张之甲
- 作品数：8 被引量：33H指数：2
- 供职机构：昆明医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金云南省科技计划项目云南省教育厅科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 改良型TAT-VP3融合蛋白对膀胱癌BIU-87细胞Bcl-2和Survivin表达的影响被引量：1
- 2012年
- 目的探讨应用改良型TAT-VP3融合蛋白干预膀胱癌BIU-87细胞后,对肿瘤细胞的抑制效应,及对Bcl-2和Survivin表达的影响,为以后对改良型TAT-VP3融合蛋白的进一步研究提供实验基础.方法运用MTT比色法检测BIU-87细胞的生长抑制率.利用不同浓度的改良型TAT-VP3融合蛋白干预膀胱癌BIU-87细胞,24 h,48 h,72 h,运用实时荧光定量酶链聚合反应(QPCR)检测Bcl-2和Survivin mRNA的表达变化.运用不同浓度的改良型TAT-VP3融合蛋白干预膀胱癌BIU-87细胞,24 h后蛋白免疫印迹法(Western Blo)t检测Bcl-2和Survivin蛋白的表达情况.结果改良型TAT-VP3融合蛋白干预膀胱癌BIU-87细胞后,肿瘤细胞凋亡率与时间和剂量呈依赖关系(P<0.05),Bcl-2和Survivin mRNA表达与时间和药物剂量呈依赖关系.不同浓度的改良型TAT-VP3融合蛋白作用24 h后,Bcl-2和Survivin蛋白表达与药物剂量呈依赖关系.结论改良型TAT-VP3融合蛋白对膀胱癌BIU-87细胞具有一定的抑制作用,并对凋亡相关因子(Bcl-2和Survivin)的表达有影响.
- 马真李俊王剑松詹辉王春晖张之甲
- 关键词：VP3蛋白膀胱癌BCL-2SURVIVIN
- 改良型TAT-VP3融合蛋白体内外抗膀胱癌效应及裸鼠膀胱癌模型建立的研究
- 目的：研究改良型TAT-VP3融合蛋白体内外抗膀胱癌的效应,探讨裸鼠膀胱癌模型的建立。 方法：应用流式细胞仪,AnnexinV/7-AAD双染法检测膀胱癌细胞凋亡率。通过透射电镜观察凋亡细胞的超微结构变化。将膀胱癌细胞接...
- 张之甲
- 文献传递
- 新的肿瘤转移抑制基因LASS2在不同侵袭潜能的膀胱癌细胞中表达的体外研究被引量：7
- 2011年
- 目的探讨新发现的肿瘤转移抑制基因人源性长寿保障基因Ⅱ型(homo sapiens longevity assurance homologue2,LASS2)与人膀胱癌细胞侵袭潜能的关系。方法通过细胞生长曲线和体外侵袭实验,确定膀胱癌BIU-87、EJ、T24和EJ-M3细胞的增殖和侵袭能力;运用实时定量PCR法和Western blot法检测4株细胞中LASS2基因的表达。结果 4株膀胱癌细胞中,EJ-M3的增殖和侵袭能力最强;增殖和侵袭能力高的细胞系EJ-M3和BIU-87的LASS2mRNA表达降低(P<0.001),而在低转移能力的人膀胱癌细胞株T24和EJ细胞中则相对较高表达。结论 LASS2基因表达的降低,可能与膀胱癌细胞的增殖和侵袭有关。
- 王海峰王剑松丁明霞颜汝平王伟韦海荣杨德林武成闯张之甲
- 关键词：膀胱肿瘤
- 改良型TAT-VP3融合蛋白的原核表达纯化及多克隆抗体的制备被引量：1
- 2012年
- 目的表达、纯化改良型TAT-VP3融合蛋白,并制备其多克隆抗体。方法利用原核表达载体PGEX-6P-1/改良型TAT-VP3在大肠杆菌Rosetta(DE3)中表达,经GST标签纯化树脂纯化蛋白,并用PreScission Protease酶切除标签,以纯化的蛋白免疫新西兰大白兔,获得改良型TAT-VP3融合蛋白的多克隆抗体。用ELISA进行效价检测,Western blotting鉴定其特异性。结果诱导表达并纯化了改良型TAT-VP3融合蛋白,纯度大于90%,蛋白浓度为1.2mg/ml。制备了该蛋白的多克隆抗体,ELISA表明多克隆抗体效价为1:32000,Western blotting证明多克隆抗体的特异性良好。结论成功纯化出改良型TAT-VP3融合蛋白,并制备出高效价、高特异性的多克隆抗体,为进一步研究该蛋白的体内外抗肿瘤活性及作用机制奠定了基础。
- 张之甲李俊詹辉王剑松颜汝平丁明霞刘靖宇王伟李宁
- 关键词：融合蛋白蛋白纯化多克隆抗体
- 改良型TAT-VP3融合蛋白对膀胱癌的抑制效应研究
- 2012年
- 目的探讨改良型TAT-VP3融合蛋白对膀胱癌细胞的抑制效应,为其临床应用于肿瘤的生物大分子药物治疗提供实验基础。方法运用免疫细胞化学染色法确定改良型TAT-VP3融合蛋白进入到膀胱癌细胞EJ的细胞核内,CCK-8检测EJ细胞的生长抑制率,通过透射电镜观察凋亡细胞的超微结构变化,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡率。结果改良型TAT-VP3融合蛋白进入膀胱癌EJ细胞核内;经该融合蛋白作用后,EJ细胞凋亡率呈时间和剂量依赖关系,细胞周期随着药物作用浓度和时间的增加而改变,EJ细胞的生长抑制率随其浓度的增加和作用时间的延长而呈明显上升趋势。结论改良型TAT-VP3融合蛋白对膀胱癌EJ细胞的增殖具有一定的抑制作用,并对该细胞具有凋亡诱导作用。
- 李俊张之甲韩冰冰詹辉王剑松张启波马真
- 关键词：细胞凋亡VP3蛋白膀胱癌
- 鼠类膀胱原位模型建立的研究进展
- 2011年
- 为了研究膀胱癌的发生发展机制，探索和人类膀胱癌的生物学行为类似的动物膀胱癌原位模型是开发新型膀胱腔内抗肿瘤约物的实验基础，本文回顾了以往和最近的鼠类膀胱癌原位模型建立的方法、特点和经验，为更好的指导动物实验提供参考。
- 张之甲李俊王剑松
- 关键词：膀胱肿瘤疾病模型鼠科
- 维持性血液透析患者微炎症状态与心血管并发症相关性研究被引量：25
- 2011年
- 目的探讨维持性血液透析(MHD)患者微炎症状态与心血管疾病(CVD)并发症间的相关性.方法对终末期肾病(ESRD)患者各炎症因子及心血管并发症分别进行观测和分析比较.结果 MHD组各炎症因子分别与未透析组相应指标比较,差异有统计学意义(P<0.05),而且MHD组各炎症因子与心血管并发症的等级有相关性(P<0.05).结论 MHD患者体内存在的严重微炎症反应,其与心血管并发症密切相关.
- 李俊王剑松张之甲
- 关键词：维持性血液透析微炎症状态心血管疾病
