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刘学恩: 作品数：45 被引量：376H指数：10; 供职机构：北京大学基础医学院病原生物学系更多>>; 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金国家科技攻关计划更多>>; 相关领域：医药卫生环境科学与工程更多>>

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梅毒密螺旋体Tp47重组蛋白的表达及其应用: 2003年; 目的　在大肠埃希菌中表达梅毒密螺旋体 (Treponemapallidum ,Tp)Tp47重组蛋白 ,用其建立诊断梅毒的酶联免疫法 (enzymeimmunoassay ,EIA)。方法　应用聚合酶链反应法 (PCR)从Tp全基因组中扩增目的片段Tp47,并将其克隆到表达载体 pET - 3 0a中 ,构建重组质粒pET - 3 0a -Tp47。在大肠埃希菌中表达重组蛋白Tp47,亲和层析柱纯化 ,建立EIA法 ,检测血清中抗 -Tp抗体。结果　获得了Tp47基因重组蛋白的高效表达 ,该重组蛋白存在于细菌上清中 ,占全菌体蛋白 12 %左右 ,分子量约 3 9kDa。蛋白印迹法 (westernblot,WB)显示 ,Tp47重组蛋白具有良好的抗原性。用Tp47重组蛋白建立EIA法 ,检测 11份梅毒血凝试验阳性和 2 8份阴性血清 ,灵敏度为 10 0 % (11/ 11) ,特异性为 96 4% (2 7/ 2 8)。; 张瑞芬庄辉蒋志彬王薇媛张正杜珩刘学恩董庆鸣王小红; 关键词：梅毒密螺旋体重组蛋白梅毒酶联免疫试验

2008年广州市20岁以上正常人群甲型肝炎抗体流行率调查被引量：2: 2010年; 目的调查2008年广州市20岁以上正常人群甲型肝炎抗体(抗-HAV IgG)流行率。方法 2008年在广州市南方医院健康体检人群中,采集20岁以上5个年龄组正常人群血清500份,应用雅培(Abbott)公司抗-HAV IgG诊断试剂盒(化学发光法),定性检测血清中的抗-HAV IgG,分析人群中抗-HAV IgG流行率。结果 2008年广州市20岁以上正常人群抗-HAV IgG总流行率为72.2%(361/500),男性人群阳性率为73.2%(230/314),女性人群阳性率70.4%(131/186)。20～岁组、30～岁组、40～岁组、50～岁组和60岁以上组抗-HAV IgG阳性率分别为52.8%(56/106)、52.5%(63/120)、82.5%(94/114)、89.8%(88/98)和96.8%(60/62),随年龄增长而上升。结论目前广州市20～39岁组人群抗-HAV IgG阳性率较低,建议对该人群的易感者进行甲型肝炎疫苗免疫。; 吴小东李文凡杨生义刘学恩杨洁周彬庄辉侯金林; 关键词：甲型肝炎病毒抗-HAV IGG 流行率

甲型肝炎疫苗应用后甲型肝炎流行特征的变迁被引量：22: 2012年; 甲型肝炎（甲肝）是由甲肝病毒（HAV）引起的急性肠道传染病,是全球严重的公共卫生问题之一。世界不同地区抗-HAV流行率为15%～100%。2000年世界卫生组织（WHO）报告,全球每年发生临床型甲肝约150万例[1],主要发生在亚洲、非洲等发展中国家,给社会带来了巨大的经济负担。近年来,随着社会经济的发展。; 邱宁刘学恩庄辉; 关键词：甲型肝炎疫苗流行病学

肝组织中HBV cccDNA荧光定量聚合酶链反应检测法的建立被引量：11: 2011年; 目的建立和优化一种灵敏、特异的检测肝组织中乙型肝炎（乙肝）病毒（HBV）共价闭合环状DNA（cccDNA）荧光定量聚合酶链反应（荧光定量PCR）。方法设计检测HBVDNA（tDNA）和cccDNA特异性引物及探针，用3．44×10^0～3．44×10^9copies／pl含HBV全基因组序列（C基因型）质粒作为标准品，建立荧光定量PCR检测标准曲线。取33例乙肝肝癌患者肝组织标本、13例慢性乙肝患者肝活检组织标本和10例非乙肝患者肝组织标本，验证该法灵敏度和特异度。提取肝组织中DNA，取一部分进行质粒安全ATP依赖的DNA酶（PSAD）酶切；另一部分不酶切作为tDNA和β—globin检测样本，分别进行HBV cccDNA、tDNA和β—globin定量检测，以β-globin为参比，对每个细胞的HBV cccDNA和tDNA含量进行标准化。结果检测肝组织中HBV cccDNA和tDNA定量的线型范围均为3．44×10^0～3．44×10^9copies／μl。检测HBV cccDNA和HBVDNA下限均为3．44×10^0copies／μl。33例乙肝肝癌患者和13例慢性乙肝患者的肝组织中HBV cccDNA最低含量分别为0．003copies／cell和0．031 copies／cell；检测10份非乙肝肝癌患者的肝组织标本均为阴性。应用PSAD消化肝组织中提取的DNA可减少假阳性，提高cccDNA检测法特异度达7．24×10^2倍。对2例乙肝肝癌患者的肝组织标本重复检测5次，Ct值的变异系数为0．224％-0．609％。结论该方法灵敏度和特异度高，重复性好，可用于检测肝组织中HBV cccDNA。; 王美容邱宁卢实春修典荣于建国李彤刘学恩庄辉; 关键词：乙型肝炎病毒实时荧光定量聚合酶链反应

乙型肝炎病毒导致的肝硬化伴肝癌患者血清中N糖组学改变被引量：11: 2008年; 肝细胞癌（HCC）是最常见的肿瘤和最主要的死因之一，多发生于HBV和HCV感染导致的肝硬化患者，筛查肝硬化人群，早期诊断HCC可降低肿瘤的病死率。甲胎蛋白（AFP）是目前广泛应用的辅助诊断HCC的血清学指标，是对B超、CT等影像学诊断的有效补充。最近的荟萃分析表明，不同研究论文报道的AFP的灵敏度和特异度有很大的不同，这种现象不能完全用AFP的临界值不同解释。血清中的N糖蛋白主要由肝脏和B淋巴细胞合成，N糖成分的改变可反应肝脏或B淋巴细胞功能的改变，糖链的改变常常反应出机体的异常改变。糖组学在诊断领域的应用曾经因为缺少合适的分析技术而受限制，血清中N糖组学分析技术克服了这一屏障。本研究的目的是评价血清中N糖指纹图谱应用于乙型肝炎后肝硬化伴肝癌辅助诊断的意义。; 刘学恩Liesbeth Desmyter高春芳Wouter LaroySylviane DewaeleValerie Vanhooren王玲庄辉Nico CallewaertClaude LibertRoland Contreras陈翠英; 关键词：肝细胞肝硬化肝炎病毒乙型

儿童丙型肝炎研究进展被引量：4: 2016年; 丙型肝炎病毒（hepatitis C virus,HCV）是一种可通过血液、性和母婴传播的病毒,丙型肝炎（丙肝）呈全球性流行,不同性别、年龄、种族、民族人群均对HCV易感。2015年世界卫生组织（World Health Organization,WHO）估计,全球每年近50万人死于HCV感染相关的肝病。; 高玉华刘学恩庄辉; 关键词：儿童丙型肝炎自然史

不同梅毒螺旋体基因重组抗原酶联免疫试验比较被引量：3: 2002年; 目的　对单一梅毒螺旋体 (Treponemapallidum ,Tp)基因重组抗原Tp47、Tp42或Tp1 7及联合应用 3种基因重组抗原 (Tp47、Tp42和Tp1 7)酶联免疫试验 (enzymeimmunoassay,EIA)进行比较。方法　分别用 3种单一Tp基因重组抗原Tp47、Tp42或Tp1 7EIA法 ,检测 1 1份梅毒血凝试验Tp抗体阳性和 2 8份阴性血清 ,并与联合应用 3种基因重组抗原 (Tp47、Tp42和Tp1 7)EIA法比较。结果　单一基因重组抗原Tp47、Tp42或Tp1 7EIA法的灵敏度分别为1 0 0 % (1 1 / 1 1 )、1 0 0 % (1 1 / 1 1 )和 90 9% (1 0 / 1 1 ) ,特异度分别为 96 4% (2 7/ 2 8)、1 0 0 % (2 8/ 2 8)和 96 4% (2 7/ 2 8) ;联合应用 3种基因重组抗原EIA法的灵敏度和特异度分别为 1 0 0 % (1 1 / 1 1 )和 1 0 0 % (2 8/ 2 8)。结论　单一Tp基因重组抗原EIA法用于梅毒诊断存在一定的假阳性和假阴性反应 ,联合应用 3种基因重组抗原 (Tp47、Tp42和Tp1 7); 张瑞芬庄辉蒋志彬王薇媛杜兰英刘学恩; 关键词：梅毒螺旋体梅毒酶联免疫试验

乙型肝炎病毒核心DNA疫苗研究进展被引量：1: 2002年; 第一代乙型肝炎疫苗是从乙型肝炎表面抗原(HBsAg)无症状携带者血清中分离HBsAg颗粒,经灭活后制成的乙型肝炎血源疫苗;第二代乙型肝炎疫苗即为HBsAg基因重组疫苗,该疫苗可诱导体液免疫应答产生中和抗体,但不能诱导细胞免疫应答,主要用于预防,而不是用于治疗.目前,国内外正在研究和开发第三代乙型肝炎疫苗,即乙型肝炎病毒(HBV)DNA疫苗(也称核酸疫苗),目的是既可用于预防,又可用于慢性乙型肝炎的治疗.; 刘学恩庄辉; 关键词：乙型肝炎接种剂量接种途径乙型肝炎病毒 DNA疫苗

国产拉米夫定优化治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者96周疗效观察: 2016年; 目的观察国产拉米夫定(LAM)-贺甘定优化治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎(乙肝)患者96周疗效及耐药发生情况。方法入组93例符合我国《慢性乙型肝炎防治指南(2010年版)》治疗指征的HBeAg阳性慢性乙肝患者,口服贺甘定100mg/d治疗,24周时血清HBV DNA>300拷贝/ml患者加用国产阿德福韦酯(ADV)-阿甘定10mg/d治疗;24周时血清HBV DNA≤300拷贝/ml患者继续贺甘定治疗,发生病毒学突破时加用阿甘定。每12周检测血清HBV DNA(罗氏荧光定量PCR法)和HBV血清学标志物HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe(雅培化学发光法)及生化学指标[丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)]等。基线和96周时对患者肝组织活检用于病理组织学评价。基线和病毒学突破时,用PCR产物直接测序法进行血清HBV DNA耐药检测。结果 93例HBeAg阳性慢性乙肝患者治疗随访至96周时失访率为16.13%(15/93)。患者96周时病毒学应答(血清HBV DNA≤300拷贝/ml)率为56.41%(44/78),HBeAg阴转率和血清学转换率分别为24.36%(19/78)和19.23%(15/78),ALT和AST复常率分别为87.18%(68/78)和93.59%(73/78),1例患者发生HBsAg清除,耐药突变率为8.97%(7/78)。60例患者的基线与96周肝组织病理配对分析显示,71.67%(43/60)患者肝组织炎症改善,48.33%(29/60)患者纤维化程度改善。结论贺甘定优化治疗HBeAg阳性慢性乙肝患者96周可有效抑制HBV复制并促进HBeAg血清学转换,改善肝功能及肝组织炎症和纤维化,且耐药突变率较低。; 高玉华李越孟庆华张占卿赵平商庆华苏明泽李彤刘学恩庄辉; 关键词：拉米夫定阿德福韦酯 HBV 肝组织病理

HBV cccDNA检测临床应用研究进展: 2011年; 乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA（hepatitisBviruscovalentlyclosedcircularDNA，HBVcccDNA）是嗜肝病毒复制过程中产生的一种重要复制中间体，在宿主细胞核内积聚，形成HBVcccDNA池，半衰期长，现有抗病毒药物不能清除，是宿主肝细胞持续感染和抗病毒治疗后产生耐受和停药后复发的关键，受到病毒包膜蛋白及免疫细胞因子等一系列因素的精确调控。随着检测技术灵敏度和特异度的不断提高，; 王美容刘学恩庄辉; 关键词：乙型肝炎病毒 HBV DNA

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