陈立国
- 作品数：11 被引量：13H指数：2
- 供职机构：四川大学华西医学中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学更多>>
- 微囊化转心房肽基因细胞分泌心房肽近日节律的体外研究(英文)被引量：1
- 2005年
- 目的:研究人心房肽(hANP)cDNA转染细胞的微囊化技术中心房肽分泌的近日节律;通过人工调控,改变心房肽分泌的近日节律,达到有效治疗高血压或心力衰竭的目的。方法:将人心房肽基因(cDNA)转染入中国仓鼠卵巢细胞(Chineseham-sterovary,CHO),然后将细胞包被在聚己内酯管内形成微囊,并检测转基因CHO细胞长时间存活情况和分泌的心房肽。检测微囊化转基因细胞分泌心房肽的生物节律,并用褪黑素进行调整。结果:在培养期间,长度20mm,直径2mm的聚己内酯管内转染CHO细胞在2mL培养基中24h分泌的心房肽水平可达210.3ng/L;心房肽的分泌呈近日节律性变化,日间高,而夜间低;近日节律变化的时相是4:15,用褪黑素处理,近日节律的时相移至7:55。结论:心房肽cDNA转染的CHO细胞包被在聚己内酯管内并能向管外分泌心房肽,将来可能适于植入人体。此项研究为心房肽治疗高血压或心力衰竭提供了一条新途径。
- 付泳航李若冰陈立国肖静郭慧玲郭丽王正荣万朝敏
- 关键词：时间生物学节律性
- 微囊化的人类心房肽cDNA质粒转染细胞对实验性高血压大鼠生理指标的影响被引量：1
- 2004年
- 目的:探讨微囊化人心房肽(hANP)基因转染细胞治疗高血压的新途径和新技术。方法:将重组有hANP基因(cDNA)的质粒转染入中国仓鼠卵巢(CHO)细胞,然后将细胞包被在具有免疫隔离作用的聚己内酯(PCL)微囊内形成微囊化转基因细胞。移植微囊化hANPcDNA质粒转染细胞至两肾一夹(2K1C)的高血压大鼠腹腔内,检测其对高血压大鼠的血压以及多项生理指标的影响;同时研究微囊化hANPcDNA质粒转染细胞移植前后,2K1C高血压大鼠肾脏排泄的近日节律规律。结果:移植微囊化hANPcDNA质粒转染细胞至2K1C高血压大鼠腹腔内2周后,大鼠的血压上升水平明显不如对照组高,此作用至少持续5个月。在2K1C高血压大鼠体内,植入的微囊化转hANPcDNA质粒细胞可产生明显的利钠、利尿作用,且引起肾血流、肾小球滤过率、尿cGMP水平较对照组明显升高。此外,2K1C高血压大鼠的肾脏分泌的时间生物学特征研究显示:与对照组相比,植入微囊化hANPcDNA质粒转染细胞后,其近日节律的调整中值加大,振幅增高。结论:hANPcDNA质粒转染的CHO细胞通过植入高血压大鼠体内,可以降低高血压大鼠血压,将来可能适于植入人体。此项研究结果提供了一条心房肽治疗高血压或心衰的基因治疗新途径。
- 陈立国肖静郭慧玲刘英辉万朝敏王正荣
- 关键词：聚己内酯心房肽时间生物学
- 微囊化转心房肽基因细胞治疗高血压的实验研究
- 目的:探讨人心房肽(hANP)基因转染细胞的微囊化方法以及微囊化转hANP基因细胞治疗高血压的新途径和新技术.结论:hANPcDNA质粒转染的CHO细胞能在PCL微囊内生存,并能产生和向囊外排出具有生物活性的hANP.植...
- 陈立国
- 关键词：心房肽聚己内酯时间生物学近日节律高血压
- 植入微囊化hANP cDNA转染细胞治疗大鼠高血压的观察
- 2005年
- 目的研究植入微囊化的人类心房肽(hANP)cDNA转染细胞对高血压大鼠的治疗效果,为临床应用基因工程细胞治疗高血压提供新方法。方法将转染有hANPcDNA的CHO细胞包被在具有免疫隔离作用的聚己内酯(PCL)管内形成微囊化基因转染细胞,其后移植至二肾一夹(2K1C)高血压大鼠腹腔内,检测微囊植入对高血压大鼠的血压及多项生理生化指标的影响,并用放射免疫分析法(RIA)检测血浆hANP水平,用免疫组化结合图像分析法半定量检测肾脏心房肽A型受体(NPRA)的表达。结果微囊化的hANPcDNA转染细胞移植10d后,血浆hANP水平显著升高;移植30d后高血压大鼠的血压明显降低,而尿量、尿钠排出量(USO)和尿cGMP明显增加;移植45d后肾小球滤过率(GFR)和肾血流量(RBF)明显增加,同时高血压大鼠肾脏NPRA的表达下调被抑制。结论植入的微囊化hANPcDNA转染细胞能产生和向囊外排出hANP,引起明显的利尿利钠和降血压效应;本研究结果为高血压的心房肽基因治疗提供了新途径。
- 刘荣韬陈立国幸浩洋尹华虎万朝敏王正荣
- 关键词：基因转染细胞心房肽高血压
- 核酶阻断per1表达对吗啡成瘾小鼠海马c-fos转录及表达的影响被引量：4
- 2005年
- 目的研究用特异性核酶阻断生物节律基因per1的表达对吗啡成瘾小鼠海马c-fos基因转录及表达的影响。方法制备吗啡成瘾小鼠模型,向小鼠脑室内注射脂质体包裹的重组质粒pcDNA3.1—per1RZDNA,在脑内产生特异性核酶-per1RZ,阻断小鼠脑内生物节律基因per1的表达。作脑组织冰冻切片,用原位杂交和免疫组化法测定小鼠海马c-fos基因转录及表达的变化。结果per1RZ能使吗啡成瘾小鼠海马的c-fos基因转录及表达明显减弱。结论重组质粒表达的per1RZ可以干扰生物节律基因per1的表达,抑制海马c-fos基因的转录和表达,从而控制吗啡成瘾的发生。
- 刘英辉彭涛陈立国肖静王正荣刘延友
- 关键词：基因控制核酶节律基因PER1成瘾
- 微囊化的ANP cDNA转染细胞降低高血压大鼠血压被引量：2
- 2003年
- 目的探讨微囊化的转基因细胞表达产生药物活性心房肽 (ANP)的治疗体系。方法将人ANP基因 (cDNA)转染入CHO细胞 ,然后将细胞包被在聚己内酯 (PCL)管内形成微囊化 ,并移植到盐敏感高血压鼠腹腔内检测其长时间CHO细胞存活情况和分泌的心房肽 (ANP)。结果微囊化的转基因细胞植入2d后 ,明显的延迟了高血压的发展 ,此作用至少持续 5个月。同时 ,增加了肾血流 ,肾小球滤过率 ,钠排泄 ,尿液分泌 ,提高了血浆ANP浓度。
- 陈立国屈艺彭文珍王跃锜肖静王正荣
- 关键词：高血压血压微囊化心房肽
- 心房肽cDNA转染细胞微囊化及心房肽近日节律性表达被引量：4
- 2003年
- 目的探讨心房肽 (ANP)cDNA转染细胞的微囊化技术 ,测定其ANP的表达水平 ,以及研究ANP分泌的近日节律 ;通过人工调控 ,改变ANP分泌的近日节律 ,达到有效治疗高血压或心衰的目的。方法将人ANP基因 (cDNA)转染入CHO细胞 ,然后将细胞包被在聚己内酯 (PCL)管内形成微囊 ,并检测转基因CHO细胞长时间存活情况和分泌的ANP。检测微囊化转基因细胞分泌ANP的生物节律 ,并用褪黑素(melatonin)进行调整。结果在培养期间 ,长度 2 0mm直径 3mm的PCL管内转染CHO细胞在 2ml培养基中分泌的ANP水平可达 2 4 6.1pg/ml/2 4h ;ANP的分泌呈近日节律性变化 ,夜间高 ,而日间低 ;近日节律变化的时相是 4∶1 8,用melatonin处理 ,近日节律的时相移至 7∶5 6。结论ANPcDNA转染的CHO细胞包被在PCL管内并能向管外分泌ANP ,将来可能适于植入人体。
- 陈立国屈艺肖静郭慧玲万朝敏王正荣
- 关键词：心房肽微囊化转染细胞时间生物学近日节律
- 重组人心房肽对高血压大鼠心肌肥大的抑制作用及其机制
- 2005年
- 目的观察重组人心房肽(rhANP)对高血压大鼠心肌肥大的治疗效果,并探讨其作用机制。方法建立两肾一夹(2K1C)高血压大鼠模型,通过在高血压大鼠腹腔植入微囊化人心房肽cDNA重组质粒转染细胞,形成稳定的体内心房肽给药系统。检测假手术正常血压对照组、高血压模型组r、hANP治疗组大鼠的尾动脉收缩压(SBP)、血浆rhANP水平、心肌血管紧张素II(AngII)含量、心肌重量指数(MWI)、左心室肥厚指数(LVWI)、心肌胶原含量和心肌纤维直径等指标。结果rhANP治疗组大鼠的血浆rhANP浓度为217.3±11.3ng.L-1,显著高于另两组;高血压组大鼠的SBP、心肌AngII含量、MWI、LVWI、心肌胶原含量和心肌纤维直径较对照组显著增加(P<0.01)。rhANP治疗45d后显著降低高血压大鼠SBP、MWI、LVWI、心肌胶原含量、心肌纤维直径和心肌AngII含量(P<0.01)。结论由微囊化rhANPcDNA质粒转染细胞产生和分泌的rhANP可抑制心肌细胞肥大及胶原增生,有效防治左室肥厚,此作用与rhANP降低高血压大鼠的血压和心肌AngII含量有关。此结果也为高血压的心房肽基因治疗提供了新途径。
- 刘荣韬幸浩洋陈立国肖静郭慧玲王正荣
- 关键词：高血压心肌肥大基因治疗
- 人激肽释放酶基因克隆及真核表达的实验研究被引量：2
- 2002年
- 为构建人激肽释放酶（human kallikrein,hk）基因真核表达细胞系,从人胎胰中用RT-PCR方法扩增了hk基因全序列及其前导肽序列,克隆到真核表达质粒pCDNA3.1中,得到含全长hk cDNA及其前导肽序列的真核表达质粒pCDNA3-hk,并用脂质体lipofectamine介导其转化到野生型CHO细胞株中,获得了能稳定表达hk蛋白的CHO细胞系CHO-hk。检测CHO细胞及其培养基中hk活性水平及培养基对兔血压的影响。结果表明,97％的hk分泌到细胞外,其中62％左右以活性形式存在,另38％以酶原形式存在。培养基浓缩液具有显著降血压作用。说明CHO-hk细胞系能分泌具完整生物活性的hk,为后续生产治疗高血压的基因工程药物打下了基础。
- 屈艺王正荣陈立国刘荣韬肖静尹华虎郭惠玲
- 关键词：真核表达高血压CHO细胞基因克隆
- 人心房肽cDNA转染细胞微囊化及表达ANP的研究
- 2004年
- 目的探讨人心房肽(hANP)cDNA转染细胞的微囊化技术，测定其ANP的表达水平，以及研究ANP分泌的近日节律；通过人工调控，改变ANP分泌的近日节律，达到有效治疗高血压或心衰的目的。方法将人ANP基因(cDNA)转染入CHO细胞，然后将细胞包被在聚己内酯(PCL)管内形成微囊，并检测转基因CHO细胞长时间存活情况和分泌的ANP。检测微囊化转基因细胞分泌ANP的生物节律，并用褪黑素(melatonin)进行调整。结果在培养期间，长度20mm直径3mm的PCL管内转染CHO细胞在2ml培养基中24小时分泌的ANP水平可达210．3ng／L；ANP的分泌呈近日节律性变化，日间高，而夜间低；近日节律变化的时相是4：15，用melatonin处理，近日节律的时相移至7：55。结论ANP cDNA转染的CHO细胞包被在PCL管内并能向管外分泌ANP．将来可能话于植人人体．此项研奔为心房肽治疗高血压或心衰提供了一条新途径。
- 付泳航李茹冰陈立国肖静郭慧玲郭丽王正荣
- 关键词：心钠素时间生物学节律性
