杜海军
- 作品数：9 被引量：104H指数：3
- 供职机构：首都医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 转染人血红素加氧酶-1基因对大鼠血管平滑肌细胞抗氧化损伤的作用被引量：14
- 2002年
- 本实验构建含人血红素加氧酶 1(hHO 1)基因的逆转录病毒载体XM 6/hHO 1,将其导入离体培养的大鼠血管平滑肌细胞 (vascularsmoothmusclecells,VSMC) ,观察外源性hHO 1基因在VSMC内的表达及其抗活性氧损伤作用。结果表明 :( 1)hHO 1基因可在靶细胞中明显表达 ,转染VSMC的HO 1蛋白表达和HO酶活性分别比非转染细胞高 1 8倍和 2 0倍 ;( 2 )转染hHO 1的VSMC可对抗大剂量H2 O2 对细胞的损伤作用 ,表现为细胞存活率增加和乳酸脱氢酶 (LDH)漏出减少 ,上述保护作用可被HO特异性抑制剂锌原卟啉IX (Zinc protoporphyrinIX ,ZnPP IX)所阻断。研究结果提示 ,外源性HO
- 张敏安威杜海军陈莉张宝慧
- 关键词：血红素加氧酶-1逆转录病毒载体血管平滑肌细胞基因转染抗氧化损伤
- 重组人肝刺激物在原核细胞中的表达与纯化被引量：6
- 2002年
- 利用基因重组技术 ,构建成人肝刺激因子 (hHSS)和谷胱甘肽转移酶 (GST)融合表达载体 ,转化大肠杆菌BL 2 1(DE3 ) ,以His·Tag亲和层析纯化表达产物 ,FactorXa切割分离hHSS单体 ,并检测其生物学活性。结果显示 ,在pET 4 2a表达体系中hHSS以可溶性蛋白和包涵体两种形式存在 ,GST hHSS表达量占菌体可溶性蛋白的3 0 % ;FactorXa切割GST与hHSS之间肽腱 ,得到 3 3和 15kD两条蛋白带 ,经Western杂交证实 3 3kD条带为GST ,而 15kD条带的分子量与hHSS基因序列推测蛋白结果相符。经His·Tag再次纯化可获得hHSS单体 。
- 杜海军孙红柳陈莉安威
- 关键词：融合蛋白原核表达纯化
- 转染肝刺激因子基因增强肝癌细胞抗损伤作用研究被引量：2
- 2004年
- 目的 将人肝刺激因子基因(hHSS)转染BEL-7402肝癌细胞,探讨其增强细胞抗损伤的作用。 方法 于肝癌细胞中转染hHSS,并以MTT法检测转染细胞活性;采用CCl4和H2O2损伤细胞,测定细胞死亡率和凋亡率,以及丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)活性变化,观察转染细胞的抗损伤能力。 结果 hHSS表达的肝癌细胞增殖速度加快,同时转染hHSS细胞具有保护细胞免受两种毒剂的氧化损伤的能力,可以明显降低细胞死亡率及凋亡率[在CCl1-处理组和H2O2-处理组空载体对照凋亡细胞率分别为(32.44±0.52)％和(47.78±0.45)％,转染细胞凋亡率分别为(25.60±0.66)％和(37.40±0.69)％,t值分别为16.82和25.2,P<0.01],并活化酪氨酸信号分子MAPK。 结论 hHSS基因的功能与刺激细胞增殖有关。
- 陈莉孙红柳杨琳杜海军安威
- 关键词：基因转染肝刺激因子肝癌氧自由基抗损伤
- 去甲斑蝥素对人乳腺癌细胞系的凋亡诱导作用及bcl-2基因的表达(英文)被引量：81
- 2000年
- 目的：探讨去甲斑蝥素抗肿瘤作用的分子机制。方法：用 10μ g/ml去甲斑蝥素处理体外培养的人乳腺癌细胞系 MCF-7。处理后，在不同时间点，采用普通光镜、电子显微镜观察去甲斑蝥素对乳腺癌细胞的诱导凋亡现象。利用流式细胞仪分析凋亡细胞百分比，用蛋白印迹杂交方法对凋亡抑制基因 bcl-2的表达情况进行检测。结果：经 10μ g/ml去甲斑蝥素处理 12 h后，可观察到 MCF-7细胞变形、出泡，从培养瓶底脱离。细胞染色和电子显微镜可观察到染色质浓聚、边集，且随着药物作用时间的延长，凋亡细胞百分比逐渐增加。与对照组相比，凋亡抑制基因 bcl-2的表达降低。结论 :诱导肿瘤细胞凋亡可能是去甲斑蝥素抗肿瘤作用的分子机制之一。
- 戎煜梁福佑陈莉杜海军刘乐尧孙红柳安威
- 关键词：去甲斑蝥素乳腺肿瘤BCL-2基因
- 重组人肝刺激因子(rhHSS)在原核细胞中的非融合性表达、纯化以及性质的研究
- 目的:由于人肝刺激因子(human hepatic stimulator,hHSS)在细胞含量少,纯化困难,通过构建原核表达载体,以期获得大量高效率、高纯度的非融合的可溶性重组hHSS,以便深入研究其生物学活性。方法:经...
- 杨琳吕璟杜海军安威
- 关键词：原核细胞
- 文献传递
- 重组hHSS基因对肝癌细胞增殖影响及其在原核细胞中表达的研究
- 该研究利用基因体外表达技术,对人肝刺激因子(hHSS)基因分别进行真核及原核细胞的体外表达,旨在证实HSS对离体肝细胞的保护及促增殖作用,并为进一步深入研究HSS结构和作用机制提供功能蛋白.结果表明:真核表达载体pcDN...
- 杜海军
- 关键词：肝癌细胞融合蛋白细胞增殖
- 文献传递
- 人重组肝刺激因子增强肝癌细胞抗凋亡的作用及其应用
- 本发明涉及人重组肝刺激因子在制备抗肿瘤细胞凋亡的药剂中的用途。所述的人重组肝刺激因子纯化后为分子量是31kD的同源二聚体蛋白，等电点为4.5，在pH4－10和温度≤80℃的环境中结构稳定。本发明还涉及人重组肝刺激因子在抗...
- 安威吴媛陈莉阳志成杨琳杜海军
- 文献传递
- 人重组肝刺激因子增强肝癌细胞抗凋亡的作用及其应用
- 本发明涉及人重组肝刺激因子在制备抗肿瘤细胞凋亡的药剂中的用途。所述的人重组肝刺激因子纯化后为分子量是31kD的同源二聚体蛋白，等电点为4.5，在pH4-10和温度≤80℃的环境中结构稳定。本发明还涉及人重组肝刺激因子在抗...
- 安威吴媛陈莉阳志成杨琳杜海军
- 文献传递
- 转人肝刺激物质基因的肝癌细胞增殖状态研究被引量：3
- 2001年
- 本文通过研究转染人肝刺激物质 (hepaticstimulatorsubstance ,HSS)的肝癌细胞增殖状态 ,进一步探讨了该基因的生物学功能。将人HSS基因导入BEL 740 2肝癌细胞 ,用Northern和Southern杂交法证实该基因在靶细胞中有稳定表达。并通过测定细胞生长曲线、细胞S期比例和细胞MAPK活性 ,观察到转HSS基因BEL 740 2细胞增殖发生了改变。实验结果提示 ,HSS表达的肝癌细胞DNA合成增加、增殖速度加快 ,可能与MAPK激活有关。HSS基因表达可促进细胞增殖。
- 安威杜海军陈莉
- 关键词：基因转染肝癌细胞增殖
