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高速逆流色谱法分离制备中药诃子中的没食子酸被引量：10: 2014年; 利用高速逆流色谱法从100 mg诃子醇提物中一次性分离制备得到8.6 mg没食子酸。通过分析型高速逆流色谱对5种溶剂系统进行筛选,确定以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(体积比为1∶5∶1∶5)为两相溶剂体系并放大到制备型上,以上相为固定相,下相为流动相,在主机转速850 r/min、流动相流速2 mL/min、检测波长254 nm的条件下进行分离制备,获得4个分离峰(组分Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ)。经高效液相色谱检测,按照面积归一法计算,其中组分Ⅲ的纯度达96.40%。经电喷雾电离质谱分析,并结合与没食子酸标准品的高效液相色谱测定结果的对比,确定组分Ⅲ为没食子酸。该方法简便、快速、重复性好,适合于诃子中没食子酸的分离制备。; 李忠琴李秋云江兴龙张坤关瑞章; 关键词：高速逆流色谱没食子酸诃子

5种中药和28种抗生素对养殖鳗鲡致病菌的抑制作用被引量：5: 2014年; 采用琼脂稀释法和纸片扩散法分别测定了5种中药(五倍子、虎杖、黄芩、大黄、石榴皮)和28种抗生素对养殖病鳗中分离到的5株病原菌(创伤弧菌、嗜水气单胞菌和迟钝爱德华氏菌)的体外抑菌作用。结果表明,5种中药对5株致病菌均具有较好的抑菌效果,MIC范围为0.125-1.500 mg/mL,平均抑菌作用依次为五倍子>虎杖>黄芩>大黄>石榴皮,其中五倍子抑菌作用最强,平均MIC为0.200 mg/mL。28种抗生素药物敏感试验结果表明,5株致病菌均对利福平、链霉素、庆大霉素、哌拉西林、青霉素G、强力霉素、头孢曲松、头孢克洛、头孢噻吩、头孢唑啉10种抗生素药物敏感,对奥格门丁、阿奇霉素耐药。; 李秋云李忠琴张坤袁森关瑞章; 关键词：养殖鳗鲡中药抗生素药敏试验

微量热法分析五倍子分离组分对弧菌G1-1的抑菌作用: 采用超声波辅助萃取和高速逆流色谱技术分离得到五倍子的7种组分,溶剂体系为:乙酸乙酯—乙醇—水(5:1:5,v/v).利用微量热仪测定五倍子各组分对弧菌G1-1的抑制曲线,通过细菌生长速率常数和药物浓度之间的关系拟合公式,...; 李忠琴靳恒关瑞章张坤; 关键词：五倍子化学成分抑菌作用微量热法; 文献传递

大黄鱼(Pseudosciaena crocea)致病性维氏气单胞菌的分离鉴定与药敏特性研究被引量：19: 2017年; 本研究从自然发病的养殖大黄鱼(Pseudosciaena crocea)肝脏处分离得到1株优势菌9L2,经形态学观察和传统生理生化鉴定,显示该菌为发酵型革兰氏阴性短杆菌,有动力,氧化酶阳性,水解赖氨酸及色氨酸等。利用Biolog细菌鉴定方法进行种属鉴定,确定9L2为维氏气单胞菌(Aeromonas veronii),相似性达100%。同时对其16S rDNA基因进行PCR扩增、测序和系统发育分析,结果表明该菌与气单胞菌属的菌株亲缘关系最近,与维氏气单胞菌(登录号为LMG13695)的16S rRNA基因序列相似性达99.79%。经人工腹腔注射感染吉富罗非鱼(Oreochromis niloticus)的试验结果表明,9L2对罗非鱼的半数致死剂量LD_(50)为1.08×10~3CFU/g。24种抗生素药敏试验结果表明,该菌株对诺氟沙星、新生霉素、呋喃妥因、头孢曲松等13种药物高度敏感,对洛美沙星、卡那霉素等5种药物中度敏感,对利福平、青霉素等6种药物产生耐药性。20种中药体外抑菌试验结果表明,其中11种对致病菌体外抑菌效果较好,平均抑菌浓度范围为0.11—7.20mg/mL。; 李忠琴张坤林茂赖晓健江兴龙; 关键词：大黄鱼维氏气单胞菌药敏实验病原菌

石榴皮有效抑菌部位萃取工艺的比较分析: 2016年; [目的]优化石榴皮有效抑菌部位的萃取工艺。[方法]采用超声辅助萃取法,选取纯水、甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、正己烷6种溶剂萃取石榴皮抑菌药液。通过琼脂平板法测定石榴皮抑菌药液对9株水产常见致病菌的最低抑菌浓度,正交试验方法考察溶剂浓度、料液比、温度、超声时间对抑菌率的影响,进一步优化石榴皮抑菌药液的萃取工艺。[结果]比较不同溶剂抑菌效果,表明乙醇为最佳萃取溶剂,其萃取部位平均最低抑菌浓度为0.517 mg/m L。在乙醇体积分数70%、料液比1∶20 g/m L、萃取温度60℃、超声时间40 min的最佳萃取工艺条件下,萃取药液平均最低抑菌浓度为0.442 mg/m L。[结论]研究可为石榴皮在水产养殖细菌性疾病防控中的应用和石榴皮抗菌剂的研制及工业化生产提供理论依据。; 张坤林茂李忠琴刘宏伟熊静赖晓健; 关键词：石榴皮超声辅助萃取抑菌正交试验

大黄鱼致病性维氏气单胞菌的分离与鉴定: 首次报道了从自然发病的养殖大黄鱼(Pseudosciaena crocea)肝脏处分离得到的1 株优势菌9L2.经形态学观察和传统生理生化鉴定，显示该菌为发酵型革兰氏阴性短杆菌，有动力，氧化酶阳性，水解赖氨酸及色氨酸等.; 张坤李忠琴黄文树江兴龙; 关键词：大黄鱼维氏气单胞菌药敏实验病原菌

鳗鲡的营养成分·养殖现状与对策被引量：6: 2014年; 从鳗鲡的分布、鳗鲡产业发展现状、养殖种类的变化及其原因以及营养成分(基本营养成分、氨基酸和脂肪酸等)方面对鳗鲡养殖现状进行了综述。; 于海振李秋云张坤; 关键词：营养成分

微量热法拟合分析石榴皮有效组分的抗菌活性: 2016年; 采用高速逆流色谱法分离纯化石榴皮乙醇粗提物中的有效组分,在分析型高速逆流色谱上对分离参数进行了系统优化,并放大至制备型高速逆流色谱。从5种溶剂体系中,确定了正丁醇-甲醇-水(55:1:45,v/v)为最佳两相溶剂体系。在流动相流速2.0 m L/min,主机转速850 r/min,进样量150 mg条件下进行分离制备,获得3个峰(组分I、II、III)。通过微量热法测定了不同浓度的组分I、II抑制类志贺邻单胞菌Sh1生长代谢的热功率-时间曲线。利用软件Origin8.0,根据Logistic方程拟合出各浓度下细菌的生长速率常数k,并建立了生长速率常数与药物浓度的关系,进而计算出两组分的半数抑菌浓度分别为2.16、2.68mg/m L,以期为进一步研制石榴皮抗菌剂及临床应用提供科学理论依据。; 张坤李忠琴林茂赖晓健徐继松; 关键词：LOGISTIC方程高速逆流色谱石榴皮微量热半数抑制浓度

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张坤