乔祖健
- 作品数：12 被引量：40H指数：3
- 供职机构：东北农业大学更多>>
- 发文基金：公益性行业(农业)科研专项国家科技重大专项中国农业科学院哈尔滨兽医研究所所长基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 丝状支原体丝状亚种SC型LppC基因的表达纯化
- 2008年
- 丝状支原体丝状亚种SC型是A类烈性传染病牛传染性胸膜肺炎的病原体。脂蛋白LppC是重要的免疫优势抗原,LppC基因是MmmSC的特异性基因。本研究通过PCR方法,扩增MmmSC标准株PG1的LppCN末端基因。将该序列克隆到pMDT-18载体上并测序,用pET32a为载体构建重组质粒进行诱导表达。LppCN末端基因长度为644bp,将其与NCBI上发布的Afade株、欧洲群代表株L2比较,它的核酸序列同源性为100%,表明LppC基因在种内高度保守。原核表达结果得到大小为45ku的目的蛋白,用Ni-NTA系统进行纯化得到高纯度的蛋白,Westernblot结果表明,重组蛋白能与牛传染性胸膜肺炎阳性血清反应,具有免疫学活性,为进一步与LppQ融合表达奠定基础。
- 李媛乔祖健王亮张建华辛九庆
- 一例奶牛布鲁杆菌病的诊断
- 2013年
- 布鲁杆菌病是由布鲁杆菌引起的人畜共患传染病，在家畜中以牛、羊、猪最常发生，且可传染给人和其他家畜。本病广泛分布于世界各地，目前在我国人、畜间仍有发生，给畜牧业生产和人类的健康带来了严重危害。
- 苗丽娟乔祖健唐艳林张立春
- 关键词：杆菌病奶牛人畜共患传染病畜牧业生产家畜
- 猪肺炎霉形体热休克蛋白Hsp70单克隆抗体的制备及鉴定被引量：6
- 2008年
- 以肺炎霉体体(Mhp)Yin-1株为模板,利用所合成的引物扩增了伴侣蛋白DnaK(热休克蛋白Hsp70)C末端基因,将得到的目的片段分别克隆至表达载体pET-28a和pGEX-6P-1中,原核表达获得了重组蛋白6P-1-DnakC和28a-DnakC,经Western-blot分析,均能被Mhp抗血清识别。以28a-DnakC作为包被抗原,建立了间接ELISA检测方法,以6P-1-DnakC为免疫抗原,免疫BALB/c小鼠。筛选和鉴定了2株分泌抗DnaK的杂交瘤细胞株,命名为1AD10、2AF11。Western-blotting结果表明,这2株单抗与Mhp发生特异性反应而不与其他相关霉形体发生反应。抗体亚类鉴定结果显示,1AD10、2AF11分别为IgG2b和IgG2a亚类,且轻链均为κ链。相加ELISA试验表明,2株单抗能识别不同的抗原表位。
- 乔祖健王亮李媛陈超辛九庆李继昌
- 关键词：猪肺炎霉形体热休克蛋白70单克隆抗体
- 原核表达山羊布氏杆菌M5-90VirB12蛋白及其在检测中的初步应用被引量：1
- 2011年
- 为建立山羊布氏杆菌(Brucellar melitensis)血清学检测方法,本实验克隆了B.melitensis M5-90疫苗株的virB12基因,并表达了相应蛋白。经SDS-PAGE和western blot鉴定,重组VirB12蛋白分质量约为25ku,具有较好的抗原性。以纯化的VirB12重组蛋白为抗原建立间接ELISA方法,并检测90份B.melitensis临床血清样品,检测结果与试剂盒及虎红平板凝集试验的检测结果符合率均为91.7%,结果表明,VirB12重组蛋白作为包被抗原可用于B.melitensis感染的血清检测,为进一步建立B.melitensis M5-90virB12缺失标记疫苗的鉴别检测提供方法。
- 高宇哲胡森乔祖健刘林涛杨帆步志高
- 关键词：原核表达间接ELISA
- 马耳他布氏杆菌毒力相关基因
- 本发明涉及一种来源于羊种布鲁氏菌弱毒疫苗株M5-90的延伸因子tuf基因，及其在区分马耳他布氏杆菌疫苗株M5-90和它的亲本株M28中的应用。本发明还提供一种将马耳他布氏杆菌强毒株M28毒力致弱的方法，该方法包括将马耳他...
- 步志高乔祖健胡森刘文兴
- 文献传递
- 布鲁氏菌Cu/Zn-SOD基因的原核表达及其免疫原性分析被引量：2
- 2013年
- 为分析布鲁氏菌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)蛋白的免疫原性,本研究将布鲁氏菌强毒株M28的Cu/Zn-SOD基因经PCR扩增并克隆至pET-32a(+)中进行重组表达和纯化。经western blot分析表明,重组蛋白SOD(rSOD)可以与布鲁氏菌自然感染血清发生特异性反应。同时,以rSOD免疫BALB/c小鼠制备的多抗血清可以与布鲁氏菌疫苗株M5-90发生特异性反应;以rSOD为包被抗原进行间接ELISA检测,结果显示rSOD能够区分布鲁氏菌阳性血清和阴性血清。因此,rSOD蛋白具有良好的免疫原性和ELISA反应原性,为利用rSOD蛋白建立布鲁氏菌检测方法奠定基础。
- 覃晓琳乔祖健胡森刘文兴赵云李继昌步志高
- 关键词：布鲁氏菌ZNSOD基因原核表达免疫原性
- 芩花提取液对鸡毒支原体感染的治疗作用及机制研究
- 乔祖健
- 禽流感病毒血凝素分子生物学的研究进展被引量：1
- 2008年
- 禽流感（Avian influenza Virus，AIV）属于正粘病毒科、流感病毒属的A型流感病毒，病毒粒子呈椭圆形，有囊膜，直径为80～120nm，个别有长短不齐的丝状粒子。囊膜表面覆盖有紧密排列的纤突，分别为病毒的血凝素（HA）和神经氨酸酶（NA）蛋白。HA为三聚体棒状结构，NA为四聚体蘑菇状结构。有学者将病毒的M2蛋白作为第3种突起，它也以疏水性氨基酸嵌合在脂质体翼膜内。M1是一种跨膜蛋白，囊膜下核蛋白NP包裹着RNA分子，在其3’端与3种RNA聚合酶PB1、PB2和PA分子组成的核糖核蛋白复合体（RNP）相连，形成1个或若干个球形的蛋白壳，组成的核衣壳呈螺旋状对称。
- 苗丽娟乔祖健
- 关键词：禽流感病毒分子生物学血凝素RNA聚合酶跨膜蛋白A型流感病毒病毒粒子
- 马耳他布氏杆菌毒力相关基因
- 本发明涉及一种来源于羊种布鲁氏菌弱毒疫苗株M5-90的延伸因子tuf基因，及其在区分马耳他布氏杆菌疫苗株M5-90和它的亲本株M28中的应用。本发明还提供一种将马耳他布氏杆菌强毒株M28毒力致弱的方法，该方法包括将马耳他...
- 步志高乔祖健胡森刘文兴
- 文献传递
- 山羊传染性胸膜肺炎病原体4株国内分离株的重新分类被引量：25
- 2007年
- 山羊传染性胸膜肺炎（Contagious Caprine Pleuropneumonia,CCPP）是由山羊支原体山羊肺炎亚种（M.capricolum subsp.capripneumoniae,Mccp）引起的高度接触性传染病,对4株CCPP中国分离株进行分子特征研究,确定其分类地位。针对3段基因（A、B、C）,对扩增产物进行酶切鉴定和测序,将结果与丝状支原体簇的6个成员进行遗传衍化分析。在A片段,4株中国分离株的扩增产物经PstI酶切后的结果与Mccp代表株F38相同,为548、420、128等3条带,其他5个丝状支原体簇成员只有420、128bp两条带。在B片段,序列分析结果显示4株中国分离株与F38同源性为99.5%,与山羊支原体山羊亚种Mcc代表株kid的同源性为98.9%,与丝状支原体山羊亚种MmcZZ株同源性仅为95.4%。在C片段研究发现,4株中国分离株的序列与Mmc模式株PG3株同源性为67.4%~67.6%,与2株Mcc8601-50和California Kid同源性为95.1%~98.4%,与3株Mccp97097ET、Gabes和F38的同源性为99.6%~99.8%。通过对中国分离的87001、87002、367、1653等4株CCPP病原体的分子特征研究,首次提出其与山羊支原体山羊肺炎亚种（Mccp）亲缘关系最近,应归属为Mccp,并将国内流行的山羊传染性胸膜肺炎的病原定名为Mccp。
- 李媛张建华胡守萍王亮辛九庆乔祖健
- 关键词：山羊传染性胸膜肺炎山羊支原体山羊肺炎亚种
