蔡汝健
- 作品数：28 被引量：65H指数：5
- 供职机构：广东省农业科学院动物卫生研究所更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金广州市科技计划项目广东省农科院院长基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 一种猪饲料中猪源蛋白的检测方法
- 本发明公开了一种猪饲料中猪源蛋白的检测方法。方法包括将猪源IgG的抗体包被在基材上，然后加入受检样品，之后加入用标记物标记的另一种不同动物源的抗猪源IgG的抗体，接着加入底物显色。本发明方法敏感性好、重复性好、检测限低、...
- 宋长绪蒋智勇蔡汝健朱丹
- 文献传递
- 猪圆环病毒Ⅱ型的分子生物学研究与套式PCR诊断方法的建立及推广应用
- 宋长绪王贵平高向阳林志雄蒋智勇刘燕玲朱道中黄忠苏良科蔡汝健孔德胜李春玲季芳陈建君王浩文
- 建立的检测PCV2的套式PCR方法在生产中已进行了规模化应用，共对287大中型猪场1560份样品进行了检测，其中检测病理材料103份，血清1427份，精液20份。检测的样品中阳性率为63%。其中阳性猪场达72%，检测样品...
- 关键词：
- 关键词：圆环病毒分子生物学
- 一种分离猪Ⅱ型圆环病毒的新方法
- 合成一对扩增猪Ⅱ型圆环病毒(PCV2)全基因组的特异性引物,从2份患断奶后仔猪多系统衰弱综合征(PMWS)的死亡仔猪病料中,PCR扩增和克隆了2株PCV2全基因组.将所测序列与已公布的PCV毒株序列进行同源性比较.结果显...
- 蒋智勇宋长绪黄忠刘燕玲张春红王浩文蔡汝健
- 关键词：全基因组PCR扩增基因序列
- 一种小分子DNA疫苗及其制备方法
- 本发明公开了一种小分子DNA疫苗及其制备方法，小分子DNA疫苗由转录启动子和目的基因构成线性DNA片断，目的基因包含其起始和终止密码子。与现有DNA疫苗相比，本发明的小分子DNA疫苗，可更快地诱导产生抗体，产生的细胞免疫...
- 宋长绪蔡汝健蒋智勇刘燕玲
- 猪渗出性皮炎被引量：14
- 2008年
- 猪渗出性皮炎是由猪葡萄球菌引起猪的出现全身油脂样渗出、形成皮痂并脱落,甚至导致脱水和死亡等临床症状的一种急性传染病。论文综述了近年来有关猪渗出性皮炎的病原学、流行病学和致病机理方面的研究结果,并就猪渗出性皮炎的诊断和防治进行了简要介绍。
- 蔡汝健郝永清宋长绪
- 关键词：猪葡萄球菌致病机理
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒RdRp基因的克隆与原核表达被引量：1
- 2009年
- 将猪繁殖与呼吸综合征病毒RNA依赖性的RNA聚合酶(RdRp)基因进行克隆、表达,并获得纯化重组蛋白,为进一步研究猪繁殖与呼吸综合征病毒RdRp的功能奠定基础。以RdRp基因cDNA为模板,用PCR扩增出RdRp基因片段,应用定向克隆策略将扩增后片段与高效表达载体pET32a(+)重组,阳性克隆重组质粒经酶切及测序鉴定,IPTG诱导高效表达。PCR法扩增出720 bp的片段,酶切及测序鉴定获得正确的重组质粒,在大肠埃希菌LB21中表达得到分子质量约为46 ku的融合蛋白。成功克隆及表达了猪繁殖与呼吸综合征病毒RdRp基因。
- 蔡汝健宋长绪郝永清杨鼎何锦玲
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒克隆原核表达
- 猪圆环病毒2型重组ORF2蛋白-ELISA诊断方法的建立及初步应用
- 根据猪圆环病毒2型(PCV2)GD株序列(AY613854),设计一对引物,并以包含PCV2全基因组的重组质粒pMD-ORF2为模板,扩增出含ORF2基因的3’端(576 bp),回收PCR产物,将其克隆入pET-32a...
- 蒋智勇宋长绪黄忠刘燕玲张春红王浩文蔡汝健
- 关键词：猪2型圆环病毒ORF2ELISA
- 文献传递
- 一种分离猪Ⅱ型圆环病毒的新方法
- 设计合成一对扩增猪Ⅱ型圆环病毒(PCV2)全基因组的特异性引物,从2份患断奶后仔猪多系统衰弱综合征(PMWS)的死亡仔猪病料中,PCR扩增和克隆了2株PCV2全基因组。将所测序列与已公布的PCV毒株序列进行同源性比较。结...
- 蒋智勇宋长绪黄忠刘燕玲张春红王浩文蔡汝健
- 关键词：克隆
- 文献传递
- 猪红斑丹毒丝菌GZ株的分离鉴定及序列分析被引量：4
- 2014年
- 2013年11月从广州某猪场发生急性败血症死亡的母猪心脏、肺脏、脾脏分离到1株病原菌，经形态学观察、培养特性、生化特性及16SrRNA、spaA基因测序，确定为猪红斑丹毒丝菌，命名为GZ株。结果表明，该菌株对阿莫西林、利福平、庆大霉素、头孢类抗生素高度敏感，对其他药物广泛耐药，对BALB／c小鼠的致死剂量为1．5×10^8cfu／mL。测序结果与NCBI收录的猪红斑丹毒丝菌进行Blast比对分析，16SrRNA基因与不同地区分离自人、蛋鸡、猪、白海雕、野猪、野兔、鼠等动物的同源性为95．9％～99．8％。spaA基因与NCBI收录的分离菌株核苷酸同源性为98．9％～99．9％，氨基酸同源性为99．5％，3处发生突变，其中，第36位缬氨酸突变为亮氨酸，第203位异亮氨酸突变为蛋氨酸，第257位亮氨酸突变为异亮氨酸；与1998年和2006年日本1a型Fujisawa株的核苷酸同源性最高，为99．8％，因此确定分离的GZ株为1a血清型。
- 张乐宜蔡汝健蒋智勇宋长绪
- 关键词：RRNA
- 猪葡萄球菌脱落毒素ExhC基因的克隆及原核表达被引量：2
- 2014年
- 为研究猪葡萄球菌表皮脱毒素Exh C基因的分子特征及其原核表达产物的免疫学活性,利用PCR技术从猪葡萄球菌广东增城分离株(GDZC株)扩增出表皮脱落毒素Exh C基因,测序与序列比较分析显示,其编码区全长为837bp,编码279个氨基酸,与国内外猪葡萄球菌和松鼠葡萄球菌表皮脱落毒素Exh C基因的核苷酸同源性、氨基酸同源性均为100%。将Exh C基因克隆于pET-28a(+)表达载体中,经测序正确后,重组质粒转入大肠埃希菌BL21(DE3)进行诱导表达,表达产物经SDS-PAGE鉴定和Western blot分析。表达的融合蛋白主要以包涵体形式存在,其分子质量大小约为32ku,与预期大小一致。Western blot分析表明,Exh C重组蛋白能与猪葡萄球菌GDZC株的阳性血清发生特异性反应,说明表达的GDZC株Exh C重组蛋白具有良好的免疫学活性。
- 张乐宜吴坚文蔡汝健李艳蒋智勇刘燕玲宋长绪
- 关键词：猪葡萄球菌C基因原核表达
