胡玉山 作品数:66 被引量:290 H指数:9 供职机构: 广州市疾病预防控制中心 更多>> 发文基金: 广州市医药卫生科技项目 广州市科技计划项目 广东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 轻工技术与工程 更多>>
非可培养状态下霍乱弧菌01群稻叶型的蛋白质谱特征分析 目的:利用双向电泳和质谱鉴定技术探讨正常培养和非可培养状态下霍乱弧菌蛋白表达的差异。方法:利用适当的裂解液处理霍乱弧菌,提取全菌蛋白;采用pH梯度等电聚焦对全菌蛋白进行双向电泳;考马斯亮蓝染色后获得的双向电泳图谱,并利用... 陈守义 胡玉山 李孝权 邓志爱 庞杏林文献传递 ICU中MRSA耐药基因检测及其PFGE分型 被引量:1 2009年 目的对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)菌株进行分子分型,探讨ICU中MRSA医院感染的特点和流行规律。方法采用表型筛选和PCR扩增mecA基因方法鉴定MRSA菌株,脉冲场凝胶电泳方法(PFGE)进行分子分型。结果12株金黄色葡萄球菌表型筛选为MRSA,MRSA产生A型、B型、C型和D型4种耐药表型,优势耐药模式是A型(75.0%),MRSA对苯唑西林、阿莫西林/克拉维酸和氨苄西林/舒巴坦等10种抗生素产生100%耐药性,11株MRSA携带mecA基因,携带率为91.7%,PFGE指纹图谱分两型,分别为R1型和R2型,11株MRSA为R1型(91.7%),R1型各株间相似度为100%。结论ICU可存在MRSA爆发流行,MRSA产生多重耐药性(MDR),MRSA携带mecA基因可表现为MDR,PFGE分型是理想的分子流行病学溯源手段。 庞杏林 李孝权 张颖 张欣强 胡玉山 邓志爱 陈守义 莫自耀关键词:耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 耐药基因 脉冲场凝胶电泳 广州市2014-2017年登革病毒Ⅰ型流行株E基因演化研究 被引量:9 2018年 目的对2014-2017年广州市登革热流行数据和登革病毒分离株E基因进行分析,寻找广州市登革热的流行规律并进行生物学溯源。方法通过传染病监测网络收集广州市登革热流行数据,对急性期登革热患者血清进行病毒分离培养并对分离到的DENV-Ⅰ型毒株进行E基因测序和系统发生树构建。结果 2014-2017年间,广州市登革热的流行季节均始于5-6月,并在9-10月达到流行的最高峰,从11月开始发病数开始出现断崖式下降,于12月终止;2014年的疫情规模最大,全年总计病例数达到37 340例;广州市登革病毒在演化上有2个主要的来源,分别属于Ⅰ型登革病毒的基因Ⅰ型和基因Ⅴ型。结论 2014-2017年广州市流行的登革病毒Ⅰ型存在2个不同分支,其中南亚来源的基因Ⅴ型分支是2014年大暴发的源头;而东南亚来源的基因Ⅰ型分支一直在本地循环流行,是历年散发流行的主要来源。 苏文哲 陈宗遒 蒋力云 李意兰 曹毅敏 刘文辉 胡玉山 杨智聪关键词:登革病毒 登革热 E基因 食源性病原菌分子分型及其寡核苷酸膜阵列检测技术的研究 背景:
食源性疾病是由于食用或饮用了被致病因素污染的食物或饮料引起的疾病。常见的致病因素有病原微生物、天然毒素、寄生虫和有毒有害化学物质等。虽然毒素、有毒有害化学物质等是食源性疾病的重要原因,但是病原菌才是引起食源... 胡玉山关键词:食源性感染 核酸杂交 食源性疾病 文献传递 重症监护病房医院感染铜绿假单胞菌耐药性及脉冲场凝胶电泳分型 被引量:10 2010年 目的了解ICU铜绿假单胞菌(Pa)感染的分子流行病学特征。方法对ICU临床分离的14株Pa菌株进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型及耐药性检测。结果14株Pa分6个PFGE型别,分别命名为A、B、C、D、E和F型,其中A型为优势流行菌株共8株(57.1%),B型2株(14.3%),其余型别各有1株(分别占7.1%)。Pa对头孢他啶等15种抗菌药物产生不同程度的耐药性,其中8株A型Pa为泛耐药菌株。结论PFGE分型A型Pa菌株具有同源性,是本次ICU发生Pa医院感染的流行株,PFGE分型技术可以准确和快速地用于Pa引起医院感染溯源分型。 庞杏林 陈守义 邓志爱 张欣强 李孝权 胡玉山关键词:铜绿假单胞菌 耐药性 超广谱Β内酰胺酶 脉冲场凝胶电泳 PCR-RFLP和PCR-SSCP技术在肠杆菌科食源性感染致病菌鉴定中的应用 被引量:3 2005年 目的探讨运用PCR-RFLP和PCR-SSCP技术建立肠杆菌科食源性感染常见致病菌快速鉴定方法的可行性。方法选取肠杆菌科食源性感染14种常见致病菌的23 S rRNA基因作为鉴别靶基因,采用通用引物PCR(UP-PCR)进行扩增,并对PCR产物的酶切片段进行限制性酶切片段长度多态性分析(RFLP)和单链构象多态性分析(SSCP)。结果针对23S rRNA基因片段的Hpa II酶切产物的RFLP分析表明,不同种属的致病菌表现出相似的RFLP图谱。SSCP分析显示,14种肠杆菌科常见致病菌SSCP图谱变异性很大,有利于进行细菌鉴定。结论运用PCR-SSCP技术可进行肠杆菌科食源性感染致病菌的快速鉴定。 胡玉山 王鸣 杜琳 莫自耀 洪帮兴 江丽芳关键词:RRNA 单链构象多态性分析 人源与猪源猪链球菌2型gdh基因序列比较 被引量:3 2010年 目的研究人源与猪源猪链球菌2型gdh基因序列同参考序列的差异,为猪链球菌2型的诊断方法研究提供基础依据。方法选取猪链球菌2型患者分离株和病猪分离株各1株,根据文献和基因库中的gdh基因序列设计PCR引物,进行PCR扩增;将扩增产物纯化回收,克隆至pMD 19-T载体后进行测序,获得gdh基因序列。结果2株猪链球菌2型菌株的PCR扩增产物经电泳后,均得到1 300 bp左右的目的条带,大小与预测一致;序列分析结果显示,人源猪链球菌2型gdh基因序列GC含量为45.73%,猪源猪链球菌2型gdh基因序列GC含量为45.88%,猪链球菌2型gdh参考序列GC含量为45.81%;人源与猪源猪链球菌2型gdh序列同参考序列相比,一致性均为99.9%;人源与猪源猪链球菌2型gdh序列仅相差2个碱基。结论人源与猪源的猪链球菌2型gdh基因序列高度保守。 胡玉山 刘俊华 庞杏林 林云万 邓志爱 陈守义关键词:猪链球菌2型 基因克隆 2009—2018年广州市即食食品中金黄色葡萄球菌污染情况和菌型特征 被引量:9 2021年 目的分析2009—2018年广州市零售即食食品中金黄色葡萄球菌污染情况,以及菌株肠毒素基因、耐药表型特征。方法从广州市辖11个区的农贸市场、超市随机购买零售即食食品,增菌后分离金黄色葡萄球菌。对所有菌株进行多位点序列分型(MLST)、抗生素敏感性试验,并检测24种肠毒素基因。对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)进行葡萄球菌染色体盒(SCCmec)分型。结果2009—2018年广州市采集的1399份即食食品中共分离出157株金黄色葡萄球菌(简称金葡菌)(检出率为11.22%),其中熟猪肉中金葡菌检出率(17.95%)相比非熟肉食品中金葡菌检出率(9.43%)差异有统计学意义(P<0.001);抗生素敏感性检测结果显示7株金葡菌为MRSA,检出率为0.5%;157株金葡菌对青霉素的耐药率高达83.43%,其次是四环素(55.41%)、红霉素(41.40%)、氯霉素(29.30%)、克林霉素(21.02%)、复方新诺明(20.40%)及庆大霉素(14.01%);对环丙沙星、苯唑西林及头孢西丁的耐药率均≤10.0%,对万古霉素、达托霉素、利奈唑胺均敏感。即食食品中优势克隆复合体(CC)为CC59(25.48%),其次为CC6(17.83%)、CC398(10.83%)。菌株特征分析结果发现对3种或3种以上抗菌药耐药的菌株占比,CC59和CC398大于CC6(P<0.001),而所有CC6菌株都携带seg,sei,sem,sen,seo及seu,远高于CC59(P<0.001)。结论广州市即食食品中的优势菌群是CC59、CC6和CC398,这3种优势克隆群在国内临床患者和食物中毒分离株中也很常见,需要公共卫生部门引起重视,加强对市售即食食品中金葡菌的监测。 周勇 吴新伟 胡玉山 伍业健 刘俊华 侯水平 张欣强 张健关键词:即食食品 金黄色葡萄球菌 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 肠毒素基因 多位点序列分型 问号钩端螺旋体LipL32-LipL41融合基因的克隆与原核表达 被引量:1 2016年 目的构建钩端螺旋体融合基因lip L32-lip L41重组表达质粒,并获得重组表达的融合蛋白。方法设计引物,聚合酶链反应(PCR)从各参考标准株中扩增Lip L32、Lip L41基因,连接引物PCR法构建Lip L32-Lip L41融合基因,连接到大肠杆菌表达载体p ET28a上,构建p ET28a-Lip L32-Lip L41重组质粒,并转化到大肠杆菌DE3菌株中进行诱导表达,聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS-PAGE)及Western blot鉴定融合蛋白的表达。结果扩增获得的Lip L32-Lip L41融合基因为1 900 bp,原核表达重组质粒p ET28a-Lip L32-Lip L41经酶切鉴定含有融合基因片段,在大肠杆菌中表达出Mr 90 000左右的重组融合蛋白Lip L32-Lip L41。结论成功构建钩体Lip L32-Lip L41融合基因,并在大肠杆菌中成果表达融合蛋白,为进一步评价Lip L32-Lip L41作为候选抗原诊断钩端螺旋体病的价值奠定基础。 胡玉山 肖丽红 刘巧谊 周勇 侯水平 张欣强 夏丹 杨智聪关键词:钩端螺旋体 融合基因 融合蛋白 非可培养状态下霍乱弧菌o1群稻叶型的蛋白质谱特征分析 目的利用双向电泳和质谱鉴定技术探讨正常培养和非可培养状态下霍乱弧菌蛋白表达的差异。方法利用适当的裂解液处理霍乱弧菌,提取全菌蛋白;采用pH梯度等电聚焦对全菌蛋白进行双向电泳;考马斯亮蓝染色后获得的双向电泳图谱,并利用Im... 陈守义 胡玉山 李孝权 邓志爱 庞杏林 王明关键词:霍乱弧菌 双向电泳 质谱技术 蛋白组学 文献传递