李建民 作品数:82 被引量:388 H指数:11 供职机构: 黑龙江中医药大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 黑龙江省自然科学基金 教育部“春晖计划” 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 文化科学 农业科学 更多>>
UVB诱导HaCaT分泌细胞因子对HSF的影响及桃叶珊瑚苷的保护作用 被引量:4 2016年 目的:探讨紫外线B波(UVB)诱导HaCaT分泌细胞因子通过旁分泌机制对HSF的影响及桃叶珊瑚苷的保护作用。方法:将桃叶珊瑚苷作用于正常及光老化HaCaT细胞,ELISA试剂盒检测IL-6、TNF-α含量,并将各组培养液分别作用于HSF细胞,RT-PCR、Western-Blot检测HSF细胞中MMP-1、MMP-3的mRNA及蛋白表达。结果:桃叶珊瑚苷对正常HaCaT细胞分泌IL-6和TNF-α没有显著影响,而对光老化HaCaT分泌IL-6和TNF-α具有显著的抑制作用(P<0.01),光老化HaCaT培养液使HSF中MMP-1、MMP-3的mRNA和蛋白表达量升高,桃叶珊瑚苷处理组能够明显改善这种作用(P<0.01)。结论:桃叶珊瑚苷通过减少炎症细胞因子IL-6、TNF-α分泌来拮抗UV对角质形成细胞的损伤,又可通过抑制旁分泌机制,保护成纤维细胞,抑制MMP-1、MMP-3的过表达,预防光老化。 陈巧云 王业秋 祁永华 李建民 张宁关键词:桃叶珊瑚苷 HACAT细胞 逍遥散有效部位对A375与HacaT细胞共培养模型TYR及其相关蛋白mRNA表达的影响 被引量:7 2014年 目的:探讨逍遥散有效部位对A375与HacaT细胞共培养模型黑素合成的影响及机理。方法:制备逍遥散AB-8大孔树脂柱层析富集物,将其作用于以1∶2的比例构建的A375细胞与HacaT细胞共培养模型,采用Hunt法检测黑素含量,RT-PCR法测定TYR、TRP-1、TRP-2 mRNA的表达。结果:逍遥散大孔树脂柱层析40%乙醇洗脱部位对细胞共培养模型作用显著,与阴性对照组比较,逍遥散4、2 g/L组黑素量分别下调82.23%、93.01%;TYR、TRP-1、TRP-2 mRNA表达量分别下调29.11%、23.78%、20.05%和25.13%、15.02%、11.64%(P<0.01)。结论:逍遥散有效部位提取物可能通过下调TYR、TRP-1和TRP-2 mRNA的表达而降低人黑素瘤细胞的酪氨酸酶活性和黑素合成量。 张宁 刘慧 张明磊 刘斌 任燕冬 王雪 李建民关键词:逍遥散 黄褐斑 欧前胡素治疗黄褐斑作用机理研究 被引量:2 2016年 目的:研究欧前胡素对人黑素瘤细胞(A375细胞)合成黑素的影响,探讨白芷主要成分欧前胡素对黄褐斑治疗作用机理。方法:试验分为空白对照组、雌二醇阳性对照组和欧前胡素浓度为1、10、20、40、60、80μmol·L^(-1)给药组,用上述各组处理A375细胞,用MTT法、Na OH裂解法、多巴氧化法和RT-PCR法检测A375细胞活性、黑素含量、酪氨酸酶(TYR)活性、酪氨酸酶相关蛋白-1、2(TRP-1、TRP-2)、MAPK通路细胞外信号调节酶1、2(ERK1、ERK2)以及氨基末端激酶2(JNK2)的信使RNA表达。结果:阳性对照组对A375活性无影响(P>0.05);欧前胡素浓度在40μmol·L^(-1)以上时,可导致A375细胞大量凋亡(P<0.01);浓度在1~20μmol·L^(-1)时,对A375细胞黑素合成及TYR活性有明显抑制作用(P<0.05或P<0.01),浓度为20μmol·L^(-1)的欧前胡素对A375细胞TYR、TRP-1、TRP-2、ERK1、ERK2及JNK2的mRNA表达具有显著抑制作用(P<0.05或P<0.01)。结论:欧前胡素可通过抑制A375细胞中TYR活性或阻断黑素合成信号的传导,治疗或预防黄褐斑。 吴迪 祁永华 李艳薇 张春蕾 王业秋 张宁 李建民关键词:欧前胡素 黄褐斑 黑素瘤细胞 白芷 甘草酸抑制UVB诱导HaCaT细胞凋亡的机制研究 被引量:3 2019年 目的:研究甘草酸抑制中波紫外线(UVB)诱导人皮肤角质形成细胞(HaCaT)凋亡的机制。方法:以不同浓度的甘草酸作用于人皮肤角质形成细胞(HaCaT细胞),噻唑蓝比色(MTT)法筛选药物的有效安全浓度;用30mJ/cm^2的UVB照射HaCaT细胞,制备光老化模型,MTT法检测细胞增殖率;流式细胞仪检测各组细胞总凋亡率;实时定量PCR(RT-PCR)法检测Bax、Bcl-2m RNA表达水平变化;Western Blot法检测各组细胞上清中Bax、Bcl-2蛋白表达量。结果:1×10^-7、1×10^-6、1×10^-5mol/L甘草酸为最佳有效安全浓度。与空白组比较,UVB组细胞增殖率显著降低(P<0.01);细胞总凋亡率显著显著升高(P<0.01);Baxm RNA表达水平显著升高,Bcl-2mRNA表达水平显著降低(P<0.01);Bax蛋白表达量升高,Bcl-2蛋白表达量显著降低(P<0.01)。与UVB组比较,1×10^-7、1×10^-6、1×10^-5mol/L甘草酸+UVB组细胞增殖率显著升高(P<0.01);细胞总凋亡率显著降低(P<0.01);Baxm RNA表达水平显著降低,Bcl-2mRNA表达水平显著升高(P<0.01,P<0.05);Bax蛋白表达量显著降低,Bcl-2蛋白表达量显著升高(P<0.01,P<0.05)。结论:甘草酸能抑制UVB诱导的HaCaT细胞凋亡,其机制与其下调促凋亡基因Baxm RNA和蛋白的表达,上调抑凋亡基因Bcl-2mRNA和蛋白的表达有关。 张丽宏 傅云 廖建 王业秋 张艳红 李建民关键词:甘草酸 中波紫外线 人角质形成细胞 凋亡 甘草次酸对UVB诱导HaCaT细胞光老化的保护作用及相关细胞因子的影响 被引量:6 2017年 目的:研究甘草次酸对中波紫外线(UVB)诱导人皮肤角质形成细胞(Ha Ca T)细胞光老化的保护作用及相关炎症因子影响。方法:用不同浓度的甘草次酸作用于Ha Ca T细胞,噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞增殖率,筛选出药物最佳有效浓度;用30 m J·cm-2的UVB照射Ha Ca T细胞,建立光老化模型,用3个不同浓度的甘草次酸作用于光老化细胞,MTT比色法检测光老化Ha Ca T细胞增殖率;谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),过氧化氢酶(CAT)和乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒分别检测甘草次酸对光老化Ha Ca T细胞中GSH-Px,CAT和LDH活性的影响;蛋白免疫印记法(Western blot)检测甘草次酸对光老化Ha Ca T细胞中白细胞介素-1β(IL-1β),IL-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白表达量的影响。结果:筛选出1×10-7,1×10-6,1×10-5mol·L-1甘草次酸为最佳有效浓度。与空白组比较,UVB组细胞增殖率显著降低(P<0.01),GSH-Px,CAT活性显著降低,LDH活性显著升高(P<0.01),IL-1β,IL-6,TNF-α蛋白表达量显著升高(P<0.05,P<0.01)。与UVB组比较,1×10-7,1×10-6,1×10-5mol·L-1甘草次酸+UVB组细胞增殖率显著上升(P<0.01),GSH-Px,CAT活性显著上升,LDH活性显著降低(P<0.01),IL-1β,IL-6,TNF-α蛋白表达量显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论:甘草次酸可通过提高GSH-Px,CAT活性,降低LDH活性,减少炎症因子IL-1β,IL-6和TNF-α的表达,从而抑制UVB诱导Ha Ca T细胞光老化。 张丽宏 傅云 廖建 王业秋 张艳红 李建民关键词:甘草次酸 中波紫外线 光老化 细胞因子 水飞蓟宾防晒霜对慢性中波紫外线诱导豚鼠皮肤损伤的保护作用 被引量:1 2017年 目的观察水飞蓟宾防晒霜对慢性中波紫外线(ultraviolet radiationb,UVB)辐射豚鼠皮肤损伤的保护作用,探讨其作用机制。方法将60只豚鼠按随机数字表法分为正常组、模型组、基质组、水飞蓟宾防晒霜组、抗皱日霜组,每组12只。基质组豚鼠背部涂抹基质,水飞蓟宾防晒霜组豚鼠背部涂抹水飞蓟宾防晒霜,抗皱日霜组豚鼠背部涂抹抗皱日霜,正常组与模型组不做处理。涂抹相应药物后,除正常组外,其余各组豚鼠于UVB紫外光疗仪照射,30min/次,2次/d。照射15d后,检测各组豚鼠皮肤GSH-Px、SOD及MDA水平;采用WestermBlot检测各组豚鼠皮肤caspase-3、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated Xprotein,Bax)、Bcl-2蛋白表达。结果与模型组比较,水飞蓟宾组及抗皱日霜组GSH-Px[(8.79±1.57)mg/g、(8.25±2.07)mg/g比(4.66±1.82)mg/g]、SOD[(24.52±5.43)U/rag、(27.8l±2.13)U/mg比Oo.82±3.40)U/mg]水平升高,MDA[(7.9)±2.80)nmol/mg、(6.45±1.86)nmol/mg比(13.57±2.63)nmol/mg]水平降低(P〈0.05或P〈0.01);caspase-3[(0.44±0.04)、(0.38±0.03)比(0.56±0.06)]、Bax[(0.46±0.05)、(0.40±0.06)比(0.75±0.06)]蛋白表达降低,Bcl-2[(0.39±0.04)、(0.43±0.06)比(0.25±0.05)]蛋白表达升高(P〈0.05或P〈0.0r)。结论水飞蓟宾防晒霜可增强豚鼠皮肤GSH-Px、SOD活性、降低MDA水平,对慢性UVB诱导豚鼠皮肤损伤具有保护作用,其作用机制与降低caspase-3、Bax蛋白表达、提高Bcl-2蛋白表达,改善皮肤细胞凋亡有关。 杨柳 王业秋 张宁 李建民关键词:紫外线 氧化性应激 水飞蓟宾 温肾降浊散的HPLC指纹图谱 被引量:2 2013年 目的:应用HPLC建立温肾降浊散的指纹图谱。方法:ANGLA Promosil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),柱温30℃,流动相乙腈-0.1%磷酸水,梯度洗脱,体积流量1.0 mL·min-1;检测波长224 nm,进样量10μL。结果:温肾降浊散中多数峰可以达到基线分离。用中药色谱指纹图谱相似度评价系统对10批样品的指纹图谱进行峰匹配,确定14个共有峰,10批温肾降浊散中共有峰的相对保留时间RSD<1%,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(版本2004 A)计算指纹图谱的相似度均>0.93。结论:该法建立的指纹图谱分离度好、信息量大、基线平稳,可以作为温肾降浊散的质量控制手段并为其有效成分的研究提供依据。 邹韬博 陈曦 李建民 方衡 王发善 张宁 刘海洋关键词:高效液相色谱 指纹图谱 补骨脂素对UVB诱导HaCaT细胞凋亡及相关细胞因子表达的影响 被引量:1 2019年 目的:研究补骨脂素对UVB诱导HaCaT细胞凋亡及相关细胞因子表达的影响。方法:体外培养人皮肤角质形成细胞(HaCaT细胞),取对数生长期的细胞,随机分为空白对照组、UVB组和补骨脂素组,并用30mJ·cm-2的中波紫外线(UVB)照射UVB组和补骨脂素+UVB组,制备光老化模型。MTT法分别测定补骨脂素对正常HaCaT细胞及光老化HaCaT细胞增殖率的影响;活性氧自由基(ROS)试剂盒测定各组细胞中ROS含量;Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒测定各组细胞凋亡率;蛋白免疫印迹(Western Blot)法测定各组细胞中p53、Bcl-2及Caspase-3蛋白的表达量。结果:与空白组比较,10-7、10-6、10-5 mol·L-1补骨脂素对HaCaT细胞增殖率无显著影响(P>0.05),可用于后续实验研究。与空白组比较,UVB组ROS含量和细胞凋亡率显著升高(P<0.01),Bcl-2蛋白表达水平显著降低(P<0.01),p53及Caspase-3蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。与模型组比较,10-7、10-6、10-5 mol·L-1补骨脂素+UVB组ROS含量和细胞凋亡率显著降低(P<0.05,P<0.01),Bcl-2蛋白表达水平显著升高(P<0.05,P<0.01),p53及Caspase-3蛋白表达水平显著下降(P<0.05,P<0.01)。结论:补骨脂素可以通过降低细胞ROS含量和凋亡率,调控凋亡相关细胞因子p53、Bcl-2及Caspase-3的表达水平,抑制UVB诱导的细胞凋亡。 傅云 廖建 王业秋 张丽宏 李建民关键词:补骨脂素 中波紫外线 角质形成细胞 凋亡 逍遥散对急性肝损伤小鼠的肝脏保护作用 被引量:2 2014年 目的:观察逍遥散对四氯化碳(CCl4)致小鼠急性肝损伤的肝脏保护作用。方法将30只小鼠按照随机数字表法分为空白对照组、模型组、逍遥散组,逍遥散组灌胃逍遥散,其余2组灌胃等量蒸馏水。给药后7 d,腹腔注射CCl4花生油溶液诱导小鼠急性肝损伤,16 h后取材,检测小鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、肝组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)浓度,并取肝组织做病理学观察。结果模型组小鼠 ALT、AST、MDA 水平明显升高,SOD 水平明显降低[分别为(136.46±15.75)U/L、(145.37±16.39)U/L、(17.48±3.45)nmol/mg、(261.60±20.29)U/mg],与空白对照组比较[分别为(22.96±6.23)U/L、(31.89±7.26)U/L、(4.22±1.08) nmol /mg、(336.73±25.34)U/mg],差异有统计学意义(P<0.01)。逍遥散组ALT、AST、MDA水平明显降低,SOD水平升高[分别为(89.38±6.96)U/L、(119.04±20.44)U/L、(10.30±2.22)nmol/mg、(304.77±31.71)U/mg],与模型组比较差异有统计学意义(P<0.01或0.05)。结论逍遥散对CCl4致小鼠急性肝损伤有保护作用。 李建民 杨袆楠 张宁 王业秋 李铁男 王发善 刘海洋关键词:逍遥散 药物性肝损伤 杜仲提取物对小鼠皮肤光老化保护作用的实验研究 被引量:5 2012年 目的:研究杜仲提取物对光老化模型小鼠皮肤的保护作用。方法:用紫外光疗仪(UVA+UVB,模拟日光)照射KM小鼠,建立光老化小鼠模型,灌胃或外用给予杜仲提取物,观察小鼠皮肤的组织形态,测定小鼠血浆中超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)的含量。结果:外用及灌胃低剂量杜仲提取物均能有效提高小鼠血浆中SOD活力(P<0.05)、降低MDA含量(P<0.05),且外用能显著减轻小鼠皮肤组织受损程度。结论:杜仲提取物具有抗皮肤光老化的作用,且外用优于口服,作用机制可能与其能够清除自由基和活性氧,从而防止组织过氧化损伤有关。 李建民 刘琦 王雪 张宁 徐艳明 陈巧云关键词:光老化 丙二醛 超氧化物歧化酶