马丽丽
- 作品数：16 被引量：11H指数：2
- 供职机构：苏州大学更多>>
- 发文基金：江苏省高校自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学艺术更多>>
- 人lamda3干扰素(hIFN-λ3)基因克隆及表达被引量：1
- 2005年
- 目的构建表达hIFN-λ3基因的真核表达载体,并在COS-7细胞中表达具有抗病毒活性的rhIFN-λ3蛋白。方法用口腔滤泡炎病毒VSV刺激A549人肺腺癌细胞,抽提总RNA,经RT-PCR获得全长cDNA,与pcD-NA3.1/myc—his(-)A真核表达载体连接,构建重组体pcDNA3.1A-hIFN-λ3,并在COS-7细胞中进行表达,采用微量细胞病变抑制试验研究表达产物的抗病毒活性。结果经PCR和限制性酶切鉴定以及DNA测序确证重组入载体中的基因片段不仅方向正确,而且确为hIFN-λ3,与GeneBank报告序列完全一致,并成功地在COS-7细胞中瞬时表达了具有抗病毒活性的rhIFN-λ3蛋白。结论该研究成功地克隆出hIFN-λ3基因编码序列,并在COS-7细胞中获得瞬时表达,证明了rhIFN-λ3蛋白具有抗病毒活性,为今后干扰素的基因治疗奠定了基础。
- 马丽丽王建红盛伟华谢宇锋缪竞诚杨吉成
- 关键词：RT-PCR基因克隆COS-7细胞
- 人Epsilon干扰素(hIFN-ε)的基因克隆和表达
- 目的:构建表达hIFN-ε基因的真核表达载体,并在COS-7细胞中表达具有抗病毒活性的rhIFN-ε蛋白。方法:用TNFα刺激HeLa 人宫颈癌细胞,抽提总RNA,经PT-PCR 获得全长cDNA,与pcDNA3.1/m...
- 马丽丽盛伟华谢宇锋缪竞诚王金志庄文卓李丽娥杨吉成
- 关键词：克隆COS-7细胞
- 文献传递
- hOSM在COS-7细胞中表达及对人A375黑色素瘤细胞的生长抑制作用被引量：1
- 2006年
- 目的:克隆人抑瘤素(hOSM)基因并构建真核表达载体,在COS-7细胞中表达具有抑制人A375黑色素瘤细胞生长的基因重组蛋白。方法:用PMA刺激U937细胞,抽提总RNA,经RT-PCR获得cDNA,与pUCmT载体连接,经PCR获得全长hOSM基因,再与pcDNA3·1/myc-his(-)A真核表达载体连接,构建真核表达重组质粒pcDNA3·1A-hOSM,经PCR和限制性酶切及DNA测序鉴定后,在COS-7细胞中进行瞬时表达,采用RT-PCR鉴定hOSM基因的转录,MTT法检测表达产物抑制A375细胞生长的活性。结果:重组入载体中的基因片段不仅方向正确,而且所克隆的hOSM基因,与GeneBank报告序列完全一致,并成功地在COS-7细胞中瞬时表达了具有抑制A375细胞生长的rhOSM蛋白。结论:本研究成功地克隆出hOSM基因并在COS-7细胞中获得瞬时表达,证明了表达的基因重组蛋白具有抑制人A375黑色素瘤细胞生长的活性,为在真核细胞中进行稳定表达,深入研究rhOSM的生物学功能创造了条件。
- 叶建新盛伟华马丽丽谢宇峰缪竞诚杨吉成
- 关键词：抑瘤作用
- 人Epsilon干扰素(hIFN-ε)的基因克隆和表达
- 目的:构建表达hIFN-ε基因的真核表达载体,并在COS-7细胞中表达具有抗病毒活性的rhIFN-ε蛋白.方法:用TNFα刺激LeLa人宫颈癌细胞,抽提总RNA,经RT-PCR获得全长cDNA,与pcDNA3.1/myc...
- 马丽丽盛伟华谢宇锋缪竞诚王金志庄文卓李丽娥杨吉成
- 关键词：人干扰素基因克隆真核表达载体抗病毒活性
- 文献传递
- hIFN-λ1(hIL-29)基因及在COS-7细胞中瞬时表达和抗病毒效应被引量：3
- 2005年
- 目的:克隆hIFN-λ1基因,构建pcDNA3.1A-IFN-λ1表达质粒,并在真核细胞中获得表达,以进一步研究rhIFN-λ1的生物学特性。方法:采用RT-PCR法从病毒诱导的A549细胞mRNA中克隆hIFN-λ1基因,并重组于pcDNA3.1A真核表达载体上。结果:经双酶切和PCR鉴定及DNA序列分析,发现所克隆的基因与GenBank公布的序列一致,并在COS-7细胞中获得了有效瞬时表达。结论:成功克隆了hIFN-λ1基因,并成功地获得了瞬时表达,其rhIFN-λ1表达产物具有抗病毒活性。
- 王建红马丽丽谢宇锋盛伟华缪竞诚吴康陈雄艳杨吉成
- 关键词：基因克隆COS-7细胞
- hIFN-λ1(hIL-29)基因在COS-7细胞中瞬时表达和抗病毒效应
- 目的为了克隆hIFN-λ基因并使自主构建的pcDNA3.1A-IFN-λ表达质粒能在真核细胞中获得表达,以进一步研究rhIFN-λ的生物学特性。方法采用RT-PCR 法从病毒诱导的A549细胞mRNA中克隆hlFN.入l...
- 王建红马丽丽谢宇锋盛伟华缪竞诚吴康陈雄艳杨吉成
- 关键词：RT-PCR基因克隆COS-7细胞
- 文献传递
- 重组人IL-18在大肠杆菌中的表达及其抗肿瘤作用被引量：2
- 2006年
- 目的:获取rhIL-18原核表达产物并研究其活性。方法:用本室构建的含基因重组表达载体PBV220-IL-18的大肠杆菌DH5α,经42℃热诱导表达和包涵体提取纯化后获取rhIL-18蛋白;采用ELISA试剂盒检测rhIL-18刺激PBMC分泌IFN-γ的活性及MTT法检测其对NK细胞杀伤K562细胞自然杀伤活性;同时用荷瘤小鼠模型检测其体内抗瘤功能。结果:诱导含重组表达载体PBV220-IL-18的大肠杆菌DH5α后,蛋白电泳显示出一条相对分子量(Mr)为18 000的蛋白条带;10μgrhIL-18蛋白体外刺激PBMC后,其分泌IFN-γ的能力与对照组相比提高了8倍,细胞毒性提高3倍;同时rhIL-18蛋白能明显抑制肿瘤生长和延长荷瘤鼠生存期。结论:获得了有免疫调节功能和抗肿瘤活性的rhIL-18蛋白,为今后IL-18重组产物的研制和开展肿瘤的生物治疗提供了实验依据。
- 张海峰盛伟华缪竞诚谢宇锋李丽娥马丽丽庄文卓杨吉成
- 关键词：白介素18免疫调节功能抗肿瘤活性
- hIFN-λ<,1>(hIL-29)基因在COS-7细胞中瞬时表达和抗病毒效应
- 目的:为了克隆hIFN-λ<,1>基因并使自主构建的pcDNA3.1A-IFN- λ<,1>表达质粒能在真核细胞中获得表达,以进一步研究hIFN-λ<,1>的生物学特性.方法:采用RT-PCR法从病毒诱导的A549细胞m...
- 王建红马丽丽谢宇锋盛伟华缪竞诚吴康陈雄艳杨吉成
- 关键词：真核表达载体抗病毒活性
- 文献传递
- 现代服装结构主义艺术风格浅析
- 在日新月异和变化无常的服装设计中，结构主义艺术风格在现代服装设计中占有重要的地位与作用。本文选取现代服装风格中具有独特的结构主义艺术风格，对其各方面进行细致的分析，梳理其源起和发展状况、探寻结构主义艺术风格的特性以及产生...
- 马丽丽
- 关键词：服装设计结构主义艺术风格
- 文献传递
- 人Lamda3和Epsilon干扰素基因的克隆、表达及活性鉴定
- 本文通过RT-PCR获得这两个干扰素的全长cDNA，并重组到真核表达载体，转染真核细胞，在真核系统中进行重组表达并检测表达蛋白的生物学活性。
本文成功的获得了hIFN-λ3和hIFN-ε基因，并在真核细胞中得到...
- 马丽丽
- 关键词：真核表达抗病毒抗增殖MXA蛋白干扰素
- 文献传递
