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IAP方案治疗中晚期肺癌32例疗效评价被引量：5: 2002年; 蒋小忠何祥梁郭振辉段红露何雪花; 关键词：肺癌化学治疗 IAP方案中晚期肺癌疗效评价

HSV1-TK逆转录病毒载体构建及表达被引量：3: 2001年; 目的　构建含ＴＫ基因逆转录病毒载体并检测其在转染细胞中的表达，为肺癌基因治疗积累实验资料。方法从ＰＨＳＶ１０６质粒中切下约２．４ｋｂＴＫ基因片段，插入逆转录病毒载体ＰＬＸＳＮ多克隆位点，酶切筛选正、反向连接质粒。正向连接子电穿孔法转化肺癌细胞Ａ５４９，用ＰＣＲ、细胞原位杂交法分别检测ＴＫ基因整合和表达。结果　经酶切鉴定得到正向连接子，电穿孔法转导Ａ５４９细胞，经Ｇ４１８筛选出了转基因细胞，ＴＫ基因已整合在转染细胞中并阳性表达。结论成功构建了含ＴＫ基因逆转录病毒载体，转导该载体的肺癌细胞可表达ＴＫ基因。; 何祥梁蒋小忠何雪花郭先健黄桂君; 关键词：逆转录病毒科胸苷激酶基因转染 HSV1-TK 肺癌

HSV_1-TK转染人肺腺癌细胞A549的实验研究: 2001年; 目的　体内外观察HSV1 TK/GCV对人肺腺癌细胞A5 49的杀伤效应。方法　构建含TK基因的逆转录病毒表达载体 ,电穿孔法转化肺癌细胞A5 49。MTT法检测转染细胞对GCV的药物敏感性 ,并观察旁观者效应 ;电镜、FCM、TUNEL法检测GCV诱导转染细胞凋亡变化 ;PCR和细胞原位杂交分别检测转染细胞TK基因整合和表达 ;活体内观察GCV对转染细胞、亲代细胞接种裸鼠皮下肿瘤治疗效果。结果　转基因细胞变得较不规则 ,多角型 ,易形成空泡。A5 49、A5 49 PLXSN、A5 49 TK三种细胞体外倍增时间分别为 ( 3 6.15± 3 .2 7)、( 4 0 .82± 3 .75 )和 ( 4 2 .0 6± 4.12 )小时 (P >0 .0 5 )。转染细胞对GCV的敏感性比亲代细胞提高 46倍 (P<0 .0 0 1)。旁观者效应在高细胞密度接种 ( 1× 10 4细胞 /孔 )较低细胞密度接种 ( 1× 10 3细胞 /孔 )明显。电镜发现转染细胞有凋亡小体、核呈半月征。FCM、TUNEL均能检测到转染细胞凋亡发生率明显高于对照细胞 (P<0 .0 0 1)。PCR及原位杂交表明转染细胞有TK基因整合和表达。体内实验表明GCV能明显抑制转染细胞接种的肿瘤 ,而亲代细胞接种的肿瘤未受抑制。结论　转TK基因细胞在体内外都获得了对GCV的敏感性。TK/GCV系统杀灭肿瘤可能与诱导细胞凋亡有关。GCV能在活体内抑制转TK基因细胞裸鼠移?; 何祥梁郭先健钱桂生何雪花黄桂君陈维中李淑萍; 关键词：基因转移肺腺癌

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何雪花

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