郭海涛 作品数:7 被引量:38 H指数:4 供职机构: 武汉大学生命科学学院病毒学研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 医药卫生 化学工程 更多>>
马尾松毛虫质型多角体病毒多角体蛋白基因的cDNA克隆及序列分析 被引量:15 2001年 通过对马尾松毛虫质型多角体病毒的增殖、纯化 ,获得一株单一类型的质型多角体病毒。提纯的病毒粒子经SDS-酚抽提 ,琼脂糖凝胶电泳分离基因组dsRNDA ,回收纯化第十片段S10。S10经DMSO变性 ,逆转录合成cDNA第一链 ,PCR扩增后 ,克隆在pGEM T载体上。对重组子进行限制性内切酶分析及序列测定 ,结果表明 ,克隆片段全长 76 3bp ,起始密码AUG位于 3~ 5残基 ,终止密码UGA位于 74 7~ 74 9残基。推测DpCPV多角体蛋白基因编码 2 4 8个氨基酸的多肽 ,分子量 2 8kD。和家蚕质型多角体病毒 (BmCPV)多角体蛋白基因相比较 ,核苷酸和编码氨基酸序列同源性分别为 89.3%和 97.6 %。 杜建宇 张珈敏 郭海涛 张晓东 胡远扬关键词:马尾松毛虫 质型多角体病毒 多角体蛋白基因 黑胸大蠊浓核病毒分类的相关研究 被引量:6 2003年 黑胸大蠊浓核病毒(pfDNV)是在我国首先发现并正式分类鉴定的蟑螂浓核病毒。该病毒属细小病毒科(Parvoviridae),浓核病毒亚科(Densovirinae)。但对该病毒的归属问题却一直没有确定,本文对此予以探讨。pfDNV的最新研究进展包括两个方面:全基因组核苷酸序列的测定,以及利用低温电镜技术和像重构方法对该病毒的三维重构(分辨率23)。在此基础上,本文将pfDNV与其它病毒在基因组结构和三维结构方面进行了全面的对比分析,其结果并不支持目前对pfDNV的分类,因此建议对该病毒重新进行分类。 李莉 郭海涛 张珈敏 胡远扬关键词:黑胸大蠊浓核病毒 基因组结构 蟑螂浓核病毒全核苷酸序列测定及基因组结构分析 该文构建了黑胸大蠊浓核病毒(PfDNV)基因组克隆载体以及系列缺失克隆,继而测定了PfDNV全基因组核苷酸序列.通过对其基因组结构分析,与其它细小病毒在基因组结构、核苷酸序列同源性、以及编码蛋白同源性的比较,证实这种病毒... 郭海涛关键词:蟑螂 浓核病毒 细小病毒 基因组结构 转染 文献传递 蟑螂病毒研究进展及产业化 作者对蟑螂病毒进行了包括形态结构,核酸性质,结构多肽,血清学,全基因组克隆载体构建等的全面研究,在此基础上研究出用生物技术消灭蟑螂的方法和制剂——病毒天蟑剂. 胡远扬 张珈敏 朱丽华 郭海涛 邬开朗 尹宜农关键词:基因组结构 组织病理 生物活性测定 文献传递 重组质粒转染蟑螂对黑胸大蠊浓核病毒的拯救 被引量:7 1999年 用Glassmilk法纯化PfDNVdsDNA,在其3′端和PstⅠ切开的pUC119质粒的3′端分别加dG和dC尾,连接、转化、筛选得到分子量为8.7kb的重组质粒。通过酶切证明插入DNA为PfDNV全基因组DNA。利用DEAEdextran转染技术,将此重组质粒导入黑胸大蠊幼虫体内,此重组质粒能使虫体发病死亡。电镜超薄切片观察发现虫体细胞内存在大量的病毒粒子。同样,在免疫扩散实验中虫体PBS浸出液能与抗PfDNV的抗体产生沉淀线。用重组质粒感染致死的虫体喂食健康黑胸大蠊,也能使其发病死亡,通过电镜可以观察到在细胞内增殖的病毒粒子。 张晓东 张珈敏 郭海涛 朱丽华 胡远扬关键词:浓核病毒 黑胸大蠊 重组质粒 病毒拯救 黑胸大蠊浓核病毒基因组末端序列测定与分析 被引量:1 1999年 利用构建的黑胸大蠊浓核病毒(PfDNV)全基因组重组质粒(PfDNV-pUC119)以及一系列完整缺失克隆,通过全自动测序方法完成了PfDNV两末端各728 bp 和730 bp 核苷酸序列的测定. 通过计算机软件分析发现,PfDNV 末端201nt为倒置重复序列,其中最末端122nt为回文序列,能形成典型的发夹结构. 并与同科其它病毒末端序列进行了核苷酸序列同源性比较. 郭海涛 张珈敏 朱丽华 张晓东 胡远扬关键词:浓核病毒 黑胸大蠊 蟑螂浓核病毒全核苷酸序列与基因组结构 被引量:10 2000年 测定了黑胸大蠊浓核病毒(PfDNV)复制型(RF) DNA的核苷酸序列,确定PfDNV基因组全长为5454个核苷酸,基因组两末端存在典型的发夹结构和倒置重复序外.PfDNV基因组正链有4个大的可读框(ORF),负链含3个大的可读框,并且可读框都集中在每条链的 5’端.两个可能的功能性启动子分别位于图距单位 3和 97处.基因组存在基因重叠现象和内含子区域.并对 Pf DNV基因组与同科其他细小病毒进行了同源性比较.推测 PfDNV基因组正链编码非结构蛋白,负链编码结构蛋白。 郭海涛 张珈敏 胡远扬关键词:黑胸大蠊浓核病毒 核苷酸序列 基因组结构 蟑螂