定表达外源基因的穿梭质粒并检测携带抑癌基因的工程菌对小鼠实体瘤的抑制效果,利用软件设计并合成了48条部分序列相互重叠的引物,通过PCR合成了长双歧杆菌质粒pMB1序列及长双歧杆菌HU启动子区序列,插入克隆载体pMD18-T,构建穿梭载体pMB-HU,该载体可在大肠杆菌DH5α及长双歧杆菌L17中稳定复制。PTEN基因编码具有蛋白质和酯类双重特异性磷酸酶活性的抑癌因子。将PTEN基因cDNA序列插入载体pMB-HU中HU启动子下游,构建重组质粒pMB-HU-PTEN,电击转化长双歧杆菌后,Western blot检测表明,表达产物中存在55kDa的PTEN蛋白特异条带。抑癌试验表明:与对照组相比,携带PTEN基因的长双歧杆菌可显著抑制小鼠实体瘤的生长。上述结果为以长双歧杆菌为载体的实体瘤靶向性基因治疗研究奠定了基础。 侯鑫 刘俊娥关键词:PTEN基因 基因治疗 中国苦荞麦及其近缘种的遗传多样性研究 被引量:49 2002年 采用等位酶电泳技术测定了四川、云南省 2 7个县、市的苦荞麦及其近缘种共 8种 1变种 5 0个居群的遗传多样性和分化。经过 7个酶系统的 12个位点的检测 ,完成了遗传多样性、杂合性基因多样度比率、遗传距离和遗传一致度的测量。结果表明 ,栽培苦荞麦的遗传多样性较低 ,各种野荞麦的遗传多样性较高。这些种的近交繁育系数F值 - 0 5 4~ - 0 80 ,为随机交配的居群 ,杂合体过多 ;营养繁殖为主的金荞麦的FST 值最高 ,相对较多的遗传多样性存在于居群间 ,长柄野荞麦相对较少的遗传多样性存在于居群间 ,更接近于自由交配。苦荞麦及其近缘种种间的遗传一致度平均值 5 5 30 %~ 6 5 2 0 % ,与种子植物属内种间遗传一致度平均值接近。指出细柄野荞麦是与栽培的苦荞麦和荞麦的亲缘关系最近的野生种。 赵佐成 周明德 王中仁 侯鑫关键词:苦荞麦 近缘种 基于ITS序列和trnL-F序列探讨小叶锦鸡儿、中间锦鸡儿和柠条锦鸡儿的种间关系 被引量:41 2006年 中间锦鸡儿CaraganadavazamciiSancz.的分类处理一直存在争议,它与小叶锦鸡儿C.microphyllaLam.和柠条锦鸡儿C.korshinskiiKom.的关系尚不清楚。该种被处理为一个独立的种或后两个种的变种。本文利用ITS序列和叶绿体trnL-F序列,综合形态和地理分布,探讨了中间锦鸡儿的起源及与另外两个种的种间关系。结果显示,中间锦鸡儿的trnL-F序列与小叶锦鸡儿完全一致,而与柠条锦鸡儿有明显差异。中间锦鸡儿的ITS序列高度纯合,不支持该种可能是杂交起源的假设。相反,另外两个种的ITS序列均出现多个位点杂合,克隆后均得到2种不同的序列。中间锦鸡儿的ITS序列与小叶锦鸡儿2种序列中的1种完全一致。该结果表明,中间锦鸡儿可能作为亲本之一参与了小叶锦鸡儿的杂交起源,或者基因流是造成这两个种形态相似的主要原因。中间锦鸡儿与柠条锦鸡儿形态上的相似可能是趋同进化的表现。 侯鑫 刘俊娥 赵一之 赵利清关键词:小叶锦鸡儿 中间锦鸡儿 柠条锦鸡儿 ITS序列 TRNL-F序列 具有磷酸酶活性的重组PTEN蛋白可抑制癌细胞的迁移 2009年 PTEN是迄今为止发现的第一个具有双特异性磷酸酶活性的抑癌因子,可通过对粘着斑激酶的去磷酸化抑制细胞迁移.在前期研究工作中证实了在大肠杆菌中表达的重组PTEN蛋白具有抑癌活性后,本研究进一步检测重组PTEN蛋白的磷酸酶活性及其对粘着斑激酶FAK磷酸化程度和细胞迁移的影响.对[D 33-2P]P IP 3体外去磷酸化的实验表明重组PTEN蛋白具有明显的脂质磷酸酶活性;将重组PTEN蛋白转染DU-145细胞后,细胞中FAK的磷酸化水平明显下降,表明重组PTEN蛋白具有蛋白磷酸酶活性.细胞迁移实验结果表明转染的重组PTEN蛋白可以抑制DU-145细胞的迁移作用,从而起到抑制肿瘤转移或浸润的作用. 侯鑫 刘俊娥 杜玉梅 扈廷茂关键词:磷酸酶活性 肿瘤细胞迁移 FAK HeLa细胞中激酶NUAK1调控Tuberiun的磷酸化 2012年 NUAK1是LKB1的下游激酶之一,可被LKB1磷酸化而激活,但对其在LKB1相关信号通路中的功能仍缺乏了解.本研究发现在HeLa细胞中重建LKB1表达后NUAK1与tu-berin蛋白免疫共沉淀,提示在野生型LKB1存在时NUAK1与tuberin可能存在直接相互作用.进一步的激酶活性测定和in vivo蛋白磷酸化实验表明:在HeLa细胞中葡萄糖匮乏条件下,野生型LKB1可显著激活NUAK1的激酶活性;而被激活的NUAK1可明显提高tuberin的磷酸化水平,使用NUAK1siRNA pool干扰NUAK1的表达则几乎将tuberin的磷酸化水平降低为零.上述结果表明NUAK1可能介导了LKB1对tuberin磷酸化的调节,进而下调mTOR通路,抑制蛋白质合成与细胞生长增殖. 侯鑫 丁文玉 安俊峰 刘俊娥关键词:LKB1 激酶 TUBERIN 磷酸化 西南地区硬枝野荞麦(Fagopyrum urophyllum)居群的遗传多样性研究 被引量:21 2001年 采用等位酶电泳技术研究了云南省中北部昆明、富民、宾川 3县 (市 )及四川省西南布拖县的硬枝野荞麦 (Fagopyrum urophyllum) 6个天然居群的遗传多样性和分化。硬枝野荞麦居群内维持有较高的遗传多样性 ,多态位点比率为 50 .0 % ,预期杂合度和观察杂合度分别为 0 .2 51和 0 .471。并对硬枝野荞麦 (F.urophyllum) 罗定泽 侯鑫 赵佐成关键词:等位酶 等位基因频率 西南地区金荞麦(Fagopyrum dibotrys(D.Don)Hara)居群遗传多样性研究 被引量:22 2000年 采用等位酶电泳技术研究了云南省和四川省西南共 5个县境内金荞麦 (Fagopyrumdibotrys(D .Don)Hara) 5个天然居群的遗传多样性 .金荞麦居群内维持有较高的遗传多样性 ,多态位点比率为 5 6 .7% ,预期杂合度和观察杂合度分别为 0 .2 2 1和 0 .36 3.并对金荞麦与栽培荞麦之间遗传变异作了比较 . 罗定泽 侯鑫 赵佐成关键词:基因频率 金荞麦 鸡细胞色素P450 1A5的原核表达与活性重组 被引量:1 2012年 旨在对鸡细胞色素P450 1A5(CYP1A5)蛋白进行体外功能研究,采用大肠杆菌系统进行CYP1A5的异源表达。以鸡的cDNA为模板,扩增出CYP1A5基因,将该基因的N端编码区进行修饰,并连接到pCW载体中构建His-CYP1A5,经IPTG诱导在大肠杆菌中表达。经CO-差示光谱检测,所获得的His-CYP1A5具有典型的P450吸收峰。该蛋白与细胞色素P450还原酶(CPR)进行体外重组,构成的重组酶系表现出乙氧基试卤灵-O-脱乙基酶活性。结果表明,所采用的表达策略可以成功产生出具有催化活性的鸡细胞色素P450 1A5(CYP1A5)蛋白。 安俊峰 王运浩 侯鑫关键词:细胞色素 异源表达 体外重组 生命科学实践教学创新体系的建设 被引量:18 2009年 内蒙古大学生命科学本科基础实验教学中心不断加强本科生实践能力的培养,更新实践教学理念,改革实践教学课程体系,创新实践教学内容。实验教学与理论教学相对独立并有机结合,开展分阶段分层次的实验教学;发挥现有学科优势,开设具有特色的实验教学内容,打造精品实验课程;加强实习基地建设,专业实习优势与特色明显,成为实践教学在实验室的延伸;利用"国家基础科学人才培养基金项目"对本科生进行综合科研训练,进一步挖掘学生创新潜力,着力培养学生的科研能力和创新精神;不断加强实践教学平台硬件条件建设,完善实践教学平台管理体系,为实践教学提供坚实基础。 赵吉 侯鑫 刘明秋 王迎春关键词:生命科学 实践教学