王铁东
- 作品数：45 被引量：61H指数：5
- 供职机构：吉林大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金转基因生物新品种培育专项吉林省科技发展计划基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 一种用于制备人类疾病动物模型的转基因猪及其培育方法
- 本发明提供一种用于制备人类疾病动物模型的转基因猪及其培养方法，采用基因工程的方法构建诱导性表达Cre重组酶表达载体pET28a－Mxl－Cre－BGHpolyA－FRT2neoR，用干扰素诱导剂聚肌胞(polyI：C)进...
- 欧阳洪生逄大欣陈立梅李莉李占军王铁东张明军任林柱闫森宋娜
- 文献传递
- 活性UL36-480-GST蛋白及其制备方法和应用
- 本发明提供了一种活性UL36‑480‑GST蛋白及其制备方法，以MDV病毒编码的UL36‑480去泛素化酶作为靶点，并在其C端融合一个促进蛋白溶解便于纯化的GST标签、Thrombin蛋白酶切位点、Gly‑Gly‑Gly...
- 艾永兴王梦涵许佳翠吕岩周小露吴山力王铁东于浩王梦云周宏达周文杰
- 文献传递
- 逆转录病毒介导的天蚕抗菌肽B在奶牛乳腺中的表达
- 2009年
- 为了研究天蚕抗菌肽在奶牛乳腺组织长期表达的可行性以及对大肠杆菌的抑制作用,将天蚕抗菌肽B(cecropin B,CB)的基因序列以哺乳动物偏爱的密码子优化后,合成了四条相互重叠的DNA片段,通过重叠延伸PCR法获得了天蚕抗菌肽B的基因,将其亚克隆至T载体,测序正确后构建逆转录病毒载体pLNCX-bCP-cecB,经过包装细胞的包装,获得含有天蚕抗菌肽B表达框的逆转录病毒,注射入奶牛乳腺组织,通过琼脂板孔穴扩散法检测基因的表达及活性;实验结果表明,克隆的抗菌肽基因在乳腺中获得了表达,表达产物对大肠杆菌具有抑制作用,抑制效果可以持续至13天以上。
- 王铁东逄大欣欧阳红生
- 关键词：抗菌肽天蚕素B逆转录病毒
- 双温多重PCR鉴定猪早期胚胎性别的试剂盒
- 本发明一种双温多重PCR鉴定猪早期胚胎性别的方法及试剂盒，建立一种快速、灵敏、准确率高的适用于猪早期胚胎性别鉴定的双温多重PCR反应体系，用于猪早期胚胎的性别鉴定。以双温多重PCR技术体系开发的猪早期胚胎性别鉴定试剂盒，...
- 欧阳红生李小平逄大欣高飞闫森赖良学王铁东李莉于浩
- 文献传递
- 不同环境对甜菜红色素稳定性的影响被引量：3
- 2006年
- 通过甜菜红色素在不同加工环境中稳定性的表现,确定最佳工艺参数,使甜菜红色素在生产过程中得以正确使用。
- 李达刘兆庆姜媛媛王铁东
- 关键词：稳定性
- 质粒载体表达抑制猪瘟病毒shRNA在猪胚胎成纤维细胞上的复制被引量：5
- 2009年
- 以质粒pSilencer3.1 Hygro为基础,构建了针对猪瘟病毒Npro基因和NS4A基因mRNA的siRNA双表达载体,转染猪胚胎成纤维细胞后,在潮霉素B的筛选压力下,获得5株稳定整合shRNA表达盒的猪胚胎成纤维细胞克隆。以100TCID50的CSFV分别感染96孔板内的上述细胞克隆,72 h后对感染细胞克隆进行间接免疫荧光分析及子代病毒滴度检测,结果显示,在所获得的5株细胞克隆中,有3株细胞上猪瘟病毒的增殖明显降低,表明所构建siRNA双表达载体转录产生的siRNA可以有效抑制CSFV的复制。本试验为研究猪瘟病毒的防治和通过RNAi建立猪的抗病育种提供了新的方法。
- 王铁东李莉逄大新涂长春欧阳红生
- 关键词：猪瘟病毒RNAI抗病毒
- 抗菌肽天蚕素B基因的克隆及其在山羊乳腺中的暂态表达被引量：3
- 2009年
- 根据已发表的天蚕素B的cDNA序列化学合成4条引物,以重叠延伸PCR的方法合成了真核细胞偏爱密码子编码的抗菌肽天蚕素B基因,将其克隆于pMD18-T载体,DNA序列分析证实合成的抗菌肽基因的碱基序列与设计的序列完全一致。利用山羊-β酪蛋白基因5′侧翼调控序列和真核基因表达载体pIRES1-neo,构建抗菌肽天蚕素B的乳腺组织特异性表达载体pbCP-cpin,将该载体溶于生理盐水,注入处于泌乳期的成年母山羊乳腺组织进行暂时表达。通过对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑菌试验确定了抗菌肽天蚕素B基因在山羊乳腺中的表达和抗菌活性。本试验建立了抗菌肽天蚕素B的乳腺瞬时表达系统,为验证各调控元件以及抗菌肽基因在转基因动物乳汁中分泌表达的有效性和可行性提供了一个快速检测系统。
- 王铁东李小平逄大欣欧阳红生
- 关键词：抗菌肽天蚕素乳腺
- 一种基因片段、载体pPlasmid‑Clearance及应用
- 本发明公开了一种基因片段，所述基因片段的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，本发明还提供了一种载体pPlasmid‑Clearance，所述载体pPlasmid‑Clearance是通过同源重组的方法，在接合转移载体...
- 王铁东王大成向华董海司母丹明迪王琳邓旭明
- 文献传递
- 一种线性多泛素基因的连接方法
- 本发明提供一种连接多泛素基因的方法，提供了优化的泛素（ubiquitin、Ub）基因作为多泛素基因连接的基本单位，用于表达载体的构建，同时本方法利用泛素基因的3’端核苷酸序列的特殊性来设计特殊的平末端酶切位点，并通过平末...
- 艾永兴周宏达许家翠吕岩周小露吴山力王铁东于浩王梦云王梦涵周文杰
- 文献传递
- 一种线性多泛素基因的连接方法
- 本发明提供一种连接多泛素基因的方法，提供了优化的泛素（ubiquitin、Ub）基因作为多泛素基因连接的基本单位，用于表达载体的构建，同时本方法利用泛素基因的3’端核苷酸序列的特殊性来设计特殊的平末端酶切位点，并通过平末...
- 艾永兴周宏达许家翠吕岩周小露吴山力王铁东于浩王梦云王梦涵周文杰
