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内毒素预处理促进金黄色葡萄球菌刺激的巨噬细胞生成一氧化氮被引量：2: 2010年; 目的:明确脂多糖(LPS)预处理后巨噬细胞对后续热灭活革兰氏阳性金黄色葡萄球菌(HKSa)刺激的反应性变化,并探讨其机制。方法:Griess法检测细胞培养上清一氧化氮(NO)含量;实时荧光定量PCR和Western blotting技术检测Toll样受体2(TLR2)mRNA和蛋白表达;双荧光报告基因检测法观察细胞内活化T细胞核因子(NF-AT)转录活性。结果:LPS预处理小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞24 h后,该细胞在后续HKSa刺激下NO生成量显著增加,提示LPS可以致敏巨噬细胞、增强其对HKSa的反应性。LPS可以剂量依赖性地增加细胞内TLR2 mRNA和蛋白表达;LPS预处理也可增强TLR2特异性配体肽聚糖刺激巨噬细胞NO生成的效应;TLR2特异性中和抗体可部分阻断LPS的致敏效应。LPS可促进NF-AT转录激活,细胞内钙离子(Ca2+)螯合剂BAPTA/AM和calcineurin抑制剂cyclosporin A(CsA)均可阻断LPS的作用;BAPTA/AM和CsA均能显著抑制LPS的致敏效应。结论:LPS可以致敏巨噬细胞,从而使其在后续HKSa作用下NO生成量增加;模式识别受体TLR2和Ca2+/cal-cineurin/NF-AT信号转导途径可能参与了LPS的这一致敏效应。; 胡佳杨涛王蓓蕾倪潇晓周国武倪鑫朱晓燕; 关键词：脂多糖类一氧化氮活化T细胞核因子

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倪潇晓