刘晨风
- 作品数：9 被引量：38H指数：4
- 供职机构：军事医学科学院微生物流行病研究所更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>
- 人H7N9禽流感病毒、高致病H5N1禽流感病毒及H1N1流感病毒感染小鼠特征分析被引量：5
- 2014年
- 目的对比分析人高致病H5N1禽流感病毒、H7N9禽流感病毒及H1N1流感病毒分别感染BALB/c小鼠后的机体反应特征。方法分别以H7N9病毒、H5N1病毒和H1N1病毒滴鼻感染BALB/c小鼠,观察小鼠存活率、体征变化及感染后肺组织病理损伤差异,检测小鼠感染流感病毒后肺组织增殖细胞核抗原(PCNA)表达并观察小鼠感染后修复状况。结果 H7N9病毒、H5N1病毒和H1N1病毒均感染BALB/c小鼠,小鼠存活率依次为H7N9>H1N1>H5N1,肺组织病理损伤严重程度依次为H5N1>H1N1>H7N9,PCNA表达水平依次为H7N9>H1N1>H5N1。结论 H7N9病毒感染后宿主炎症反应较小,感染后小鼠肺组织自我修复能力较强;H5N1病毒感染BALB/c小鼠后的机体反应最为强烈,感染后恢复能力差,致死率高。
- 刘晨风吴小红赵光宇高同同曾扬唐健于虹孙世惠周育森
- 关键词：流感病毒急性肺损伤
- 重组8型腺相关病毒介导HBV急性感染树鼩模型建立被引量：7
- 2013年
- 目的利用重组8型腺相关病毒介导1.3拷贝HBV基因组(1.3HBV,ayw亚型)在树鼩肝脏表达,建立HBV急性感染树鼩模型。方法通过大腿内侧静脉注射将携带有1.3 HBV的重组8型腺相关病毒(recombi-nant adeno-associated virus 8,rAAV8-1.3HBV)导入树鼩肝脏,通过ELISA检测树鼩血清中HBsAg、HBeAg、HBsAb、HBeAb、HBcAb,荧光定量PCR检测树鼩肝脏和血清中HBV DNA,全自动生化分析仪检测血清中ALT水平,并观察感染后肝脏的病变情况。结果 HBV感染主要血清标志物1～2周内均检测阳性;30 d后肝组织仍可检测到病毒抗原阳性细胞;55 d时肝组织HBV DNA拷贝数仍可达到104～105;树鼩血清中HBV DNA拷贝数持续一个月高于正常组;肝组织炎细胞略增多,血清ALT水平持续升高。结论 rAAV8所携带的HBV基因组高效专一导入树鼩肝细胞并复制表达,成功建立HBV急性感染树鼩模型,为进一步探索rAAV8树鼩慢性感染模型打下一定的基础。
- 曾扬吴小红胡靓雅刘晨风于虹郭彦周勇孙世惠周育森
- 关键词：树鼩乙型肝炎病毒
- 可调控肝脏特异性表达HCV全基因转基因小鼠模型的建立
- 2015年
- 目的:构建一种可调控肝细胞特异性表达丙型肝炎病毒(HCV)全基因的小动物模型。方法:将9.6 kb的HCV全长基因JFH1插入Tet-on系统效应表达载体p TRE2中,并在HCV全基因3'端插入丁型肝炎病毒(HDV)核酶序列,从而构建转基因载体p TRE2-JFH1(HCV);将该转基因载体线性化后显微注射获得整合有HCV全基因的TRE2-HCV首建鼠;将该阳性鼠与本室保存的Alb-rt TA转基因小鼠杂交,获得肝细胞白蛋白启动子调控HCV全基因表达的Tet-on-Alb-HCV双转基因小鼠;在强力霉素(Dox)诱导后通过PCR、Western印迹、免疫组化等方法鉴定转基因小鼠HCV基因整合及HCV蛋白在肝组织中的表达;实时定量PCR检测小鼠血清及肝组织中的HCV滴度;用HCV反义小分子药物anti-mi R122评价该模型在药物评价中的应用。结果:获得了整合rt TA基因和HCV全长基因的双转基因小鼠;Dox诱导下,该转基因小鼠可在肝组织长期特异性表达HCV全长基因,小鼠血清中可检测到HCV的RNA;分子药物anti-mi R122可降低血清中的HCV滴度。结论:构建了可调控肝组织特异性表达HCV全基因的转基因小鼠模型,该小鼠模型可应用于HCV药物筛选和评价研究。
- 高同同刘晨风姜玉庭王友亮吴小红曾扬赵亚光郭彦于虹赵光宇高基民孙世惠周育森
- 关键词：丙型肝炎病毒转基因小鼠药物评价
- 高致病禽流感H5N1病毒感染小鼠病理损伤特征及补体介导的免疫病理损伤机制研究
- 目的:目前人高致病禽流感 H5N1病毒引起的高病死率和新发人禽流感病毒的频繁出现对公共卫生提出了严峻挑战。人禽流感病毒感染后的生理和病理特征仍需进一步探讨,不同人禽流感病毒的感染损伤特征及宿主反应分析仍需研究。此外,免疫...
- 刘晨风
- 关键词：禽流感病毒补体激活免疫病理
- 文献传递
- 一种DNA片段及其在构建HCV全基因表达动物模型中的应用
- 本发明公开了一种DNA片段及其在构建HCV全基因表达动物模型中的应用。所述DNA片段的核苷酸序列由如下序列依次串联组成：细菌四环素耐药操纵子的操纵基因序列、人类巨噬细胞的立早启动子基因序列、丙型肝炎病毒全基因组基因序列和...
- 周育森孙世惠周小军刘晨风赵光宇曾扬
- 文献传递
- 实时定量PCR和ELISA检测支原体感染在儿童肺炎诊断中的应用被引量：6
- 2014年
- 目的对比分析荧光实时定量PCR技术和ELISA技术在检测支原体肺炎中的可靠性和优劣性,探讨更加准确、快速的检测方法。方法收集本院儿科治疗的呼吸道感染患者446例,根据年龄将患者分组。收集患者咽拭子用于实时定量PCR检测肺炎支原体DNA(MP-DNA),收集血液用于酶联免疫吸附实验(ELISA)检测肺炎支原体抗体(MPIgM)。结果实时定量PCR技术检测MP-DNA总阳性率为37.00%,其中各年龄段阳性率分别为39.44%、37.31%、35.11%、28.95%,阳性检测率随年龄增加而降低;ELISA方法检测MP-IgM总阳性率为37.44%,其中各年龄段阳性率分别为18.89%、46.27%、50.00%、63.16%,阳性检测率随年龄增加而增加(P<0.05),PCR方法婴儿组患者检出率明显高于血清ELISA方法。结论 2种方法检测MP阳性率差异无统计学意义,但实时定量PCR法在1岁以下的阳性检出率更高(P<0.05),2种检测方法联合应用可更好地指导临床治疗。
- 张磊郭桂林张如赵舒刘晨风周育森
- 关键词：支原体酶联免疫吸附反应荧光定量聚合酶链反应
- 白介素33在百草枯诱导小鼠急性肺损伤中的作用机制研究被引量：1
- 2014年
- 目的探讨白介素33(IL-33)在百草枯(PQ)染毒小鼠急性肺损伤(ALI)模型中的表达及作用。方法 25只SPF级雌性BALB/c小鼠平均分为正常对照组,PQ损伤6、12、24、48 h组。腹腔注射PQ(30 mg/kg)建立小鼠ALI模型并于各时间点处死取材。评价肺组织病理变化和炎症细胞浸润;观察血清白介素1β(IL-1β)、IL-2、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和肺组织髓过氧化物酶(MPO)水平变化;RTPCR、免疫组化和Western blot分别检测组织中IL-33 mRNA和蛋白表达水平变化。分析IL-33与病理损伤和炎症指标关联性以明确IL-33在调解内源性细胞因子及在ALI中的作用。结果与正常对照组相比,PQ损伤后小鼠肺组织弥漫性损伤伴有严重水肿及大量炎症细胞浸润,促炎细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α、MPO明显升高,抑炎细胞因子IL-2明显下调(P<0.05);PQ损伤后IL-33在mRNA和蛋白表达水平均显著下调(P<0.05)。关联性分析显示IL-33与病理损伤指标,IL-1β、IL-6、TNF-α、MPO均呈明显负相关(P<0.05),与IL-2呈正相关趋势,但差异无统计学意义。结论 IL-33在PQ诱导小鼠ALI中表达水平下降,提示可能在调解内源性炎症因子平衡中发挥重要作用,可为临床干预和治疗ALI的新靶点。
- 刘晨风吴小红曾扬高同同于虹郭彦孙世惠周育森
- 关键词：百草枯急性肺损伤炎症
- 人 H7N9禽流感病毒与 H1 N1流感病毒感染小鼠病理学损伤的比较被引量：3
- 2014年
- 目的比较分析H7N9病毒与H1N1病毒感染小鼠病理学损伤特点,初步探讨两种病毒感染致小鼠急性肺损伤的致病机制。方法 H7N9病毒与H1N1病毒分别感染小鼠,观察不同病毒感染后小鼠生存率,并于不同时间点取心、肝、脾、肺、肾、脑、肠等组织,伊红-苏木素染色并进行组织病理学分析,免疫组化检测病毒抗原分布及中性粒细胞浸润。综合分析肺组织病理损伤与病毒复制、宿主免疫反应之间的关系。结果 H7N9病毒感染小鼠肺及脾脏损伤较轻,存活率较高。H1N1病毒感染的小鼠肺及脾脏损伤较重,感染后9 d全部死亡;两种病毒抗原主要分布于支气管上皮细胞、少量间质细胞和肺泡上皮细胞,病毒复制水平无明显差异。但H1N1病毒感染后肺及脾脏中均有大量中性粒细胞浸润,小鼠机体炎症反应明显强于H7N9病毒感染后小鼠炎症反应。结论 H7N9病毒与H1N1病毒感染后小鼠病理学损伤特点及程度均不同,病毒复制是小鼠肺损伤的诱发因素但并非决定因素,宿主针对病毒感染产生的免疫反应程度与急性肺损伤密切相关。
- 孙世惠吴小红刘晨风高同同曾扬郭彦唐健潘婷于虹寇志华赵光宇周育森
- 关键词：H1免疫反应小鼠
- LPS／D-GalN 诱导小鼠急性肝损伤模型的建立被引量：16
- 2014年
- 目的建立脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)/D-氨基半乳糖(D-galactosamine,D-GalN)诱导小鼠急性肝损伤模型。方法 40只雌性C57BL/6小鼠用于观察8种不同LPS与D-GalN剂量配比联合刺激后小鼠存活时间,以确定模型建立的最佳剂量。使用腹腔注射最佳剂量染毒32只雌性C57BL/6小鼠,分别在0、1、4、8 h处死,每组8只,0 h注射相同剂量生理盐水作为对照。观察染毒后小鼠肝组织病理损伤,检测血清中ALT及炎症因子IL-6、MCP-1和TNF-α表达水平变化。结果通过观察小鼠存活时间,确定腹腔注射最佳染毒剂量为LPS(2.5 mg/kg)/D-GalN(0.3 g/kg);小鼠染毒后肝组织呈进程性病变,最终发展为肝脏弥漫性坏死,肝细胞核崩解。与对照组相比,血清ALT显著升高(P<0.001),IL-6、MCP-1、TNF-α均在1 h后达到最高水平(P<0.001),然后持续下降。结论成功建立LPS/D-GaIN诱导小鼠急性肝损伤模型,为探索急性肝损伤的致病机制以及药物干预治疗提供有效的动物模型。
- 吴小红郭彦刘晨风高同同于虹孙世惠周育森
- 关键词：内毒素D-氨基半乳糖急性肝损伤小鼠
