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小麦与叶锈菌互作体系中Ta-hir3和Ta-hir4基因克隆及其特性分析: 由Puccinia triticina Eriks.引起的小麦叶锈病是世界性的小麦病害之一,也是限制我国小麦优质、高产和稳产的重要因素之一。过敏性反应(Hypersensitive Response,HR)是小麦抗病机制...; 刘芬; 关键词：小麦叶锈病基因克隆 QRT-PCR; 文献传递

小麦Ta-hir2基因克隆及转Ta-hir2基因小麦的获得: 2011年; 通过基因枪介导法将小麦过敏性诱导反应蛋白2基因Ta-hir2转入小麦胚性愈伤组织中,经分化筛选后获得转基因小麦植株,为验证该基因的功能奠定基础。以接种非亲和叶锈菌小种05-19-43②的小麦‘TcLr15’为材料,采用同源克隆的策略克隆了小麦Ta-hir2基因;将该基因的编码区与植物表达载体pAHC-25相连,成功构建了重组转基因质粒Ta-hir2-pAHC-25;采用基因枪法将构建好的重组质粒转化小麦品种‘Thatcher’和‘TcLr15’的胚性愈伤组织,获得了再生植株;对再生植株提取基因组DNA后,进行PCR检测,经计算,PCR阳性率为4.76%,最终转化率为0.28%。; 陈佳平孟涛刘芬于秀梅赵伟全刘大群; 关键词：小麦基因克隆

河北省补充耕地数量质量按等级折算信息系统的设计与开发: 耕地占补平衡战略确定以来，由于农用地质量一直没有定量的指标，致使占补工作的实施始终还处在数量平衡的层面，占优补劣现象十分普遍。随着农用地分等工作在全国范围内的完成，农用地质量也就具备了科学的评价方法和定量的指标。在此基础...; 刘芬; 关键词：耕地占补平衡信息系统农用地质量; 文献传递

一种植物总RNA的快速提取方法被引量：8: 2010年; 为验证NaAc/无水乙醇沉淀法提取植物总RNA的质量,本研究对小麦不同组织及其他不同种属植物花的总RNA进行提取和检验,结果表明,该方法提取的植物总RNA完整性好、纯度高。以Tubulin为参照对其余4个持家基因GAPDH、Actin、Rubisco和Ubiquitin的表达情况进行分析。扩增结果表明,选定的各持家基因在叶锈菌侵染不同时间的小麦叶片中的表达量并不一致,且各基因在小麦叶片中的丰度也存在差异。通过对几种基因的扩增,进一步证实该方法能够满足一般分子生物学下游操作的要求,是一种理想的植物总RNA提取方法。; 刘芬于秀梅刘大群; 关键词：植物总RNA提取小麦

黄连素诱导体外培养的肺腺癌A549细胞凋亡被引量：1: 2010年; 目的研究黄连素对体外培养的A549增殖和凋亡作用。方法利用MTT法观察黄连素对A549的增殖影响;荧光显微镜观察细胞形态的改变;琼脂糖凝胶电泳检测DNA的损伤;半定量RT-PCR法分析Bcl-2,Bax,p53mRNA的表达情况;流式细胞仪测定细胞周期的阻滞情况;血清药理学观察大鼠含药血清对A549的作用。结果黄连素能显著抑制A549增殖,并呈一定的量效和时效关系;细胞的形态发生明显改变,出现凋亡小体;DNA琼脂糖凝胶电泳出现典型的梯状条带;黄连素能够上调Bax、p53,下调Bcl-2的mRNA的表达;大鼠含药血清能显著抑制细胞生长。结论黄连素能够抑制A549细胞生长,诱导凋亡。; 史海岭刘芬郭晓军吴国江朱宝成; 关键词：黄连素 A549 细胞凋亡半定量RT-PCR 血清药理学

黄连素对肺腺癌A549细胞增殖、迁移与黏附的影响被引量：14: 2009年; 背景与目的:研究表明,黄连素在清热解毒、抗菌消炎的同时,还具有诱导肿瘤细胞凋亡的作用,但最近的研究认为黄连素还能抑制肿瘤细胞的转移和扩散。为了进一步探讨黄连素对肿瘤细胞转移的作用及机制,本研究对黄连素作用后的肺腺癌A549细胞的增殖、迁移及黏附能力进行了检测。方法:应用MTT法检测不同浓度黄连素作用后细胞增殖情况;通过划痕试验和黏附试验测定黄连素作用前后细胞迁移和黏附能力;半定量RT-PCR法检测MMP2、MMP9的mRNA表达;明胶酶谱法测定MMP2、MMP9的活性。结果:黄连素能显著抑制A549增殖,并呈现一定的量效和时效关系(P<0.05);细胞的迁移率和黏附率明显降低,并且呈现剂量依赖性(P<0.05);经黄连素作用后的A549细胞,MMP2和MMP9的mRNA的表达明显降低,MMP2和MMP9降解明胶的能力下降,尤以100μg/mL的作用最为明显(P<0.05)。结论:黄连素能够抑制A549细胞的迁移和黏附能力,其机制可能与下调MMP2和MMP9的mRNA表达,从而降低其活性有关。; 史海岭刘芬郭晓军吴国江朱宝成; 关键词：黄连素 A549 细胞迁移 MMP2 MMP9

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刘芬