单根法
- 作品数：107 被引量：281H指数：10
- 供职机构：上海交通大学医学院附属新华医院更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会基础研究重点项目上海市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学机械工程更多>>
- 由重组腺相关病毒1/2载体携带的LacZ报告基因在脐血间质干细胞中的表达被引量：1
- 2007年
- 目的:观察由重组腺相关病毒1/2载体携带的LacZ报告基因在体外培养的脐血间质干细胞中的表达情况。方法:实验于2005-10/2006-02在上海交通大学附属新华医院科研中心完成。①以孕龄近60d的杂种妊娠犬的脐带血作为实验用脐血间质干细胞的标本来源。重组腺相关病毒1/2载体-lacZ基因(北京本原正阳基因技术有限公司)。②无菌条件下采集妊娠犬脐带血,置于预装有肝素的离心管中,与Hanks液1∶1混合均匀,叠加于相对密度为1.077的淋巴细胞分离液上,梯度离心分离后进行培养和扩增。③取第4代脐血间质干细胞,经胰酶消化后吹打成单细胞悬液,以5×104/孔接种于24孔板内,随机数字表法分为转染组20孔、空白对照组4孔。转染组将重组腺相关病毒1/2载体-lacZ报告基因(1×1012v.g.mL-1)用不含血清的IMDM培养液作系列滴度稀释,分为5个滴度,即感染复数分别为每个细胞1×102,1×103,1×104,1×105,1×106v.g,各感染复数均设4孔;空白对照组未加入病毒,只加入相同体积的不含血清的IMDM培养液。④转染72h后采用X-gal化学染色法进行检测,成功转染上LacZ基因的脐血间质干细胞其胞浆内会因合成半乳糖苷酶而呈阳性蓝染。每组样本随机选取5个视野,相差显微镜下计数半乳糖苷酶阳性细胞数,取均值即为LacZ基因细胞转染率。结果:①脐血间质干细胞生长情况及LacZ报告基因表达的检测:转染组病毒基因转染后未再见到明显的细胞增殖,转染72h后大部分细胞表达LacZ基因并合成半乳糖苷酶,X-gal染色呈蓝色,长梭形;4～6周后细胞形态趋向老化,长梭形逐渐变为宽扁形;8周后细胞均被蓝染,颜色明显较转染72h时深,细胞形态由长梭形变为不规则,明显老化。空白对照组细胞反应均为阴性。②LacZ报告基因细胞转染率测定结果:转染72h后,感染复数为每个细胞1×102v.g时,仅有少数细胞蓝染呈阳性;感染复数为每个细�
- 陈德海单根法马南钟竑
- 关键词：间质干细胞胎血细胞学腺病毒科
- 电视胸腔镜微创外科临床应用十年回顾(附639例报告)
- 作者所在胸心外科开展电视胸腔镜辅助手术(VATS)十年,先后为639例胸部疾病病人进行治疗.本文总结其临床资料,详细介绍手术操作方法和治疗体会.
- 单根法张辅贤戚晓敏李国庆钟竑隆桂麟
- 关键词：电视胸腔镜微创外科胸部疾病适应证
- 文献传递
- 脐血间质干细胞诱导移植梗死心肌的细胞因子分泌和血管再生被引量：11
- 2005年
- 目的研究脐血间质干细胞(UCB-MSCs)梗死心肌移植的胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)分泌和血管再生。方法5-氮杂胞嘧啶核苷诱导分化后的UCB-MSCs经结扎的冠状动脉左前降支远端灌注移植入梗死区,2、4、8周后取标本,用免疫组化法和VanGieson染色检测细胞因子的表达和梗死区血管的再生情况。结果UCB-MSCs移植2、4、8周后,梗死区IGF-1、VEGF表达明显高于对照组(P<0.01);治疗组梗死区微血管数量明显高于对照组。结论UCB-MSCs梗死心肌移植除有心肌再生外,尚可通过细胞因子分泌对梗死心肌起到血管再生的积极作用。
- 金誉单根法钟竑李小波张辅贤张韫佼
- 关键词：梗死血管再生细胞因子分泌间质干细胞心肌脐血MSC
- 肺恶性组织纤维瘤一例报道
- 2007年
- 马南钟竑单根法张辅贤
- 山莨菪碱联合介入及全身化疗方案治疗肺癌患者的临床疗效观察被引量：3
- 2006年
- 李国庆单根法张辅贤钟竑李小波杜奇容戚晓敏张韫佼
- 关键词：临床疗效观察全身化疗肺癌患者山茛菪碱介入手术机会
- 全反式维甲酸对肺癌细胞作用的初步观察被引量：3
- 1998年
- 人肺癌细胞株 SPC-A1加入全反式维甲酸(ATRA)使其终浓度为10μmol/L。培养7d 后处理组和对照组分别进行 MTT、光镜、电镜及流式细胞仪检测发现处理组细胞增殖减慢,细胞聚集成片,胞浆中空泡增多,核浆比例下降,无明显染色体固缩及凋亡小体。细胞周期动力学分析发现处理后的细胞生长周期向 G_(0/1)期聚集,S 期和 G_2+M 下降。提示 ATRA 对体外培养的人肺癌 SPC-A1株有一定的生长抑制和诱导分化作用,但凋亡作用不明显。
- 耿隽超朱恩良单根法钟竑
- 关键词：肺肿瘤药物疗法全反式维甲酸细胞凋亡
- 肺部炎性假瘤21例分析被引量：3
- 1997年
- 对21例术前诊断或疑为肺癌，术后证实为炎性假瘤的病例进行分析．显示肺癌与炎性假瘤在病史、X线胸片及CT表现上有许多相似之处。认为若经短期诊断性治疗（＜4周）无效，或肿块直径＞3．5cm、CT值超过32Hu，应尽早手术。术中应冰冻切片检查。
- 戚晓敏单根法李国庆朱恩良张辅贤钟竑
- 关键词：炎性假瘤肺炎
- 脐血间充质干细胞肌源性诱导分化的研究被引量：16
- 2005年
- 目的研究脐血间充质干细胞 (MSC)体外的采集、培养和扩增 ,探讨MSC肌源性分化的条件和能力。方法选择杂种妊娠犬 11只 ,采集适量脐带血 ,常规分离后获得单核细胞 ,分别接种于不同的培养液中进行培养和体外传代扩增。免疫组织化学检测脐血MSC表面抗原的表达 ;5 -氮杂胞嘧啶核苷 (5 aza)诱导处理脐血MSC ,观察细胞形态结构的变化及肌源性标记物的表达。结果犬脐血MSC在IMDM中生长良好 ,增殖迅速 ,每传一代细胞扩增 2 ～3倍 ,传至 7代后细胞可扩增 1.5× 10 2～2 .0× 10 3 倍 ;脐血中包含破骨细胞样和纤维母细胞样贴壁细胞 ,后者CD2 9和CD71表达阳性 ,CD11a、CD11b和CD34表达阴性 ;脐血MSC在 10μmol/L的 5 aza诱导 3周后体积延长 ,与邻近细胞形成连接 ,并表达肌节性肌动蛋白和结蛋白 ,与阳性对照结果相似。 结论脐血MSC是存在于脐血中的一类不同于造血干细胞的原始细胞 ,在体外可大量扩增 。
- 罗凯单根法钟竑金誉张辅贤
- 关键词：脐血间充质干细胞MSC诱导分化妊娠犬杂种
- 肺癌手术前后sIL-2R动态观察
- 1997年
- 隆桂麟钟竑朱恩良单根法张辅贤李国庆
- 关键词：肺肿瘤外科手术白细胞介素2
- 应用EBM-2培养犬脐血间充质干细胞的实验研究
- 2006年
- 目的应用EBM-2培养犬脐血间充质干细胞(MSC),为MSC的研究提供新的细胞培养方法。方法取犬的脐血,分为四组进行细胞培养。第1组用EBM-2培养;第2组用添加有EGM-2MV的EBM-2在6孔板上培养。第3组用添加有EGM-2MV的EBM-2在纤连蛋白包被的6孔板上培养。第4组用添加有EGM-2MV的EBM-2在25cm2细胞培养瓶中培养。应用免疫组化法检测细胞抗原CD11a、CD11b、CD34、CD29及CD71的表达。结果各组均有纤维母细胞样细胞培养出。第1组细胞形态不良,增殖缓慢;第2组细胞增殖旺盛;第3组细胞克隆不稳定,容易老化;同时出现另一种细胞克隆。第4组细胞培养的结果与第3组相似。免疫组化法检测抗原显示:CD11a(-)、CD11b(-)、CD34(-)、CD29(+)、CD71(+)。结论在不用纤连蛋白包被的6孔板上,用添加有EGM-2MV的EBM-2细胞培养液可以培养出生长良好、增殖旺盛的MSC。
- 赵宏光单根法许勤钟竑罗凯申通
- 关键词：间充质干细胞脐血细胞因子纤连蛋白
