祝寒松
- 作品数：15 被引量：35H指数：4
- 供职机构：郑州大学公共卫生学院更多>>
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- 相关领域：医药卫生环境科学与工程建筑科学更多>>
- 煤焦沥青烟提取物致BEAS-2B恶性转化细胞中心体及其调控蛋白的变化被引量：1
- 2013年
- 目的 分析煤焦沥青烟提取物诱导人支气管上皮细胞BEAS-2B恶变过程中细胞内中心体及其调控蛋白的变化,探讨中心体在煤焦沥青烟提取物致肺癌中的作用及机制.方法 用中温煤焦沥青烟提取物作为诱导剂,建立永生化人支气管上皮细胞BEAS-2B的恶性转化模型,作为煤焦沥青烟提取物染毒组（煤焦沥青组）,设溶剂对照组和正常对照组平行传代培养,用细胞爬片间接免疫荧光法检测中心体改变,用实时定量反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）法检测相关基因的mRNA表达;细胞爬片免疫组化半定量法检测相关蛋白表达.结果 煤焦沥青组第20代细胞中心体总异常率为6.56％±1.01％,明显高于正常对照组（3.40％±0.86％）和溶剂对照组（3.14％±0.59％）,差异有统计学意义（P＜0.05）.与正常对照组（4.34％±1.04％）和溶剂对照组（4.33％±1.20％）比较,煤焦沥青组第30代细胞中心体总异常比例（22.39％±9.5％）明显增大,差异有统计学意义（P＜0.05）.煤焦沥青组第20、30代细胞的P53、P21基因和蛋白表达明显降低,Cyclin E基因和蛋白表达明显升高,与正常对照组相和溶剂对照组比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 在煤焦沥青烟提取物诱导BEAS-2B细胞恶性转化过程中,中心体异常出现在细胞恶性改变前.中心体异常可能是通过P53/P2 1/CyclinE通路异常而引起.
- 李智涛冯艳铭王威燕贞王丽霞祝寒松赵勇吴拥军吴逸明
- 关键词：煤焦沥青中心体细胞周期蛋白质类
- 煤焦沥青烟提取物致BEAS－2B恶性转化细胞端粒蛋白的变化被引量：2
- 2011年
- 目的通过检测端粒保卫蛋白复合体中端粒保卫蛋白1（POT1）、端粒重复序列结合因子1（TRF1）和TRF2在煤焦沥青烟致永生化人支气管上皮细胞（BEAS－2B）癌变细胞中的表达变化，探讨其在煤焦沥青烟致肺癌发生中的作用。方法用中温煤焦沥青烟提取物作为诱导剂，建立BEAS－2B的恶性转化模型，用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应法（RT—PCR）检测POTI、TRF1和TRF2基因mRNA表达水平；细胞爬片免疫组化半定量法检测其蛋白表达改变。结果BEAS－2B恶性转化细胞POT1和TRF1基因mRNA表达水平（分别为：0．63±0．04，0．36±0．01）和蛋白表达水平（分别为：0．36±0．05，0．09±0．03）均下调，与正常对照组（mRNA：POT1：1．00±0．04，TRF1：1．01±0．16；蛋白：POT1：0．55±0．07，TRF1：0．27±0．07）和二甲亚砜溶剂对照组（mRNA：POT1：0．89±0．12，TRF1：0．90±0．08；蛋白：POT1：0．55±0．10，TRF1：0．26±0．04）相比，差异均有统计学意义（P〈0．05）。BEAS-2B恶性转化细胞TRF2基因mRNA表达水平（1．45±0．07）和蛋白表达水平（0．88±0．06）均上调，与正常对照组（mRNA：1．00±0．07，蛋白：0．48±0．06）和二甲亚砜溶剂对照组（mRNA：1．00±0．06，蛋白：0．50±0．06）相比，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论在煤焦沥青烟致支气管上皮细胞恶性演化过程中，POT1、TRF1和TRF2基因和蛋白表达水平发生变化。
- 王威李智涛祝寒松赵勇王丽霞燕贞李时恩许东吴卫东吴拥军吴逸明
- 关键词：煤焦油端粒
- 焦炉工血清丙二醛和尿β_2-微球蛋白的变化被引量：4
- 2010年
- 目的探讨焦炉作业工人血清中丙二醛(MDA)及尿β2-微球蛋白(β2-MG)的水平及意义。方法选择106名焦炉作业工人作为接触组,72名无任何职业有害物质接触史的体检者作为对照组。采集空腹静脉血和尿样,用试剂盒检测血清MDA和尿β2-MG水平。结果与对照组比较,接触组焦炉工血清MDA水平明显增高;经尿肌酐校正后的尿β2-MG水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。在接触组中,炉顶工血MDA和尿β2-MG水平均高于炉侧工和炉底工,差异有统计学意义(P<0.05)。178名调查者血MDA和尿β2-MG呈正相关。结论焦炉逸散物可导致焦炉工人生物膜氧化损伤和早期的肾损害,可以把血清MDA和尿β2-MG一起作为焦炉工人职业损害的检测指标。
- 王丽霞王诗斌赵勇祝寒松李智涛李时恩吴逸明
- 关键词：焦炉工焦炉逸散物尿Β2-微球蛋白丙二醛
- 焦炉逸散物接触对煤焦作业工人免疫调节因子的影响被引量：7
- 2010年
- 目的探讨焦炉逸散物接触对煤焦作业工人免疫调节因子的影响。方法采用职业卫生现场调查与实验室研究相结合的方法,测定作业环境中苯并(a)芘、苯溶物、焦炉逸散物等有害物质的质量浓度;选择91名焦炉作业工人作为接触组,80名无任何职业有害物质接触史的体检者作为对照组,采集空腹静脉血,用试剂盒检测血清中重要细胞免疫调节因子白细胞介素(IL)-2、IL-10、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平。结果焦炉作业工人工作场所存在职业有害因素,且炉顶有害物质质量浓度高于炉侧,存在职业有害因素;与对照组相比,焦炉作业工人血清IL-10、TNF-α水平均升高,IL-2水平则降低,差异有统计学意义(P<0.05)。在接触组中,炉顶工组、炉底工组IL-10、TNF-α高于炉侧工组,差异有统计学意义(P<0.05),IL-2水平差异无统计学意义(P>0.05)。焦炉作业工人血清IL-10与TNF-α水平及工作区域有害物质质量浓度之间呈正相关,IL-2水平及工作区域有害物质质量浓度之间呈负相关。结论本研究提示焦炉逸散物的接触可以引起体内免疫系统分泌的相应免疫调节因子IL-10、TNF-α水平升高,IL-2水平降低。IL-10、TNF-α水平升高与IL-2水平降低可以在一定程度上作为机体的焦炉逸散物接触程度的指标。
- 赵勇王诗斌王丽霞祝寒松李智涛李时恩吴逸明
- 关键词：白细胞介素-2白细胞介素-10肿瘤坏死因子-Α焦炉逸散物
- 煤焦沥青烟提取物对BEAS-2B细胞的遗传毒性
- 目的 通过单细胞凝胶电泳技术探讨煤焦沥青烟提取物(Coal tar pitch extract, CTPE)对人支气管上皮细胞(BEAS-2B)的遗传毒性.方法 采用2mg/ml CTPE染毒BEAS-2B细胞24h,二...
- 段书音李智涛王威赵勇王丽霞祝寒松晋乐飞吴逸明冯斐斐
- 煤焦沥青烟提取物致BEAS-2B恶性转化细胞中姊妹染色单体分离相关蛋白的改变被引量：2
- 2010年
- 目的 通过检测姊妹染色体凝集和分离相关蛋白染色体结构维持蛋白（SMC）1、SMC3、分离酶（Separase）和保全素（Securin）在煤焦沥青致BEAS-2B癌变细胞中的变化,探讨其在煤焦沥青接触者肺癌发生中的作用.方法 用中温煤焦沥青烟提取物作为诱导剂,建立永生化人支气管上皮细胞BEAS-2B的恶性转化模型,用实时定量反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测相关基因的mRNA表达水平;细胞爬片免疫组化半定量法检测其蛋白表达改变.以二甲亚砜（DMSO）溶剂组和未染毒的正常传代的BEAS-2B细胞为对照组.结果 与正常对照组和DMSO溶剂对照组比较,煤焦沥青烟提取物诱导转化细胞中,SMC1基因和蛋白表达水平的差异无统计学意义（P＞0.05）;煤焦沥青烟诱导组SMC3和Separase的基因和蛋白表达水平明显升高（基因：SMC3：2.54±0.20、Separase：2.42±0.22,蛋白：SMC3：0.27±0.02、Separase：0.25±0.02）,Securin的基因和蛋白表达水平明显降低（基因：0.30±0.04,蛋白：0.17±0.01）,与其他两组（DMSO溶剂对照组：基因：SMC3：1.13±0.12、Separase：1.00±0.04、Securin：0.90±0.11,蛋白：SMC3：0.10±0.03、Separase：0.18±0.02、Securin：0.22±0.02;正常对照组：基因：SMC3：1.00±0.11、Separase：1.00±0.08、Securin：1.00±0.11,蛋白：SMC3：0.09±0.01、Separase：0.18±0.01、Securin：0.23±0.02）相比,差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 在煤焦沥青致支气管上皮细胞恶性转化过程中,姊妹染色单体凝集和分离相关蛋白SMC3和Separase升高,Securin表达水平降低,参与了细胞恶性转化过程.
- 李智涛王威赵勇王丽霞祝寒松吴卫东吴逸明
- 关键词：煤焦沥青恶性转化
- 煤焦沥青烟提取物致支气管上皮细胞系恶性转化细胞中Bub1和Mad2表达水平改变被引量：5
- 2010年
- 目的检测纺锤体检测点蛋白Bub1和Mad2在煤焦沥青致人支气管上皮细胞系(BEAS-2B)癌变细胞中的变化,探讨Bub1和Mad2在煤焦沥青接触者肺癌发生中的作用。方法利用中温煤焦沥青烟提取物作为诱导剂,建立永生化BEAS-2B的恶性转化模型,用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测Bub1和Mad2基因的mRNA表达水平;采用细胞爬片免疫组化半定量法检测蛋白表达改变。结果与正常对照组和二甲基亚砜(DMSO)组相比较,煤焦沥青烟提取物诱导转化细胞Bub1和Mad2基因mRNA和蛋白表达水平均减低,差异具有统计学意义(P<0.05)。正常对照组和DMSO组之间2种基因的mRNA和蛋白表达水平均没有明显改变,差异无统计学意义(P>0.05)。结论在煤焦沥青致支气管上皮细胞恶性转化后,纺锤体检测点蛋白Bub1和Mad2表达水平降低。
- 李智涛燕贞赵勇王丽霞祝寒松王威吴卫东吴逸明
- 关键词：煤焦沥青恶性转化BUB1MAD2
- 煤焦沥青致支气管上皮细胞BEAS-2B染色体不稳定性研究
- 目的探讨煤焦沥青的成分,了解煤焦沥青诱导体外培养的BEAS-2B细胞恶性改变时的染色体改变,并从DNA加合物水平和端粒/端粒酶改变探讨其可能机制。方法:煤焦沥青按1.5mg/ml加入二甲基亚砜(DMSO)充分溶解。取1μ...
- 李智涛吴拥军赵勇王丽霞祝寒松吴逸明
- 文献传递
- 端粒稳态失衡在多环芳烃复合物致肺癌中的作用
- 背景多环芳烃复合物(PAHs)已被世界卫生组织确定为明确的人类致癌物,炼焦过程中产生的焦炉逸散物(COE)主要有害成分为PAHs,目前我国炼焦企业众多,而且呈逐年增多趋势,焦炉工肺癌的防治工作将会更为紧迫,然而,PAHs...
- 祝寒松
- 文献传递
- 煤焦沥青烟提取物致人支气管上皮细胞BEAS-2B染色体不稳定性研究被引量：6
- 2011年
- 目的建立煤焦沥青烟提取物诱导的人支气管上皮细胞BEAS-2B株的恶化模型;观察不同时期细胞的染色体不稳定性与细胞恶性转化之间的关系。方法用四唑蓝(MTT)法测定煤焦沥青烟提取物的细胞毒性,以煤焦沥青烟提取物诱导并观察BEAS-2B细胞传代转化过程中的形态学改变;软琼脂克隆形成实验检测细胞恶性转化能力,流式细胞术检测细胞增殖周期变化,核型分析观察细胞染色体不稳定性。结果煤焦沥青烟提取物的半数致死浓度(LC50)为8.64 mg/L。以诱导剂量(2.0 mg/L)诱导细胞转化,经过30代传代培养,细胞形态发生恶性变化。第30代时,诱导组细胞即能在软琼脂上形成阳性克隆,细胞克隆形成率为21.50‰,明显高于正常对照组和溶剂对照组。流式细胞术检测诱导组G1期细胞比例明显减少,G2/M期细胞比例明显增加。煤焦沥青诱导组从第10代开始细胞二倍体核型的比例明显下降,非整倍体细胞的比例明显增加。随着传代次数增加,染色体不稳定性更明显。细胞克隆形成率和染色体变异的细胞百分比两者呈正相关。结论煤焦沥青烟提取物可以在体外诱导BEAS-2B细胞产生染色体不稳定性并发生恶化。
- 李智涛冯艳铭王威王丽霞赵勇祝寒松吴卫东吴逸明
- 关键词：细胞恶性转化染色体不稳定
