马远征
- 作品数：5 被引量：15H指数：2
- 供职机构：中国农业大学食品科学与营养工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学轻工技术与工程更多>>
- 番茄果实高质量总RNA的提取富集及RT-PCR检测被引量：7
- 2011年
- 以番茄果实为材料,比较了3种在果实中提取RNA的方法,针对番茄果实多糖的特点,利用无水乙醇和异丙醇联合沉淀的方法除去多糖,改良了Trizol法。为了检验含量比较低的miRNA,利用Licl沉淀的方法进行富集。结果表明:改良Trizol法能够有效地去除多糖,提取到的RNA 28S rRNA亮度约为18S rRNA的2倍,A260与A280比值为1.84,A260与A230比值为1.92,RNA产率为350.4μg/g,说明利用改良Trizol法从番茄果实中提取的RNA质量好、完整性好。由此法所得的RNA可直接用于cDNA文库构建等分子生物学实验。
- 迟丽红马远征刘海平田慧琴罗云波朱本忠
- 关键词：番茄MIRNA
- ABA处理不同成熟时期番茄果实中ACS和ACO家族基因的表达
- 2009年
- 番茄果实的成熟是由多基因精细调控的一个过程。其中作为重要的植物激素,乙烯和ABA又与成熟过程密切相关。在乙烯合成途径中,ACS和ACO两个基因家族起着非常重要的作用。而ABA与乙烯在植物成熟衰老过程中的相互作用也开始成为研究热点。采用真空渗透技术对不同时期的番茄果实(未熟、绿熟、破色)进行ABA渗透处理。然后根据处理4h(4hpi)和24h(24hpi)后的果实乙烯生成情况,确定处理后4h为基因表达测定时间。最后利用实时定量PCR技术,对3个不同成熟时期番茄果实中的ACS(LeACS1A,LeACS2,LeACS4和LeACS6)和ACO(LeACO1,LeACO3,LeACO4和LeACO6)进行基因表达测定。
- 王晓光李玲王晓辉马远征朱本忠
- 关键词：ACSACO乙烯
- 破色期番茄果实均一化cDNA沉默文库的构建和功能基因筛选模型的初步建立被引量：7
- 2009年
- 番茄果实的成熟是由多基因精细调控的一个过程.利用破色期番茄果实,根据复性动力学原理在mRNA水平进行均一化操作使高丰度和低丰度的mRNA丰度接近.然后把均一化之后mRNA反转录得到cDNA,再与基因沉默载体pTRV重组,最后把构建好的载体通过电转化的方法转入到GV3101农杆菌中,从而建立起破色期番茄果实均一化cDNA沉默文库.通过番茄果实中病毒诱导基因沉默技术,对cDNA沉默文库进行初步筛选,从而确定功能基因筛选模型.在模型建立阶段,以番茄红素合成途径相关的PDS基因作为内标基因,在100个混合农杆菌样中,成功筛选到了PDS基因.
- 王晓光马远征王晓辉李玲罗云波朱本忠
- 关键词：CDNA文库功能基因VIGS
- 番茄中microRNAs研究进展被引量：1
- 2011年
- MicroRNAs(miRNAs)是一类特殊的、具有沉默作用的小分子RNA,它能够调控真核生物的基因表达.在植物中,miRNAs通过与靶mRNA互补配对﹑引起靶mRNA的降解或翻译阻遏的方式来起调控作用.作为一种研究果实成熟衰老的模式植物,近年来,番茄miRNAs的研究取得了很大进展.在番茄中,miRNAs几乎参与了所有的生物过程的调控:细胞发育、细胞分化、各种生物和非生物胁迫等.特别重要的是,许多miRNAs被证实参与番茄果实的成熟衰老的调控过程.研究表明,miRNAs还与宿主与病毒的相互作用有关,这使miRNAs在番茄中作为一种病毒侵染症状的生物指标提供了可能.本文系统地综述了番茄中miRNAs的研究现状并对其未来的研究方向进行了展望.
- 左进华王云香刘海萍马远征鞠正翟百强傅达奇朱毅罗云波朱本忠
- 关键词：番茄MICRORNAS研究方法
- 番茄果实中一种快速验证microRNAs的方法
- 2011年
- 以番茄果实为材料,采用颈环引物的方法对番茄果实中的miRNA159和miRNA168进行反转录,并对得到的目的片段进行扩增,通过琼脂糖凝胶电泳观察得到相应大小的目的片段。对miRNA159所得大小正确的片段进行测序,验证所得片段为正确的目的片段。这种低成本的miRNA检测方法简单、实用,适用于生物信息预测及深度测序得到的低拷贝的新miRNA的快速验证。
- 马远征刘海平左进华傅达奇迟丽红朱本忠王云香罗云波
- 关键词：MIRNA
