李晓平
- 作品数：11 被引量：12H指数：3
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 人GM－CSF基因在昆虫细胞中表达的研究被引量：2
- 1995年
- 本工作构建的昆虫表达重组体ｐＡＣ６１０－ＧＭＴ，是在ＡｃＭＮＰＶ的Ｐｏｌｙｈｅｄｒｉｎ启动子控制下，表达去除了信号肽编码顺序的人ＧＭ－ＣＳＦ基因（ｃＤＮＡ）的转染载体。它与野生ＡｃＭＮＰＶ病毒ＤＮＡ共转染Ｓｆ２１细胞，经过筛选得到纯化的可表达人ＧＭ－ＣＳＦ的重组病毒株ｖＡｃＧＭＴ。其感染细胞总ＲＮＡ的Ｎｏｒｔｈｅｒｎ分析结果表明，重组病毒在ｍＲＮＡ水平有人ＧＭ－ＣＳＰ特异性表达，其表达水平在感染后４８ｈ时达高峰，７２ｈ未见明显下降。感染细胞裂解物的Ｗｅｓｔｅｒｎ－Ｂｌｏｔ分析和活性测定也证实其蛋白水平的表达，并有人ＧＭ－ＣＳＦ的生物学活性。
- 李江陈卫东贾佩臣何平陈松森李晓平李元
- 关键词：GM-CSF昆虫杆状病毒
- 人α型肿瘤坏死因子基因在昆虫细胞中的表达被引量：3
- 1995年
- 将人肿瘤坏死因子α（Ｔｕｍｏｒ Ｎｅｃｒｏｓｉｓ ＦａｃｔｏｒαＴＮＦ－α）ｃＤＮＡ片段克隆到转移载体ｐＡｃ６１０上，然后与苜蓿尺蠖核型多角体病毒（Ａｕｔｏｇｒｏｐｈａ ｃａｌｉｆｏｒｎｉｃａ Ｎｕｃｌｅａｒ Ｐｏｌｙｈｅｄｒｉｎ Ｖｉｒｕｓ，ＡｃＮＰＶ）ＣＮＡ共转染草地贪夜蛾细胞（Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒｓ ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ）Ｓｆ２１，获得含ｈＴＮＦ－α为１．０×１．＾４ｕ／１０＾６细胞：同时。
- 李晓平李元刘菊萍吴旻
- 关键词：肿瘤坏死因子Α基因基因表达昆虫细胞
- 采用DNA重组技术研制丁胺卡那霉素
- 1992年
- 丁胺卡那霉素是一种新型半合成抗生素,是卡那霉素A-α脱氧链霉胺部分碳,位置氨基被α-羟基-r-氨丁酸(HABA)酰化的产物,其抗菌效果与卡那霉素相当,但对耐卡那霉素和庆大霉素的菌有效,抗绿脓杆菌且耳毒性较低。在国外已广泛使用。国内采用半合成方法已经研制成功,由于成本高,价格贵,难以广泛使用。丁酰苷菌素是由环状芽孢杆菌产生的一种氨基糖苷类抗生素,其结构具有HABA侧链。
- 李元刘伯英石莲英李晓平
- 关键词：DNA重组技术丁胺卡那霉素半合成抗生素抗绿脓杆菌环状芽孢杆菌
- 丙酰螺旋霉素基因工程菌构建的研究被引量：3
- 1992年
- 将含有丙酰化酶基因的pIJM9重组质粒转化至螺旋霉素生产菌株S.spiramyceticus获得的转化子,经菌落原位杂交和Southern分子杂交表明,No.61转化子含有pIJM9重组质粒,其发酵产物经薄层层析,生物显迹试验证明,含有与丙酰螺旋霉素标准品Rf值相类似的组分,高压液相色谱分析也证明其产物中有与丙酰螺旋霉素保留时间基本一致的成份,质谱分析结果表明产物中含有与丙酰螺旋霉素Ⅱ相同的组分,这说明No.61克隆菌株是能够直接产生丙酰螺旋霉素的基因工程菌。
- 李元刘伯英李晓平杨毓芬王硕昌
- 克隆有丙酰化酶基因的螺旋霉素链霉菌的构建方法
- 本发明涉及微生物领域，特别是克隆有丙酰化酶基因的螺旋霉素链霉菌的构建方法。本发明采用基因工程方法，其中包括采用质粒R<Sup>IJ702</Sup>为载体对生米卡链霉菌总DNA进行鸟枪克隆，转化至变铅青链霉菌TK54，挑...
- 李元李焕娄石莲英刘伯英李晓平
- 文献传递
- 抗肿瘤抗生素(C-1027)产生菌Streptomyces geobisporus质粒pSGLI的分离及限制性内切酶图谱的构建被引量：3
- 1992年
- 在抗肿瘤抗生素(C-1027)产生菌球孢链霉菌(Streptomyces globisporus)中发现一新的质粒pSGL1,其分子量为7.40Kb。 采用Katz等的方法分离提取了质粒pSGL1,pSGL1经单酶切实验证明:PvuⅡ,PstⅠ、XbaⅠ、XhoⅠ和KpnⅠ为单切点;SmnaⅠ为双切点;SalⅠ和BamHⅠ为四切点;而EcoRⅠ、HindⅢ、BgⅢ和PvuⅠ则没有切点,经一系列双酶切实验,构建了质粒pSGLⅠ的限制性内切酶图谱。
- 李晓平李元
- 关键词：质粒抗肿瘤抗生素
- 脱氧新羟曲霉酸及制备及其用途
- 本发明涉及一种如下式1所示的新结构化合物，脱氧新羟曲霉酸。本发明还涉及一种产生所述脱氧新羟曲霉酸的微生物，以及利用所述微生物制备脱氧新羟曲霉酸的方法。本发明还涉及脱氧新羟曲霉酸用于具有制备通过上调高密度脂蛋白受体表达活性...
- 司书毅洪斌姜威张月琴田德峰黄明玉李晓平巫晔翔杨媛刘晓辉王丽非
- 文献传递
- 脱氧新羟曲霉酸及制备及其用途
- 本发明涉及一种如下式1所示的新结构化合物，脱氧新羟曲霉酸。本发明还涉及一种产生所述脱氧新羟曲霉酸的微生物，以及利用所述微生物制备脱氧新羟曲霉酸的方法。本发明还涉及脱氧新羟曲霉酸用于具有制备通过上调高密度脂蛋白受体表达活性...
- 司书毅洪斌姜威张月琴田德峰黄明玉李晓平巫晔翔杨媛刘晓辉王丽非
- 文献传递
- 克隆有丙酰化酶基因的螺旋霉素链霉菌的构建方法
- 本发明涉及微生物领域，特别是克隆有丙酰化酶基因的螺旋霉素链霉菌的构建方法。本发明采用基因工程方法，其中包括采用质粒PIJ702为载体对生米卡链霉菌总DNA进行鸟枪克隆，转化至变铅青链霉菌TK54，挑选转化子和提取重组质粒...
- 李元李焕娄石莲英刘伯英李晓平
- 文献传递
- 生米卡链霉菌变株丙酰化酶基因的克隆和表达被引量：3
- 1991年
- 麦迪霉素产生菌生米卡链霉菌(Streptomyces mycarofaciens)变株具有丙酰化酶活性,可以将螺旋霉素转化为丙酰螺旋霉素。为了进行丙酰化酶基因克隆,本实验以质粒pIJ702为载体通过鸟枪克隆法将变株DNA片段克隆至变铅青链霉菌TK54(Streptomyces lividanTK54),经薄层层析和高压液相色谱分析结果表明,在转化子中,No.9菌株可以将螺旋霉素转化为丙酰螺旋霉素,这证明丙酰化酶基因已在变铅青链霉菌TK54中克隆并得到初步表达,No.9重组质粒插入DNA片段为4.16kb,经Soutnern杂交表明确实来源于变株。此外还构建了No.9重组质粒的限制酶酶切图谱。
- 李元孙亚萍石莲英李晓平李焕娄
- 关键词：克隆
