徐洋
- 作品数：184 被引量：398H指数：12
- 供职机构：浙江省淡水水产研究所更多>>
- 发文基金：浙江省公益性技术应用研究计划项目公益性行业(农业)科研专项湖州市科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生环境科学与工程更多>>
- 中华鳖爱德华菌病病原菌的分离鉴定及致病因子研究被引量：13
- 2010年
- 采用API 20E系列生化鉴定及16S rDNA和gyrB基因序列同源性分析方法,对从患病中华鳖(Trionyx sinen-sis)肝脏中分离到的一株细菌TL5m进行了鉴定,并通过人工感染试验,对该菌株进行了毒力检测;此外分别提取该TL5m株的主要致病因子外膜蛋白、脂多糖和胞外产物,对中华鳖进行毒力和免疫保护率试验。结果显示:菌株TL5m的API 20E鉴定编码为4544000,99.9%为迟钝爱德华氏菌(Edwardsiella tarda);其16SrDNA序列和gyrB基因序列(GenBank登录号分别:EF121756和GU563803)与迟钝爱德华氏菌的同源性最高(分别为94%和98%);菌株TL5m对中华鳖的半数致死量LD50为2.45×106 CFU/ind。药敏感结果显示菌株对磷霉素、菌必治、头孢孟多、头孢噻吩、壮观霉素高度敏感。外膜蛋白攻毒剂量60μg/ind和脂多糖攻毒剂量400μg/ind时,对中华鳖的致死率都为33.3%,胞外产物对中华鳖的LD50为31.73μg/ind;全菌灭活苗、胞外产物、外膜蛋白和脂多糖的免疫保护率分别为75%、62.5%、25%和87.5%。结果表明,发病中华鳖的病原菌为迟钝爱德华氏菌,其分泌的胞外产物对中华鳖具有较高毒力;提取的脂多糖对中华鳖遭受迟钝爱德华氏菌攻击具有较高免疫保护率。
- 潘晓艺郝贵杰姚嘉赟徐洋沈锦玉尹文林
- 关键词：致病因子
- 草鱼出血病灭活疫苗上调草鱼脾细胞主要免疫分子的表达被引量：7
- 2015年
- 目的探讨草鱼出血病灭活疫苗对草鱼脾脏中Ig M、主要组织相容性复合体Ⅰ(MHCⅠ)、1型干扰素(IFN1)、补体3(C3)、白细胞介素1β(IL-1β)、内凝集素(intelectin)相关基因表达的影响。方法用草鱼肾细胞系(CIK)培养草鱼呼肠孤病毒(GCRV),并制备草鱼出血病灭活疫苗,用生理盐水稀释成50倍和100倍,包括未稀释组及生理盐水对照共4组。分别腹腔免疫注射健康草鱼,各组分别于免疫后0、6、12、24、72 h,取脾脏并抽提总RNA,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测上述6种免疫相关基因mRNA表达。结果与生理盐水对照组相比,免疫注射不同剂量的草鱼出血病灭活疫苗均能刺激草鱼脾脏中6种主要免疫分子不同程度的表达上调,表明疫苗刺激草鱼机体启动了非特异性和特异性免疫应答。在3个疫苗免疫组中,intelectin、MHCⅠ、IL-1β、C3基因的相对表达量都随着时间的推移出现先表达上调,后表达下调;基因IFN1的相对表达量在免疫后6 h达到峰值,之后下降至正常水平;Ig M的相对表达量在所检测时间内呈逐渐上调的趋势。结论草鱼出血病灭活疫苗均能诱导草鱼脾脏中免疫相关分子基因的表达上调。
- 奕志娟郝贵杰袁雪梅潘晓艺徐洋姚嘉赟蔺凌云尹文林沈锦玉
- 关键词：草鱼出血病草鱼呼肠孤病毒灭活疫苗免疫基因
- 黄颡鱼维氏气单胞菌体内诱导基因的筛选被引量：2
- 2015年
- 为筛选黄颡鱼维氏气单胞菌(A.veronii)体内诱导基因,本研究将A.veronii人工感染黄颡鱼,取不同感染时间的血清并混合,分别利用体外培养的A.veronii和宿主菌BL21(DE3)全菌体、两者菌体裂解物以及其热变性裂解物与血清充分吸附处理,同时构建黄颡鱼A.veronii基因组的p ET-30a/b/c系列重组质粒表达文库。以吸附后的血清为探针,采用菌落原位杂交技术对A.veronii基因组文库进行免疫筛选,将筛选的阳性克隆进行测序、分析。结果显示:最终获得了5个A.veronii基因的开放阅读框,分别为核苷酸通透酶nup C基因、多药转运蛋白mat E基因、羧基肽酶cpg2基因、Ⅲ型分泌系统asc V基因以及保守假想蛋白基因。本研究结果为深入了解A.veronii致病的分子机制及保护性抗原的筛选奠定基础。
- 单晓枫康元环徐洋潘晓艺沈锦玉钱爱东
- 关键词：维氏气单胞菌黄颡鱼
- 两株草鱼呼肠孤病毒江西株的分离与鉴定
- 从江西省南昌县莲塘镇的患病草鱼鱼种池塘采集到草鱼出血病疑似病样材料,用除菌过滤后的患病鱼肝脏、脾脏、肾脏组织浆滤液腹腔注射感染8-10cm健康草鱼鱼种,5d后试验鱼发病,可复制出自然发病症状,死亡率达50％以上,对照组未...
- 徐洋郝贵杰沈锦玉郑善坚潘晓艺姚嘉赟尹文林
- 关键词：呼肠孤病毒
- 草鱼出血病核酸疫苗的研制及区域试验
- 郝贵杰沈锦玉潘晓艺尹文林徐洋姚嘉赟钱冬曹铮方勤
- 本项目建立了一种快速检测草鱼呼肠孤病毒（GCRV）的反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）方法并形成操作规程，申请发明专利一项。该方法为草鱼出血病的监控及早期诊断提供了技术支撑，提高了养殖户的经济效益。近年来，在浙江及周边...
- 关键词：
- 关键词：草鱼出血病核酸疫苗
- 大黄鱼病原哈维氏弧菌单克隆抗体的制备及其应用被引量：6
- 2009年
- 用甲醛灭活哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)GYC1108-1制备免疫原免疫8周龄雌性BALB/c小鼠,利用淋巴细胞杂交瘤技术,用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)对杂交瘤进行筛选,阳性克隆经2—3次亚克隆后,共获得5株针对GYC1108-1的单克隆抗体。选取1B7制备小鼠腹水抗体,其细胞上清及腹水效价分别为1∶3200和1∶32000。同样用灭活的哈维氏弧菌免疫新西兰大白兔,5次免疫后颈动脉采血,离心取血清,并用饱和硫酸铵法进行纯化,制备了兔抗哈维氏弧菌多克隆抗体,其ELISA效价为1∶51200。利用1B7单克隆抗体和兔抗哈维氏弧菌多克隆抗体以及山羊抗小鼠HRP酶标二抗,建立了检测哈维氏弧菌的三抗体夹心酶联免疫吸附试验(TAS-ELISA)方法。该方法对哈维氏弧菌的最小检出浓度为1×104个/mL。用该TAS-ELISA方法检测大黄鱼(Pseudosciaena crocea)样品,54尾患病大黄鱼中有45尾检出哈维氏弧菌,而14尾健康大黄鱼都没有检出哈维氏弧菌。由此可见,本试验建立的TAS-ELISA方法,可以用于患病大黄鱼哈维氏弧菌的快速诊断。
- 郝贵杰沈锦玉徐洋姚嘉赟潘晓艺尹文林
- 关键词：大黄鱼哈维氏弧菌单克隆抗体
- 微生态制剂对凡纳滨对虾生长·酶活及养殖水质的影响被引量：4
- 2020年
- 为了研究3种微生态制剂不同的组合方案对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)生长性能、酶活力和抗氧化能力的影响,根据正交试验设计,在饲料中添加不同比例的微生态制剂,确定3因素添加量的最优组合:LK(干酪乳杆菌)10^7 CFU/mL、NJ(侧孢芽孢杆菌)10^6 CFU/mL、JXCB-2(地衣芽孢杆菌)10^7 CFU/mL。通过向养殖水体定期泼洒不同组合方案的微生态制剂,确定了3种微生态制剂添加量的最优组合为:LK(干酪乳杆菌)10^7 CFU/mL、NJ(侧孢芽孢杆菌)10^7 CFU/mL、JXCB-2(地衣芽孢杆菌)10^6 CFU/mL。将最优组合微生态制剂全池定期泼洒与普通对虾养殖池的水体水质及对虾养殖情况进行对比,结果表明微生态制剂对养殖水体水质COD平均降解率为8%,氨氮平均降解率24.4%,亚硝酸盐氮平均降解率31.1%,总氮平均降解率30.1%,总磷平均降解率9.8%,养殖收益较对照组提高了18.7%。
- 刘忆瀚蔺凌云尹文林潘晓艺姚嘉赟徐洋沈锦玉
- 关键词：凡纳滨对虾微生态制剂消化酶活力水质净化
- 一种抗中华鳖免疫球蛋白单克隆抗体及其应用
- 一种抗中华鳖免疫球蛋白单克隆抗体，按以下步骤制备：(1)中华鳖特异性抗原：采中华鳖血置于玻瓶，室温凝固，35～38℃放置1.5～3h，再3～6℃放置8～12h，离心沉淀，取上清，制层析柱，经硫酸铵水溶液粗提并透析浓缩后稀...
- 沈锦玉徐洋郝贵杰潘晓艺姚嘉赟尹文林
- 文献传递
- 一种适用于养殖场商品药物的药敏实验方法
- 本发明涉及药敏实验技术领域，具体是一种适用于养殖场商品药物的药敏实验方法，步骤如下：S1、材料准备；S2、实验物料制备；S3、待测菌株接种物制备；S4、接种平板；S5、打孔器打孔；S6、药液注射；S7、孵育；S8、观察结...
- 慎佩晶高强孟纪伦李喜莲徐洋程海华彭菲
- 淡水虾质量安全状况报告被引量：6
- 2020年
- 党的十九大报告明确提出“实施食品安全战略,让人民吃得放心”,人们生活水平及质量随着社会经济的发展在不断上升,对食品安全也越来越重视。水产品作为主要蛋白来源,产业发展快速、养殖产品日益丰富的同时,其在质量安全方面也存在一些问题。淡水虾类质量安全与多种因素相关,具有综合性、复杂性等特点。为此,本研究从中国淡水虾类产业发展、质量安全总体概况、主要质量安全风险隐患及应对预案和建议等方面进行了总结和分析,可为进一步提高中国淡水虾类产品的质量提供参考依据。
- 高强徐洋陈雪峰顾志敏
- 关键词：罗氏沼虾青虾克氏原螯虾南美白对虾
