张丽娜
- 作品数：5 被引量：20H指数：4
- 供职机构：潍坊医学院更多>>
- 发文基金：山东省高等学校科技计划项目山东省优秀中青年科学家科研奖励基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 靶向阻断Snail逆转非小细胞肺癌多药耐药的研究被引量：4
- 2014年
- 目的:探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)上皮-间质转化(epithelialmesenchymal transition,EMT)与多药耐药(multidrug resistance,MDR)基因的相互关系,为临床肺癌治疗提供实验和理论依据。方法:采用免疫组织化学SP法检测52例肺癌组织中Snail、P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)、肺耐药蛋白(lung resistance p rotein,LRP)的表达并分析它们的相关性。用RNA干扰技术稳定敲除肺腺癌细胞系A549中的Snail,采用Western blot法检测稳定转染后Snail蛋白的表达情况。Snail下降后,Western blot法检测P-gp、LRP蛋白表达情况。结果:Snail、P-gp、LRP在NSCLC组织中的表达率分别是73.1%、53.8%、51.9%,P-gp及LRP的蛋白表达与Snail的表达呈正相关。采用RNA干扰的方法成功敲除肺腺癌细胞系A549中Snail基因;A549细胞中Snail基因被敲除后耐药相关蛋白P-gp和LRP的表达明显降低。结论:在NSCLC中,Snail蛋白的表达与耐药相关基因的表达呈正相关;阻断肺癌细胞系A549细胞中的Snail能有效逆转肺癌的多药耐药特性。
- 张丽娜刘菲孙磊田慧玲陈为一李洪利张宝刚尹崇高郭文君
- 关键词：SNAIL上皮一间质转化LRP
- NUAK1能促进乳腺癌上皮-间质转化的发生引起侵袭转移被引量：6
- 2013年
- 目的探讨NUAK1(NUAK family SNF1-like kinase 1)与上皮-间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)及乳腺癌侵袭转移之间的关系。方法应用免疫组织化学染色法检测100例乳腺癌组织及其癌旁正常组织(>5 cm)中NUAK1、EMT相关蛋白上皮-钙黏素(epithelial-cadherin,E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达,并分析其相关性。应用RNAi技术将合成的小RNA干扰质粒瞬时转染乳腺癌细胞系MDA-MB-231后,进行Western blot检测转染成功后,应用Transwell侵袭实验检测细胞体外侵袭能力,再检测转染细胞中E-cadherin、Vimentin蛋白的表达情况。结果浸润性导管癌组织中NUAK1蛋白的表达率明显高于导管内癌和癌旁正常组织(P<0.01);浸润性导管癌中NUAK1蛋白的表达与分化程度、淋巴结转移、远处转移、E-cadherin、Vimentin的表达有关(P<0.05),与患者的年龄、肿瘤的大小、ER、PR及c-erbB-2的表达无关(P>0.05)。转染72 h后,与Scr/MDA-MB-231细胞相比,siNUAK1/MDA-MB-231细胞中NUAK1蛋白表达水平明显降低的同时,细胞的体外侵袭能力明显降低(P<0.05)。并且伴有Vimentin蛋白表达水平的降低和E-cadherin蛋白表达水平的升高(P<0.05)。结论 NUAK1能促进乳腺癌EMT的发生,从而促进乳腺癌的侵袭转移。
- 刘菲孙磊张丽娜田慧玲李洪利李文通张宝刚尹崇高
- 关键词：乳腺癌上皮间质转化E-CADHERINVIMENTIN
- 哺乳期双酚A暴露子代小鼠睾丸结构及雌激素受体α的表达
- 2013年
- 目的研究哺乳期暴露双酚A(bisphenol A,BPA)对初断乳雄性仔鼠睾丸结构及雌激素受体α(ERα)表达的影响及可能机制。方法将18只健康清洁级妊娠ICR母鼠随机分为6组,分别为高(50 mg/kg)、中(5 mg/kg)、低(0.01 mg/kg)剂量BPA染毒组和阳性对照[0.1 mg/kg的雌激素(E2)]组、阴性对照(玉米油)组、空白对照(未经任何处理)组,每组3只母鼠。母鼠自分娩后第2天至第21天(断乳),灌胃染毒。观察第22天仔鼠睾丸形态学改变,并测定仔鼠睾丸中不同区域曲细精管直径;分别采用免疫组化法和Western blot法测定睾丸内ERα蛋白的表达水平。结果高、低剂量BPA染毒组及阳性对照组中睾丸部分节段横切面曲细精管多呈向心性区域性聚集;且高、低剂量BPA染毒组与阳性对照组聚集区域曲细精管直径大于阴性对照组(P<0.05)。与阴性对照组比较,各剂量BPA染毒组仔鼠睾丸内ERα蛋白的表达水平均降低(P<0.05,P<0.01),且ERα的表达水平随着BPA染毒剂量的升高而增加。结论哺乳期接触一定剂量BPA可不同程度地改变子代小鼠睾丸曲细精管的排列方式及成熟度,降低睾丸组织内ERα蛋白的表达水平。
- 董惠郭文君解美娜宋瑞卉张丽娜曲明辉靖旭郝秀峰
- 关键词：双酚A哺乳期睾丸雌激素受体Α
- NUAK1通过影响F-actin聚合促进乳腺癌的侵袭转移被引量：5
- 2013年
- 本课题组先前研究证明NUAK1/ARK5参与乳腺癌、胶质瘤侵袭转移,但机制尚不清楚.本文证明,NUAK1通过影响F-actin聚合促进乳腺癌的侵袭转移.应用小RNA干扰技术敲除乳腺癌细胞系MDA-MB-231中的NUAK1,用G418进行稳定筛选,并用Western印迹进行蛋白质表达检测,结果显示,成功敲除MDA-MB-231细胞中的NUAK1;采用Transwell侵袭实验检测NUAK1在乳腺癌细胞侵袭转移中的作用,结果表明,NUAK1被干扰的SiNUAK1/MDA-231细胞的侵袭能力明显减弱;应用免疫荧光法对细胞的F-actin进行荧光染色,半定量F-actin聚合分析结果显示,IGF-1在转染空载的细胞组(Scr/MDA-231)能诱导肌动蛋白短暂的聚合反应,而在敲除NUAK1的细胞组(SiNUAK1/MDA-231)肌动蛋白的聚合显著减少;用细胞因子IGF-1刺激乳腺癌细胞观察cofilin磷酸化,结果显示,在敲除NUAK1的细胞组(SiNUAK1/MDA-231),IGF-1诱导的cofilin的磷酸化明显受抑制.上述结果表明,NUAK1能通过促进F-actin的聚合从而影响乳腺癌细胞的侵袭转移.
- 尹崇高李平李洪利孙磊刘菲张丽娜李文通张宝刚
- 关键词：乳腺肿瘤
- Gab2-Akt-ARK5通路在胶质瘤侵袭中的研究被引量：5
- 2014年
- 目的:探讨Gab2-Akt-ARK5通路在胶质瘤侵袭中的意义。方法:采用免疫组织化学SP法检测90例胶质瘤组织中ARK5及Gab2表达。采用小RNA干扰转染LN-229细胞株,Western Blot检测瞬时转染后ARK5及Gab2表达。体外侵袭实验检测转染后侵袭能力变化及Western Blot检测Gab2下降后Akt和ARK5的磷酸化。结果:胶质瘤组织中ARK5和Gab2免疫组织化学阳性结果呈正相关且在高级别胶质瘤(WHO分级为Ⅲ、Ⅳ级)中表达明显高于低级别胶质瘤(WHO分级为Ⅰ、Ⅱ级)。转染ARK5、Gab2、ARK5-Gab2及SCR质粒的LN-229细胞分别称siARK5/LN-229、siGab2/LN-229、siARK5-siGab2/LN-229和SCR/LN-229。其中siARK5干扰效率为70%,siGab2的干扰效率为75%。转染后,与SCR/LN-229相比,siARK5/LN-229中ARK5表达降低,siGab2/LN-229中Gab2表达降低,siARK5-siGab2/LN-229中ARK5和Gab2表达均降低。siARK5/LN-229和siGab2/LN-229侵袭并穿透Matrigel膜基质的细胞数均比对照组少(P<0.01),且siARK5-siGab2/LN-229细胞数减少更显著(P<0.01)。在IGF-1刺激下,siGab2/LN-229中Akt和ARK5的磷酸化减弱。结论:应用小RNA干扰技术降低ARK5或Gab2表达使LN-229细胞侵袭转移能力降低,同时Gab2表达降低抑制ARK5和Akt磷酸化,提示Gab2-Akt-ARK5通路参与胶质瘤细胞的侵袭。
- 孙磊刘雨清李小龙刘菲张丽娜李洪利张宝刚
- 关键词：胶质瘤小RNA干扰
