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罗罗
作品数:
1
被引量:2
H指数:1
供职机构:
中南大学湘雅医学院
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
文兰
中南大学湘雅医学院
邬国军
中南大学湘雅医学院
陈利玉
中南大学湘雅医学院
赵俊琴
中南大学湘雅医学院
敏华
中南大学湘雅医学院
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邬国军
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罗罗
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文兰
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医学临床研究
年份
1篇
2006
共
1
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人巨细胞病毒UL123基因全长及其外显子4的克隆与表达
被引量:2
2006年
【目的】克隆人巨细胞病毒(HCMV)UL123基因cDNA全长(iel)及其外显子4(iel-exon4),构建原核表达重组质粒,诱导立即早期蛋白1(IE1)及其C-端86-491氨基酸(IE1-C86-491)表达,并鉴定表达产物。【方法】分别用RT-PCR和PCR法将iel和iel-exon 4从感染了HCMV的人胚肺成纤维细胞(HEL)中扩增出来,再分别克隆入原核表达载体pTWIN1上intein2的N端,转化大肠杆菌,经PCR、限制性酶切和测序鉴定阳性重组子,在低温和低IPTG浓度下诱导重组子表达可溶性重组融合蛋白rIE1/intein2和rIE1-C86-491/intein2,用SDS-PAGE和Western Blotting对表达产物进行鉴定。【结果】经PCR、限制性酶切和测序鉴定重组质粒pTWIN1/iel和pTWIN1/iel-exon4构建成功,sDS-PAGE和Western Blotting分析表明融合蛋白在大肠杆菌中表达。【结论】成功克隆并表达了iel和iel-exon4。
文兰
陈利玉
邬国军
傅鹰
罗罗
敏华
赵俊琴
关键词:
基因表达
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