刘志杰
- 作品数：5 被引量：12H指数：2
- 供职机构：华南农业大学兽医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程电子电信化学工程更多>>
- 大肠杆菌acrR插入序列对acrAB表达水平及多重耐药性的影响被引量：3
- 2013年
- 为研究大肠杆菌(E.coli)分离株ED28的acrR基因中777bp插入片段对外排泵AcrAB表达水平及多重耐药性的影响,本研究将野生型acrR通过互补实验导入ED28中得到C-ED28。通过药物的最低抑菌浓度(MIC)测定、有机溶剂耐受性试验和实时定量PCR(qPCR)等方法检测菌株中AcrAB外排泵的活性。通过PCR方法检测ED28和C-ED28喹诺酮耐药决定区(QRDR)的氨基酸突变及携带的质粒介导喹诺酮类耐药(PMQR)基因和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)耐药基因。结果显示,临床分离菌株ED28对12种抗生素呈多重耐药表型,而互补菌株C-ED28恢复了对多种药物的敏感性。当能量抑制剂(CCCP)存在时,喹诺酮类和β-内酰胺类药物对ED28的MIC普遍降低,而对C-ED28的MIC保持不变。ED28对染料溴化乙锭(EB)的MIC为512μg/mL,对正己烷和环己烷耐受;而C-ED28对染料EB的敏感性增强,MIC为16μg/mL,对正己烷耐受,对环己烷不耐受。qPCR结果显示,基因acrA和acrB在C-ED28中的表达水平低于亲本菌株ED28,而基因marA在C-ED28中的表达水平高于ED28。靶位突变检测和耐药基因检测结果显示,ED28存在gyrA(Ser83Leu和Asp87Asn)和parC(Ser80Ile)双突变,携带aac(6')-Ib-cr、blaCTX-M-27和blaTEM-13个质粒编码耐药基因;而C-ED28仅存在gyrA(Asp87Asn)一个突变位点,并丢失aac(6')-Ib-cr、blaTEM-1两个基因。
- 任艳娜李健甄盼盼付小平刘志杰任金程刘雅红曾振灵蒋红霞
- 关键词：耐药性外排泵
- 2002和2009年食品动物源产CTX-M-14大肠杆菌传播分子机制比较
- 【目的】通过比较和分析2002年和2009年产CTX-M-14大肠杆菌传播分子机制的特点,推测产CTX-M-14大肠杆菌传播分子机制的演变趋势,进而为bla传播机制及其变化规律的研究提供参考。【方法】从本实验室保存的20...
- 郭玉芳甄盼盼汤电王丽华付晓平任君玉张文慧刘志杰赵秋云蒋红霞
- 关键词：CTX-M-14复制子
- 文献传递
- 2002和2009年食品动物源产CTX-M-14大肠杆菌传播分子机制比较
- [目的]通过比较和分析2002年和2009年产CTX-M-14大肠杆菌传播分子机制的特点,推测产CTX-M-14大肠杆菌传播分子机制的演变趋势,进而为blaCTX-M-(H)传播机制及其变化规律的研究提供参考.
- 郭玉芳蒋红霞甄盼盼汤电王丽华付晓平任君玉张文慧刘志杰赵秋云
- 关键词：CTX-M-14复制子
- 文献传递
- 抗生素压力下不同血清型沙门氏菌耐药性研究被引量：8
- 2014年
- 本研究旨在探讨不同血清型沙门氏菌在环丙沙星抗生素压力下突变频率及在耐药发展过程中靶位基因突变、外排泵及调控基因表达的差异。选取临床分离的印第安纳型、肠炎型和鼠伤寒型沙门氏菌的敏感菌株,在环丙沙星压力下诱导耐药突变,分别获得一系列不同程度的耐药突变株。分别检测不同血清型沙门氏菌突变株的突变频率、靶位基因喹诺酮耐药决定区(QRDRs)和外排泵调控基因ramR-ramA突变及外排泵相关基因的表达水平;同时检测了母株在羰基氰化物间氯苯腙(CCCP)存在情况下环丙沙星药物的蓄积浓度,以确定母株是否存在外排泵的作用。结果表明,在环丙沙星压力下,印第安纳型沙门氏菌较肠炎型和鼠伤寒型有更高的突变频率,易获得耐药株;印第安纳血清型菌株耐药性的获得主要是由于靶位基因gyrA发生单突变,协同外排泵外排作用增强而获得高水平耐药;肠炎型沙门氏菌耐药性获得主要是由于靶位基因gyrA发生83和87位双位点突变,并随着gyrB和parC基因的多位点同时突变而获得高水平耐药,耐药性的发展过程中没有外排泵作用参与;而鼠伤寒沙门氏菌在抗生素压力下不易发展成耐药菌,耐药性发生主要是由于靶位基因gyrB发生突变,而伴随parC基因突变及微弱的外排泵作用导致耐药水平增加。
- 刘志杰万冰璐杨磊孟祥芹付晓平蒋红霞
- 关键词：血清型沙门氏菌突变频率荧光定量
- RamR突变协同靶位基因GyrA突变调控RamA表达水平的研究被引量：1
- 2013年
- 为了探讨RamR突变类型及对RamA表达调控的影响,靶位突变与外排泵过表达之间的关联,从临床分离的34株沙门菌中筛选不同RamR突变类型菌株,通过外排泵能量抑制(CCCP)试验和有机溶剂耐受试验(OST)验证外排泵的活性,构建不同RamR突变类型的质粒,互补到RamR野生型突变菌株中,采用RT-PCR方法检测各菌株RamA的表达水平。结果表明,15株ramR存在4种突变类型:M83T(n=6),A37S(n=3),T18P(n=3)和氨基酸的缺失(n=3)。CCCP抑制试验和OST试验证实,15株菌株中有10株存在明显的有活力的外排泵作用,4株存在活力微弱的外排泵。RamR三种氨基酸突变类型都上调了RamA的表达水平。靶位基因GyrA第83位的突变协同RamR的A37S或M83T突变均可引起RamA的表达显著增强,而T18P突变没有明显影响。相反,GyrA第87位的突变协同RamR的A37S或M83T突变则下调RamA的表达水平。本研究表明,所有的RamR的突变都可引起RamA表达水平增高,RamR与靶位基因突变协同调控RamA的表达水平,协同GyrA第83位突变可明显促进RamA的表达,而协同GyrA第87位突变则下调RamA的表达。
- 付晓平刘志杰褚富鑫杨玲颜欣蒋红霞
- 关键词：沙门菌外排泵反转录-聚合酶链反应
