马凯歌
- 作品数：18 被引量：28H指数：2
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- 脊索细胞对类软骨细胞增殖及基质合成代谢的影响
- 2012年
- 目的观察非接触共培养条件下脊索细胞对类软骨细胞增殖及生物学特性的影响。方法无菌条件下取4只4周龄13本大白兔胸腰段脊柱，获取髓核组织，酶消化法及不连续密度梯度法分离纯化的脊索细胞及类软骨细胞。取第2代类软骨细胞与脊索细胞按1：1的比例接种于共培养装置Transwell小室中，将单层培养的类软骨细胞设为对照组。培养1、3、7、10d后倒置相差显微镜下观察细胞生长状况，免疫荧光法鉴定细胞表型，细胞计数试剂盒（CCK-8）法测定细胞增殖，逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测Ⅱ型胶原、蛋白多糖的表达。结果成功分离纯化、获取脊索细胞及类软骨细胞。镜下观察见原代脊索细胞体积较大，呈圆形或椭圆形，直径10～15μm，胞质内含较多大小不等的囊泡；原代贴壁的类软骨细胞体积较脊索细胞小，呈短梭形，直径4～6μm。随着非接触共培养时间的延长，类软骨细胞增殖明显加快，以共培养7、10d明显（P〈0．05）；Ⅱ型胶原、蛋白多糖的表达量也逐渐增高。结论脊索细胞能促进髓核类软骨细胞的增殖，其可能在阻止椎间盘退变的发生中具有一定意义。
- 丁凡邵增务熊蠡茗马凯歌高飞
- 关键词：髓核
- 脊索细胞促进骨髓间充质干细胞增殖及定向诱导分化的研究被引量：1
- 2012年
- 目的分离兔髓核脊索细胞及骨髓间充质干细胞（MSCs），通过共培养观察脊索细胞对MSCs增殖能力及细胞表型的影响。方法4-6周龄新西兰兔4只，取胸腰段脊柱的髓核，用密度梯度离心法提取脊索细胞，同时取其股骨骨髓用Ficoll液分离得到MSCs，光镜观察脊索细胞和MSCs不同比例（1：2、1：1、2：1）共培养条件下细胞的生长，细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测细胞增殖。脊索细胞和MSCs共培养（1：1）后行甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原染色检测MSCs细胞表型的改变。对共培养后的MSCs进行相关基因表达的检测。结果光镜下观察原代脊索细胞呈圆形或椭圆形，胞体大，细胞增殖不明显。MSCs呈梭形贴壁生长，旋涡状排列。CCK-8检测发现脊索细胞／MSCs1：1组细胞增殖明显高于其余各组。甲苯胺蓝染色MSCs单独培养组呈阴性，共培养组呈阳性。Ⅱ型胶原染色MSCs单独培养组呈阴性，共培养组呈阳性。逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测发现共培养组蛋白聚糖及Ⅱ型胶原的表达分别为脊索细胞的2．00、1．55倍，而单独培养的MSCs则表达阴性。结论在共培养条件下脊索细胞可以促进MSCs增殖，且细胞比例为1：1时更为显著；同时可以诱导其产生Ⅱ型胶原及聚集蛋白聚糖，表现出类软骨细胞表型。
- 张彦男邵增务吴永超王佰川马凯歌杨述华
- 关键词：骨髓间充质干细胞髓核椎间盘共培养
- 显微镜微创手术治疗多节段腰椎间盘退变时"责任节段"的选择策略
- 目的：影像学成像技术近年来发展迅速,通过磁共振腰骶丛神经成像技术可以更为精准的判断腰椎多节段退变中主要的"责任节段",在此基础上行显微镜后路椎板间开窗减压髓核摘除术(microsurgery lumbar discect...
- 肖宝钧杨操吴永超洪攀崔巍马凯歌赵晓龙
- 关键词：显微镜微创
- 显微镜下颈前路椎间盘切除植骨融合术治疗脊髓型颈椎病的再认识
- 目的：脊髓型颈椎病是一种高发病率的脊柱外科疾病,颈前路椎间盘部分切除植骨融合术(anterior cervical discectomy with fusion,ACDF)是目前临床上最常用的手术方法之一。本研究对借助显...
- 肖宝钧杨操吴永超洪攀崔巍马凯歌赵晓龙
- 关键词：颈椎病椎间盘切除术植骨融合显微镜
- 非接触共培养脊索细胞诱导骨髓间充质干细胞向类软骨细胞分化的实验研究
- 目的：分离兔髓核脊索细胞(NC)及骨髓间充质干细胞(MSC)，通过非接触共培养探讨脊索细胞对MSC细胞表型的影响.方法：取4～6周龄新西兰兔8只，取胸腰段脊柱的髓核，用密度梯度离心提取脊索细胞，同时取其股骨骨髓用FICO...
- 邵增务张彦男吴永超王佰川马凯歌丁凡杨述华
- 关键词：骨髓间充质干细胞髓核共培养
- 自噬参与压力诱导兔髓核细胞退变的研究被引量：1
- 2013年
- 目的观察自噬是否参与压力诱导兔髓核细胞退变，探讨压力诱导髓核细胞退变机制。方法从3月龄兔胸腰段脊柱提取兔髓核细胞培养，取第2代兔髓核细胞，1Mpa压力环境下培养12、24、48h。细胞活力与细胞毒性检测观察压力对细胞生长的影响，透射电镜观察压力条件下细胞的微观结构。单丹磺酰尸胺（MDC）染色观察细胞内自噬性空泡结构及自噬率，实时荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCR）观察自噬相关基因在压力条件下的表达。结果压力导致细胞衰老及死亡，透射电镜见细胞内存在自噬体结构，MDC染色后行流式细胞学检测显示12、24、48h自噬率分别为（1．580±0．171）％、（7．930±0．252）％、（13．530±1．206）％，PER结果显示压力诱导自噬相关基因（LC3B、Beclin-1）表达量与正常条件下表达明显增多（P〈0．05），且随着压力培养时间延长，LC3B、Beclin-1表达量也明显增多（P〈0．05）。结论自噬参与压力诱导细胞退变的过程，为压力诱导椎间盘髓核细胞退变的防治提供新的途径。
- 马凯歌邵增务王佰川熊蠡茗吴强杨述华
- 关键词：椎间盘自噬髓核细胞
- 非接触共培养脊索细胞诱导骨髓间充质干细胞向类软骨细胞分化的实验研究被引量：2
- 2012年
- 目的:分离兔髓核脊索细胞(notochordal cells,NC)及骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC),通过非接触共培养探讨NC对MSC细胞表型的影响。方法:4～6周龄新西兰兔8只,取胸腰段脊柱的髓核,用密度梯度离心提取NC,同时取其股骨骨髓用FICOLL液分离MSC,将NC和MSC等比例(1∶1)通过transwell培养板进行非接触共培养作为实验组,单纯MSC细胞培养作为对照组,光镜下观察细胞的生长情况。对两组的MSC行免疫组化及RT-PCR、Western-blot检测MSC细胞表型的改变情况。结果:原代NC呈圆形或椭圆形,细胞体积大,细胞增殖不明显;MSC贴壁生长,呈三角形或梭形,漩涡状排列。甲苯胺蓝染色:对照组MSC细胞核淡染,胞体染色不明显,染色阴性;实验组MSC可见从第3天开始胞体及胞外基质出现紫红色,第5天染色更加明显。Ⅱ型胶原免疫组化对照组MSC淡染,细胞形态不清楚;实验组第3天出现MSC内出现棕黄色深染,随着时间推移细胞染色加深呈阳性表现。RT-PCR检测,经过5d非接触共培养后实验组蛋白聚糖的基因表达为对照组的2.35倍(P<0.05),Ⅱ型胶原的基因表达为对照组的1.61倍(P<0.05),对照组Ⅰ型胶原的基因表达为实验组的2.56倍(P<0.05)。Western-blot检测后发现:经过5d非接触共培养,实验组蛋白聚糖的含量为对照组的1.61倍(P<0.05),Ⅱ型胶原的表达为对照组的10.04倍(P<0.05)(P<0.05)。结论:在非接触共培养条件下脊索细胞可以诱导骨髓间充质干细胞表型发生变化,向类软骨细胞方向分化,这将为组织工程化髓核的种子细胞筛选提供新选择。
- 张彦男邵增务吴永超王佰川马凯歌丁凡杨述华
- 关键词：骨髓间充质干细胞髓核共培养
- 脊柱转移性肿瘤的术前评价与手术方式选择
- 刘建湘邵增务吴强王佰川蒲飞飞马凯歌杨昊飞杨述华
- 自噬参与压力诱导的髓核细胞损伤及其机制研究
- 本文分三个部分进行探讨： 第一部分：自噬参与压力诱导的大鼠髓核细胞损伤的实验研究 目的：观察自噬是否参与压力诱导的大鼠髓核细胞损伤，探讨压力诱导的髓核细胞损伤、死亡的机制。 方法：从3月龄大鼠胸腰段椎间盘内提取髓核...
- 马凯歌
- 关键词：髓核细胞
- 脊索细胞促进骨髓间充质干细胞增值及定向诱导分化的研究
- 目的分离兔髓核脊索细胞及骨髓间充质干细胞，通过共培养观察脊索细胞对骨髓间充质干细胞增值能力及细胞表型的影响。方法 4-6周龄新西兰兔4只，取胸腰段脊柱的髓核，用密度梯度离心法提取脊索细胞，同时取其股骨骨髓用FICOLL液...
- 邵增务张彦男吴永超王佰川马凯歌杨述华
- 关键词：骨髓间充质干细胞髓核椎间盘共培养
