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龚璞: 作品数：25 被引量：108H指数：4; 供职机构：浙江省疾病预防控制中心更多>>; 发文基金：浙江省医药卫生科学研究基金浙江省重大科技专项基金更多>>; 相关领域：医药卫生农业科学生物学政治法律更多>>

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创伤弧菌脉冲场凝胶电泳分子分型方法的验证与应用: ：建立与验证创伤弧菌脉冲场凝胶电泳(Pulsed-field gelelectrophoresis,PFGE)分子分型方法. 方法：以分子分型监测网络PulseNet中霍乱弧菌的PFGE标准方法为基础,选用限制性内...; 潘军航陈建才张俊彦龚璞占利梅玲玲; 关键词：创伤弧菌脉冲场凝胶电泳分子分型

香港海鸥型菌TaqMan-MGB探针实时荧光PCR检测技术研究: 目的利用TaqMan-MGB探针的实时荧光定量PCR方法,建立一种简便、快速,特异,灵敏的香港海鸥型菌检测方法.方法根据香港海鸥型菌16S rDNA的保守区域设计特异性引物和探针.用不同浓度、不同温度对反应体系引物量...; 梅玲玲张俊彦龚璞潘军航占利张云怡杨勇; 关键词：TAQMAN-MGB探针实时荧光PCR

两种方法同步检测禽样品沙门菌结果分析被引量：2: 2011年; 目的:应用LAMP(Loop-Mediated Isothermal Amplification)快诊技术及国标(GB)传统分离方法对杭州市不同来源75份新鲜禽(鸡)样品进行沙门菌检测,并对结果进行分析。方法:在应用GB法对禽样品进行传统分离、生化及血清学鉴定的同时,利用LAMP快诊技术同步检测沙门菌属invA基因及O9群抗原因子基因,并对两种方法检出率及效率进行比较。结果:GB法检出3份阳性,阳性率4.00%;LAMP快诊检测阳性结果因不同增菌液其检测结果不同,检测阳性率最高达17.33%。结论:禽样品可能受沙门菌污染量较低,以致GB法检出率相对较低,但LAMP技术的检测敏感性明显偏高,两种方法同步应用能全面、合理、科学地反映食品中目标菌的污染程度,建议基层实验人员尝试使用。; 朱水荣潘军航朱敏张俊彦龚璞梅玲玲; 关键词：环介导等温扩增技术沙门菌

Taq Man-MGB探针实时荧光PCR快速检测副溶血性弧菌的方法研究被引量：3: 2013年; 副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)为广泛分布于沿海地区的革兰氏阴性嗜盐菌,属弧菌科(Vibrio)弧菌属,是食源性疾病的重要致病菌之一.尤其在夏秋季节,经常由于食用带有大量副溶血性弧菌的海产品或被此菌污染的食品,引起暴发性食物中毒[1],在细菌性食物中毒中比例高、危害大.患者可出现腹泻、肠痉挛、恶心、呕吐和发烧等典型胃肠炎反应.因此在饮用水、食品检测和食物中毒源调查、传染病源调查工作中,常需要对副溶血性弧菌进行检测.传统的检测法需要增菌培养、分纯、镜检和生化试验等步骤;该法的阳性检出周期至少要72 h,操作烦琐,且容易出现假阴性[2].因为在营养不足或应激的情况下,副溶血性弧菌很容易进入不可培养状态.本试验旨在建立一套利用Taq Man-MGB探针实时荧光PCR快速检测副溶血性弧菌的方法,为临床和环境检测副溶血性弧菌提供方法,现将结果报道如下.; 龚璞梅玲玲; 关键词：副溶血性弧菌实时荧光 MAN

检测沙门氏菌的实时荧光PCR试剂盒及检测方法: 本发明提供了一种检测沙门氏菌(Salmonella)的实时荧光PCR试剂盒及其检测方法。所述试剂盒主要包括特异性引物和荧光探针、PCR缓冲液、脱氧三磷酸核苷混合物和DNA聚合酶，所述特异性引物和荧光探针序列如下：上游引物...; 程苏云梅玲玲朱敏龚璞; 文献传递

一种香港海鸥型菌的实时荧光PCR检测试剂盒及应用: 本发明公开了一种香港海鸥型菌的实时荧光PCR检测试剂盒及应用，所述试剂盒包括PCR扩增反应液、阳性对照和阴性对照，所述PCR扩增反应液包括特异性上游引物、特异性下游引物、荧光探针、PCR缓冲液、脱氧三磷酸核苷混合物和DN...; 梅玲玲张俊彦占利朱敏潘雪霞潘军航龚璞汪炜杨勇; 文献传递

环介导恒温核酸扩增技术快速检测志贺菌研究被引量：4: 2011年; 目的:建立一种快速检测志贺菌的环介导恒温核酸扩增(LAMP)技术,为志贺菌食源性疾病监测、诊断提供技术支撑。方法:在对志贺菌基因序列进行分析、对比基础上,根据志贺菌ipaH基因序列保守区域设计6条特异性引物;通过对LAMP技术反应条件优化,实现对志贺菌的快速检测;用不同来源志贺菌及沙门菌、大肠杆菌、副溶血性弧菌、柠檬酸杆菌、金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌等菌株验证方法的敏感性和特异性。结果:当25μl反应体系中含1.6μmol/L内引物(FIP、BIP)、0.2μmol/L外引物(F3、B3)、0.2μmol/L环引物(LF、LB)、1 mmol/L dNTP、6 mmol/L Mg-SO4,0.8 mol/L甜菜碱、1×反应缓冲液、DNA模版,8 U Bst DNA聚合酶,扩增条件为60℃,60 min时,LAMP技术对志贺菌最低检测浓度为200 CFU/ml,经8 h增菌,最低检测浓度可达到20 CFU/ml。对32株不同来源的志贺菌检测结果,所有反应管内肉眼观察有混浊,为阳性,而13种139株其它非志贺菌株反应结果均呈透明为阴性。对50件食品检测结果与常规培养方法及实时荧光PCR方法相比无显著性差异(P>0.05,χ2=0.27)。结论:本研究建立的志贺菌LAMP检测方法具有特异性强、灵敏度高、方便快捷、成本低等特点,适合在基层、小型实验室以及无条件购买荧光定量PCR仪的病原微生物检验检测机构推广使用。; 梅玲玲朱敏占利龚璞张俊彦; 关键词：志贺菌 IPAH基因

一种职业卫生监管方法及系统: 本发明公开了一种职业卫生监管方法及系统。其中，该方法包括接收用人单位输入的用人单位档案，生成所述用人单位的唯一标识；生成所述用人单位的职业病危害因素检测方案；生成所述用人单位的职业病危害因素检测报告；生成所述用人单位的职...; 周振张美辨曹艺耀高向景任鸿邹华楼晓明龚璞张念华张远志

浙江省209株沙门菌PFGE指纹图谱研究被引量：13: 2009年; 目的：建立浙江省沙门菌PFGE指纹图谱资料库,为查明沙门菌食源性疾病污染源,确定各病例之间的病原学关系,及时处理大范围内呈散发特征的沙门菌事件提供科学依据。方法：收集、提取全省历年来在各类食品和腹泻病人中分离的209株沙门菌的DNA,用限制性内切酶Xbal切割,脉冲场凝胶电泳（PFGE）技术建立PFGE指纹图谱,用BioNu-merics V5.1软件UPGMA方法进行聚类分析。结果：209株沙门菌分成10个基因型别160种PFGE基因指纹图谱。其中67株德尔卑沙门菌可分为6个型别35种PFGE指纹图谱,主要集中在1个PFGE指纹图谱型别中。14株肠炎沙门菌分属3个型别8种PFGE指纹图谱,相似系数在0.800-1.000之间。鼠伤寒沙门菌间的PFGE指纹图谱差异较大。结论：PFGE指纹图谱与血清学型别无相关性,该方法在研究沙门菌分子流行病学、确定各病例之间的病原学关系效果良好。; 梅玲玲罗芸叶菊莲朱敏张俊彦潘军航龚璞杨婷婷; 关键词：沙门菌脉冲凝胶电泳

一株死亡患者分离的致死创伤弧菌菌株的耐药表型与分子特征被引量：1: 2016年; 目的对培养分离的创伤弧菌菌株(2014-DJH)进行耐药表型与分子特征分析。方法采用全自动微生物鉴定及药敏分析系统进行生化鉴定和耐药分析;采用PCR方法检测vvh A基因和pil F基因,及vcg和16S rRNA基因分型;应用多位点序列分析进行分子分型。结果分离菌株2014-DJH经生化鉴定为革兰阴性的生物1型创伤弧菌;对大多数常用抗生素都敏感,对妥布霉素中度敏感;PCR检测vvh A和pil F阳性,为vcg C-16S rRNA B(CB)基因型;菌株的多位点序列型为glp 5、gyr B 3、mdh 32、met G 68、pur M 21、dtd S 39、lys A 115、pnt A 4、pyr C 42、tna A 75。结论菌株2014-DJH为新ST型菌株,命名为ST 289,注册号为id-389。基因分型结果表明该菌具有较强的致病能力,加强创伤弧菌感染的监测与预警具有重要的意义。; 潘军航沈伟伟张严峻占利龚璞梅玲玲; 关键词：创伤弧菌基因分型分子特征

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