龚菂
- 作品数：11 被引量：69H指数：4
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划湖北省自然科学基金更多>>
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- HepG2细胞胰岛素抵抗模型建立及盐酸小檗碱改善胰岛素抵抗的实验研究被引量：15
- 2016年
- 目的建立HepG2(人肝胚胎瘤细胞)胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)细胞模型,并在该模型上研究小檗碱改善IR的效应。方法用25 mmol·L^(-1)高糖,并分别用10^(-9)、10^(-8)、10^(-7)、10^(-6)、10^(-5)、10^(-4)mol·L^(-1)胰岛素处理,诱导HepG2细胞产生IR;对2-NBDG(荧光素标记葡萄糖)与Hep G2细胞孵育浓度设定为:50、100、200、400、600、800μmol·L^(-1)、孵育时间设定为:20、40、60、80、100 min,拟筛选最佳胰岛素处理浓度、2-NBDG与HepG2最佳孵育浓度和最佳孵育时间,通过检测细胞培养液中葡萄糖的消耗量及细胞对葡萄糖的摄取量作为判定模型成功的标志;用二甲双胍、盐酸小檗碱干预模型细胞,研究盐酸小檗碱在细胞水平上改善IR的效应。结果 6种浓度的胰岛素均可不同程度诱导HepG2产生IR,虽然10^(-5)、10^(-4)mol·L^(-1)剂量最明显,但细胞死亡较多,以10-6mol·L^(-1)剂量制模有效且细胞成活率高,与正常组比较差异具有统计学意义;当2-NBDG与HepG2细胞孵育浓度大于100μmol·L^(-1)时,细胞荧光强度与正常组差异有显著性,孵育时间超过20 min荧光强度与正常组比较有明显差异,超过100 min,细胞内荧光有明显淬灭衰减现象;盐酸小檗碱、二甲双胍能明显增加细胞培养上清液中葡萄糖的消耗及细胞对葡萄糖的摄取,与模型组比较差异具有统计学意义。结论用HepG2制作IR细胞模型时,选择10^(-6)mol·L^(-1)剂量的胰岛素;2-NBDG孵育浓度选择为200μmol·L^(-1)、2-NBDG孵育时间选择为80min较为适宜,盐酸小檗碱及二甲双胍对HepG2细胞IR具有明显的改善作用。
- 龚菂李芬邹欣王定坤陆付耳王开富
- 关键词：盐酸小檗碱HEPG2细胞胰岛素抵抗细胞模型葡萄糖摄取
- 热毒宁注射液的解热抗炎作用及其机制被引量：32
- 2013年
- 目的:探讨热毒宁注射液抗炎、清热解毒的作用及其机制。方法:分别以二甲苯致小鼠耳肿、角叉菜胶致大鼠足趾肿胀、冰醋酸致小鼠毛细血管通透性增加等炎症模型;以内毒素感染家兔致内毒素性发热模型,观测小鼠耳肿胀及大鼠足趾关节肿胀度,检测白介素-1(IL-1)、白介素(IL-6)、内皮素(ET-1)、前列腺素E2(PGE2)等炎症介质。结果:热毒宁注射液10.15 g·kg-1、5.08 g·kg-1剂量组对角叉菜胶致大鼠足趾肿胀均有抑制作用,1 h开始显效,持续至4 h;2.54 g·kg-1剂量组在2 h方显效,抑制作用可持续至4 h;10.15 g·kg-1剂量组对二甲苯致小鼠耳肿胀有明显的抑制作用,并能降低小鼠毛细血管通透性;注射内毒素2 h,模型组家兔肛温值居高不下,但热毒宁2.54 g·kg-1、5.08 g·kg-1两剂量组具有明显清热、降体温的作用,对家兔血清IL-1、IL-6、ET-1、PGE2;大鼠血清IL-1、IL-6等炎症介质均有不同程度的抑制作用。结论:热毒宁注射液对内毒素引起的家兔发热具有解热降温作用;对角叉菜胶致大鼠炎症有明显抑制作用、能显著降低大鼠IL-1、IL-6水平;并能抑制二甲苯致小鼠耳肿胀,提示热毒宁注射液具有较强的抗炎解热作用,其机制可能与抑制IL-1、ET-1、IL-6、PGE2等炎症介质有关。
- 王开富萧伟王振中徐丽君毕宇安孙兰邹欣龚菂黄光英
- 关键词：热毒宁注射液解热抗炎炎性介质
- 玄芷镇痛片对急性血瘀模型大鼠血液流变学及脑血流量的影响被引量：1
- 2011年
- 目的探讨玄芷镇痛片对急性血瘀模型(血管性头痛)大鼠血液流变学及脑血流量的影响。方法采用大鼠皮下注射肾上腺素的方法制作急性血瘀模型,通过检测大鼠血液流变学、脑血流量、脑组织含水量、脑重量等指标,系统观察玄芷镇痛片对血管性头痛的治疗作用并探讨其作用机制。结果经玄芷镇痛片治疗后,大鼠脑血流量得到明显改善,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.01);大鼠血液粘度明显下降,特别是全血低切还原粘度、红细胞聚集指数显著下降,且该效应呈剂量依赖性;脑组织含水量明显减少,从而有效地改善脑微循环。结论玄芷镇痛片能明显促进脑部血流、改善脑微循环;通过降低血液粘度和红细胞聚集而发挥其镇痛作用。
- 王开富徐丽君邹欣龚菂黄光英
- 关键词：血管性头痛血液流变学脑血流量
- 玄芷镇痛片对硝酸甘油致偏头痛大鼠血液流变学、脑血流量的影响
- 2011年
- 目的:通过观察玄芷镇痛片对硝酸甘油致偏头痛大鼠血液流变学、脑血流量的影响,以探讨其治疗偏头痛的作用机理。方法:大鼠皮下注射硝酸甘油造偏头痛模型,玄芷镇痛片高、中、低剂量进行干预,正天丸为阳性对照药物,用多谱勒激光探头(407)测试大鼠头部脑血流量;用SA5600自动血流变仪测定各项血液变学指标。结果:玄芷镇痛片能明显改善偏头痛大鼠的脑血流量,其治疗效果优于阳性对照组(P<0.05);玄芷镇痛片高、中、低剂量组均降低模型大鼠血液粘度和红细胞聚集指数,高剂量组效果更明显,且优于阳性对照组(P<0.05)。结论:玄芷镇痛片能有效改善偏头痛大鼠的脑血流量和异常血液流变学指标是其治疗偏头痛的作用机理之一。
- 徐丽君王开富邹欣龚菂黄光英
- 关键词：偏头痛脑血流量
- 盐酸小檗碱改善胰岛素抵抗与α7烟碱型乙酰胆碱受体相关性研究被引量：1
- 2015年
- 目的观察盐酸小檗碱对α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAChR)的影响,进一步探讨盐酸小檗碱通过抗炎通路改善胰岛素抵抗的分子机制。方法以3T3-L1脂肪细胞为研究对象,采用高糖加胰岛素诱导的方法建立胰岛素抵抗的细胞模型,分别给予广谱nAChR激动剂尼古丁(烟碱)、特异性α7nAChR激动剂氯化胆碱、炎症激活物内毒素(LPS)和抗炎中药盐酸小檗碱及抗炎西药阿斯匹林处理,并设立相应的空白对照组,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测成熟脂肪细胞中α7nAChR mRNA的表达,用放射免疫方法检测细胞上清液中炎性细胞因子TNF-α、IL-1、IL-6的水平,并用免疫组织化学的方法检测α7nAChR的蛋白表达。结果经烟碱和氯化胆碱干预成熟脂肪细胞后,细胞中α7nAChR mRNA表达水平与LPS、模型组比较均明显增加(均P<0.05),纯中药盐酸小檗碱干预后成熟脂肪细胞中α7nAChR mRNA表达也明显增加,与LPS、模型组比较差异具有统计学意义(P<0.05);西药阿斯匹林也促进细胞中α7nAChR mRNA的表达;上述4组α7nAChR蛋白表达呈不同程度的增加,TNF-α、IL-1、IL-6等炎性细胞因子受到明显的抑制,与LPS、模型组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论两种激动剂、抗炎西药阿司匹林和抗炎中药盐酸小檗碱均能上调α7nAChR mRNA和蛋白的表达,明显抑制炎性细胞因子分泌;盐酸小檗碱可能通过抗炎机制改善胰岛素抵抗。
- 邹欣王定坤李芬龚菂陆付耳王开富
- 关键词：盐酸小檗碱烟碱Α7烟碱型乙酰胆碱受体胰岛素抵抗胆碱能抗炎通路
- 玄芷镇痛片镇痛作用与急性毒理学研究被引量：1
- 2012年
- 目的评价玄芷镇痛片的镇痛效果和急性毒性。方法采用小鼠扭体实验和热板实验测定玄芷镇痛片镇痛效果;采用最大耐受量测定法确定玄芷镇痛片口服给药的最大耐受量。结果玄芷镇痛片各剂量组对小鼠醋酸所致的疼痛有显著镇痛作用,并呈量效关系;玄芷镇痛片各剂量组对小鼠物理致痛镇痛效果显著,与阿司匹林组比较,起效时间相同,但作用更持久;玄芷镇痛片口服给药的最大耐受量为259.2 g.kg-1。结论玄芷镇痛片有较强的镇痛作用,镇痛持续时间长于阿司匹林,且安全。
- 徐丽君王开富邹欣龚菂黄光英
- 关键词：镇痛
- 补肾通脉方对伴胰岛素抵抗的多囊卵巢综合征大鼠IRS-1表达的影响被引量：5
- 2010年
- 目的观察补肾通脉方对伴胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syn-drome,PCOS)大鼠胰岛素靶器官中胰岛素受体底物-1(insulin receptor substrate-1,IRS-1)表达的影响,探讨补肾通脉方改善伴IR的PCOS的机制。方法23日龄雌性SD大鼠皮下注射硫酸普拉睾酮钠9 mg/(100 g.d)共20 d,联合高脂饮食喂养80 d建立IR的PCOS大鼠模型。成模大鼠随机分为模型组(27只)和中药组(23只),另设13只正常组。中药组以补肾通脉方干预。各组大鼠动情后期于门静脉推注胰岛素前后各处死一部分。逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测各组大鼠肝脏、脂肪组织IRS-1 mRNA表达,免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠肝脏、脂肪组织中IRS-1蛋白表达,免疫组化检测卵巢组织IRS-1蛋白表达。结果模型组IRS-1在肝脏、脂肪组织中mRNA及蛋白表达,以及卵巢中蛋白表达,均明显低于正常组(均P<0.05),中药组均显著高于模型组(均P<0.05)。各组IRS-1的表达在胰岛素刺激后均较刺激前明显增多(均P<0.05)。结论补肾通脉方可提高伴IR的PCOS大鼠肝脏、脂肪和卵巢中IRS-1的表达,这可能是其改善IR和促进排卵的机制之一。
- 谢阳黄冬梅李琼陆付耳徐丽君邹欣龚菂邬姗
- 关键词：多囊卵巢综合征胰岛素抵抗补肾通脉方胰岛素受体底物-1
- 玄芷镇痛片对急性血瘀大鼠血浆6-酮-前列腺素Flα和血栓素B_2的影响被引量：2
- 2014年
- 目的探讨玄芷镇痛片对急性血瘀模型大鼠血浆6-酮-前列腺素Flα(6-K-PGFlα)和血栓素B2(TXB2)的影响。方法 SD大鼠60只,随机分为正常对照组、模型组、阳性对照组、玄芷镇痛片1.36,2.72,5.44 g·kg-1组,共6组,各10只。采用皮下注射肾上腺素加冰水冷浴法制造大鼠血瘀模型,观察玄芷镇痛片对急性血瘀模型大鼠血浆6-KPGFlα、TXB2含量的影响。结果模型组与正常对照组比较,6-K-PGFlα水平降低(P<0.01),TXB2水平升高(P<0.01);玄芷镇痛片3个剂量组血浆中6-K-PGFlα水平均明显升高(均P<0.05),TXB2水平均明显降低(均P<0.05)。结论玄芷镇痛片对急性血瘀模型大鼠血浆6-K-PGFlα、TXB2均有明显调节作用,通过升高血浆6-K-PGFlα水平,降低TXB2水平,以纠正前列环素与血栓素A2之间的平衡失调。
- 邹欣王开富徐丽君龚菂黄光英
- 关键词：血栓素B2
- 补肾通脉方对伴胰岛素抵抗的多囊卵巢综合征大鼠肝脏和脂肪组织磷脂酰肌醇-3激酶蛋白表达的影响
- 2009年
- 目的观察补肾通脉方对伴胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)的多囊卵巢综合征(polycys-ticovarian syndrome,PCOS)大鼠肝脏和脂肪组织中磷脂酰肌醇-3激酶(PI-3K)p85α亚基蛋白表达的影响。方法23日龄雌性SD大鼠皮下注射硫酸普拉睾酮钠9mg/(100g.d),共20d,联合高脂饮食喂养80d建立IR的PCOS大鼠模型,成模大鼠随机分为模型组和治疗组,另设15只为正常对照组。治疗组大鼠以补肾通脉方进行干预。光镜下观察大鼠排卵情况;通过葡萄糖氧化酶法测定空腹血糖(FPG);以放射免疫法测定空腹血清胰岛素(FINS);采用Westernblot技术检测肝脏和脂肪组织中PI-3Kp85α的蛋白表达。结果与模型组比较,治疗组平均排卵数及排卵率明显增加(P<0.01),FINS浓度显著降低(P<0.01)。治疗组肝脏和脂肪组织中PI-3Kp85α的蛋白表达水平均较模型组明显增加(P<0.01,P<0.05)。结论补肾通脉方可改善伴IR的PCOS大鼠的胰岛素抵抗,其机制可能与其上调肝脏和脂肪组织中PI-3Kp85α蛋白的表达有关。
- 李琼黄冬梅陆付耳谢阳徐丽君邹欣龚菂
- 关键词：多囊卵巢综合征胰岛素抵抗补肾通脉方磷脂酰肌醇-3激酶
- 补肾通脉方对伴胰岛素抵抗的多囊卵巢综合征大鼠胰岛素抵抗及排卵障碍的影响被引量：8
- 2009年
- 目的建立由硫酸普拉睾酮钠联合高脂饮食诱导的伴胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)的多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)的大鼠模型,并观察补肾通脉方对模型大鼠IR和排卵障碍的影响。方法23日龄雌性SD大鼠皮下注射硫酸普拉睾酮钠每天9mg/100g,共20天,联合高脂饮食喂养80天,建立伴IR的PCOS大鼠模型,成模大鼠随机分为模型组和治疗组。治疗组大鼠以补肾通脉方进行干预。另设15只同龄大鼠为正常组。HE染色观察大鼠卵巢的组织学改变及排卵情况;葡萄糖氧化酶法测定空腹血糖(FBG);放射免疫法测定空腹血清胰岛素(FINS)、睾酮(T)、雌二醇(E2)、孕酮(P)、促卵泡刺激素(FSH)和黄体生成素(LH)的含量。结果与正常组比较,模型组大鼠平均排卵数、排卵率、胰岛素敏感指数(ISI)及FSH均明显降低(均P<0.01),FBG、FINS、T、E2和LH浓度均显著升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,治疗组大鼠平均排卵数及排卵率均明显增加(均P<0.01),ISI、FSH显著升高(P<0.01),FINS、T和E2浓度均显著降低(P<0.01)。结论硫酸普拉睾酮钠联合高脂饮食能成功建立伴IR的PCOS大鼠模型,补肾通脉方对模型大鼠的IR有改善作用,并可促进其排卵。
- 李琼黄冬梅陆付耳谢阳徐丽君邹欣龚菂
- 关键词：多囊卵巢综合征胰岛素抵抗排卵障碍补肾通脉方
