屈伸
- 作品数：132 被引量：368H指数：10
- 供职机构：华中科技大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省自然科学基金湖北省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 极低密度脂蛋白受体在糖尿病患者脂肪组织中的分布和表达被引量：8
- 2002年
- 目的 观察极低密度脂蛋白受体 (VLDL R)的两种亚型在糖尿病患者脂肪组织中的分布和表达。方法 手术中采集正常人及糖尿病患者腹壁及肠脂垂脂肪组织 ,从脂肪组织提取的mRNA用半定量 PCR方法扩增。结果 (1)正常腹壁及肠脂垂脂肪组织VLDLⅠ型、Ⅱ型受体均有表达 ,两部位各亚型受体比较 ,统计学分析差异无显著性。 (2 )糖尿病患者腹壁及肠脂垂脂肪组织中 ,Ⅰ型受体的分布和表达量与正常相比无明显变化。但Ⅱ型受体表达明显减少甚至丢失。结论糖尿病代谢紊乱影响VLDL
- 高凌张木勋鲍力屈伸李春蕊
- 关键词：极低密度脂蛋白受体糖尿病脂肪组织基因表达
- 鸡贫血病毒VP3基因的克隆及在H22细胞中的凋亡诱导状况被引量：2
- 2003年
- 目的 :观察CAV、VP3基因在H2 2细胞中的凋亡诱导情况。方法 :用PCR方法扩增了鸡贫血病毒标准株的VP3基因 ,并将其克隆于真核表达载体pcDNA3上 ,构建含VP3基因的重组体 ;在体外 ,利用LipofectAMINETM 介导的基因转染法 ,将pcDNA VP3、pcDNA3分别转入小鼠腹水型肝癌细胞系H2 2中 ,RT PCR法检测VP3基因在细胞中的表达状况。同时利用流式细胞检测术验证VP3基因诱导死亡的方式。结果 :酶切鉴定及测序分析表明 ,插入片段和预期相符 ,阳性重组体被命名为pcDNA VP3;RT PCR结果表明 ,转染后 ,VP3基因在细胞中得到了表达 ;同时DNA直方图也证实鸡贫血病毒的VP3基因确以凋亡的方式诱导细胞死亡。
- 申志发王宇哲孙军宗义强屈伸
- 关键词：贫血病毒VP3基因基因克隆H22细胞肝癌
- DNA高效转染CHO细胞的研究被引量：2
- 2002年
- 为了获得外源基因在CHO细胞中的高效瞬时表达 ,本实验对比研究了常用转染方法转染CHO细胞的效果 ,并采用单因素分析方法优化了在本实验条件下转染效果较好的Lipo fectine转染方法。获得了外源基因在CHO细胞中的高效瞬时表达结果 。
- 刘志国屈伸
- 关键词：CHO细胞脂质体DNA外源基因基因表达
- 米糠蛋白酶解产物中血管紧张素转化酶抑制剂的研究被引量：13
- 2005年
- 目的从米糠蛋白酶解产物中提取制备血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂。方法采用等电点沉淀的方法提取米糠中的蛋白质,先后经胃蛋白酶和胰蛋白酶水解后,采用凝胶层析法分离酶解组分,检测各组分ACE抑制性,对活性较强的组分用阳离子交换树脂SP-Sephadex C-25作进一步的分离检测。结果获得的ACE抑制肽分子量为307.1,其等电点在5～6之间。它在消化液中具有稳定性。其IC50为0.061mg/ml。结论从米糠蛋白酶解产物中获取了ACE抑制剂。
- 毕昊刘志国屈伸王亚林吴琼
- 关键词：米糠蛋白胃蛋白酶胰蛋白酶血管紧张素转化酶抑制剂
- SARS冠状病毒S蛋白部分序列2的克隆与表达被引量：4
- 2003年
- 目的 构建SARS冠状病毒棘突蛋白部分序列 2 (S2 )的原核表达质粒 ,分析其在大肠杆菌中的表达状况。方法 采用逆转录聚合酶链式反应技术从SARS冠状病毒基因组中扩增出编码S蛋白的第 2 170到 2 814位碱基的基因片段 ,克隆至 pMD18-T载体 ,PCR筛选阳性克隆并测序。用限制性内切酶消化后 ,目的片段亚克隆至表达载体pGEX - 4T - 2 ,转化大肠杆菌JM10 9,PCR和双酶切鉴定转化菌落。将阳性菌落经IPTG诱导 ,SDS -PAGE和免疫印迹分析靶蛋白的表达。结果 RT -PCR扩增出S2特异片段 ,经测序与GenBank比对存在 1处碱基突变。S2基因片段亚克隆至表达载体 pGEX - 4T - 2构建成重组表达质粒 ,并在JM 10 9中表达了S2融合蛋白。结论 成功构建了SARS冠状病毒S2的重组表达质粒 ,并在大肠杆菌中表达了S2融合蛋白。
- 秦莉吴少庭王西明袁仕善雷明军潘辉榕黄达娜高世同张仁利屈伸
- 关键词：SARS严重急性呼吸综合征冠状病毒S2蛋白基因克隆
- VLDL致THP-1来源的泡沫细胞的蛋白组学研究
- 目的泡沫细胞是动脉粥样硬化早期的重要特征,LDL、OX-LDL 及 VLDL 均可作用巨噬细胞及单核细胞形成泡沫细胞,泡沫细胞的形成机制目前还不清楚。蛋白质组学是在蛋白质水平上获得对疾病过程、细胞生理生化过程和网络调控体...
- 田俊鲁艳军宗义强孙军刘志国屈伸
- 文献传递
- 电穿孔导入的LacZ基因在人肺癌细胞中的表达
- 1998年
- 选用LacZ基因作为报告基因，用电穿孔法与pSV2neo质位共转化导入人肺巨细胞癌高转移细胞株，经G418及X－gal组化法双重筛检，获得LacZ基因表达阳性的细胞克隆。经X－gal组化染色，该克隆70％细胞蓝染，再经软琼脂培养后，形成的集落蓝染率约为65％，单个集落中的细胞蓝染率可达100％，在裸小鼠皮下或尾静脉接种这一LacZ基因表达阳性的克隆细胞后，在形成的肿瘤及肺内转移灶的冰冻切片中，X－gal染色可观察到蓝染的癌细胞。但由于细胞周期不同步、遗传稳定性以及表达调控因素的影响，则可能是本实验中部分细胞染色阴性的原因。我们的实验表明，LacZ基因有可能在肿瘤转移的研究中作为一种理想标志基因。
- 陆应麟付生法陈坤张朝山屈伸尤颍健
- 关键词：LACZ基因基因转移电穿孔
- 人CD80基因的cDNA克隆及其在肿瘤细胞中的表达被引量：2
- 1998年
- 采用巢式PCR(nested PCR)的方法从Raji细胞中扩增出人CD80 cDNA,并将这一cDNA克隆入载体pUC19中。经PCR扩增和限制性酶切分析,进行初步鉴定后,再将人CD80 cDNA克隆到pcD-NA表达载体上,构建成为pCD-CD80重组质粒。应用脂质体介导的基因转移技术将这一表达载体导入小鼠黑色素瘤B16细胞后,用SABC法进行瞬时表达的检测。结果表明,转染后48h就具有明显人CD80基因的表达产物。
- 熊宇芳李清芬章洁屈伸邓耀祖
- 关键词：肿瘤细胞分子克隆基因治疗
- β极低密度脂蛋白经细胞外信号调节激酶信号途径诱导其受体表达上调被引量：1
- 2004年
- 为探讨β极低密度脂蛋白诱导极低密度脂蛋白受体表达上调的信号转导途径及其对巨噬细胞胞内脂质堆积的影响,采用Western方法检测β极低密度脂蛋白温育后巨噬细胞内的细胞外信号调节激酶活性,在体外培养的巨噬细胞中加入不同信号途径关键激酶的抑制剂,观察各信号途径对受体调控的阻断效应,测定胞内胆固醇和甘油三酯的含量,观察泡沫细胞的形成。结果发现,β极低密度脂蛋白以蛋白激酶C依赖的方式激活巨噬细胞中的细胞外信号调节激酶1/2活性。细胞外信号调节激酶1/2抑制剂和蛋白激酶C抑制剂可显著阻断β极低密度脂蛋白诱导巨噬细胞极低密度脂蛋白受体转录的效应,而P38抑制剂和蛋白激酶C激动剂对β极低密度脂蛋白诱导极低密度脂蛋白受体表达上调无明显影响。细胞外信号调节激酶1/2抑制剂可抑制β极低密度脂蛋白诱导的巨噬细胞内胆固醇和甘油三酯含量升高。上述结果表明,蛋白激酶C依赖的细胞外信号调节激酶1/2信号级联可能是介导β极低密度脂蛋白诱导极低密度脂蛋白受体表达上调的主要信号转导途径,特异地抑制此信号途径可抑制β极低密度脂蛋白诱导的巨噬细胞胞内脂质堆积。
- 王燕冯友梅屈伸吴凡宗义强
- 关键词：极低密度脂蛋白受体细胞外
- oxLDL及炎性因子对ABCA1功能和表达的影响及相关信号转导机制的探讨
- ATP结合盒转运子A1(ATP-binding cassette transporter A1,ABCA1)是一种整合于膜上的转运蛋白,属于ABC蛋白超家族。它可以帮助胞内的游离胆固醇、磷脂与载脂蛋白A-1(apoA-1...
- 吴凡屈伸
- 关键词：ATP结合盒转运子A1氧化型低密度脂蛋白泡沫细胞
- 文献传递
