吴建伟
- 作品数：146 被引量：434H指数：12
- 供职机构：贵州医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学化学工程更多>>
- 家蝇幼虫分泌物抗菌肽的分离及其部分特性被引量：19
- 2007年
- 目的分离家蝇(Musca domestica)幼虫分泌物抗菌肽并研究其部分理化特性。方法用超滤、固相萃取、反相高效液相色谱(RB-HPLC)分离纯化家蝇幼虫分泌物抗菌肽;测定抗菌肽对多株革兰氏阴性菌及革兰氏阳性菌的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC);比较其在不同pH值(pH 6．0～9．0)、不同阳离子浓度(Mg2+:(0.5×10-3～10．0×10-3)mol／L, Na+、K+:(10×10-3～100×10-3)mol／L)及不同小鼠血清浓度(12．5％～75％)环境中抗菌活性的变化。结果超滤分离获得的活性蛋白相对分子质量为Mr 3000～30000,该蛋白经20％、30％、70％及80％乙腈洗脱,其组分均有活性,其中以70％乙睛洗脱组分活性较强且稳定。进一步用RP-HPLC从70％洗脱组分中纯化出两个抗菌活性肽。抗菌肽对大肠埃希菌、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌及枯草芽孢杆菌的MIC值分别为32．738、16．369、65．475及32．738μg/ml。在培养基pH值为6～9、不同阳离子浓度及不同小鼠血清浓度的环境中,各实验组的A570增加量均小于0．05,而对照组的A570增加量多为0.3以上,各实验组与对照组比较,其差异均具有统计学意义(P值均<0．01)。结论用固相萃取等方法从家蝇幼虫分泌物中可快速分离出具有较强活性的抗菌肽。该抗菌肽在不同条件下均具有较好的抗菌效果。
- 国果吴建伟付萍覃容贵张勇宋智魁
- 关键词：家蝇分泌物抗菌肽纯化
- 利用工程蝇生物转化器建设国酒茅台循环型酿酒生态工业的技术工艺创新及相关理论研究
- 传统酿酒工业粗放的生产与丟糟方式造成了资源的过度浪费与生态环境的日益恶化，严重制约了我国白酒酿造业循环经济的建立以及生态环境的可持续发展。本文以循环经济模式为构建理念，与国酒茅台集团展开合作，利用工程蝇对有机废物的生态转...
- 吴建伟尚小丽罗振华王宇修江帆徐楠
- 关键词：生物转化有机废物生态工业
- 应用iTRAQ标记技术结合2DLC-MS/MS分析家蝇幼虫免疫诱导后血淋巴蛋白质组被引量：1
- 2014年
- 目的分析家蝇幼虫免疫诱导前后血淋巴中的免疫防御相关靶标,探索其先天性免疫机制。方法采用同位素标记及相对定量技术(isobaric tags for relative and absolute quantification,iTRAQ)结合2D LC-MS/MS对家蝇幼虫诱导前后的血淋巴蛋白质组进行研究。结果与对照组比较研究后共获得237个不同肽段,鉴定到13个具有定量信息的差异蛋白。免疫刺激后显著上调的蛋白有9个,下调蛋白4个(P<0.05),对鉴定到的差异蛋白进行理化性质分析和GO(gene ontology)注释分析,发现这些蛋白分别具有抗菌、抗氧化、催化结合等功能,并参与了免疫、代谢、应激、转运等生物学过程,表明对家蝇幼虫经诱导后血淋巴中多种功能蛋白的表达发生了变化。结论 iTRAQ标记技术结合2D LC-MS/MS可以有效地分离鉴定昆虫血淋巴蛋白质组,为深入研究差异蛋白的功能奠定了基础。
- 张勇吴建伟付萍国果
- 关键词：家蝇幼虫蛋白质组血淋巴ITRAQ
- 蝇蛆壳聚糖降血脂作用的实验研究被引量：4
- 2007年
- 目的探讨蝇蛆壳聚糖降血脂的作用。方法预防性给药时,给高脂饲料造模的同时连续给药4w,于第28天测定大鼠血清TC、TG、HDL-C、LDL-C含量,同时观察对大鼠体重、肝重及肝重/体重百分率的影响。治疗性给药时,给高脂饲料造模成功后连续给药4w,测定大鼠血清TC、TG、HDL-C、LDL-C含量,并观察对大鼠体重、肝重及肝重/体重百分率的影响。结果预防性给药时,中、高剂量蝇蛆壳聚糖组能显著降低血清TC、TG、LDL-C含量,显著升高HDL-C,降低大鼠体重、肝重及肝重/体重百分率。治疗性给药时,低、高剂量蝇蛆壳聚糖组能显著降低血清TC、TG、LDL-C含量,显著升高HDL-C,降低大鼠体重、肝重及肝重/体重百分率。结论蝇蛆壳聚糖能调节血脂平衡,预防高脂血症的产生,对已形成的高脂血症有一定的治疗效果。
- 覃容贵付萍吴建伟国果
- 关键词：高脂血症降血脂
- 家蝇幼虫血淋巴蛋白组学研究初探
- 目的研究家蝇幼虫血淋巴的蛋白组学,筛选重要的功能蛋白。方法使用破壁法提取三龄幼虫血淋巴,进行双向电泳分析,另一部分进行沸水浴处理后离心取上清,透析脱盐后进行不同条件的双向电泳,探索合适的分析方法,筛选部分重要功能蛋白点进...
- 张勇吴建伟付萍国果
- 关键词：家蝇幼虫血淋巴蛋白组
- 文献传递
- 家蝇伴侣蛋白CCTη基因序列分析与表达模式被引量：2
- 2015年
- 目的对家蝇伴侣蛋白CCTη(MD-CCTη)基因进行序列分析,克隆其c DNA序列并检测家蝇CCTη基因的表达情况。方法采用表达序列标签(EST)测序技术从已构建的家蝇幼虫c DNA文库中筛选MD-CCTη基因,对其进行序列测定和分析;提取家蝇3日龄幼虫RNA,逆转录c DNA为模板,PCR扩增,并与p MD-19T载体连接,转化大肠杆菌DH5α中;采用实时荧光PCR技术分析MD-CCTη基因在家蝇不同生长发育阶段及3日龄幼虫组织中表达模式。结果 MD-CCTη基因开放阅读框(ORF)全长1 632 bp,编码543个氨基酸,理论分子量59.3 k Da,等电点6.27;该基因推导的氨基酸序列与其他昆虫同源序列比较有较高的相似性(93%),聚类分析结果显示,家蝇与地中海实蝇和果蝇的亲缘关系最近(100%);MD-CCTη在发育阶段以卵期表达量最高,其次为1日龄幼虫,雄性成虫表达量最低;MD-CCTη基因在家蝇3日龄幼虫组织中气管表达量最高,其次为唾液腺,在体壁中表达量最低。结论成功克隆出MD-CCTη基因的c DNA序列,MD-CCTη在家蝇不同发育阶段及组织中表达模式存在明显差异。
- 赵学军国果修江帆吴建伟陶如玉
- 关键词：家蝇克隆实时荧光
- 家蝇幼虫分泌物抗菌组分的抗菌效果观察及筛选被引量：11
- 2006年
- 目的筛选家蝇幼虫分泌物中的抗蔺组分并测定其抗菌活性。方法用盐析、凝胶过滤层析、反相高效液相色谱（RP-HPLC）分离纯化分泌物中抗菌蛋白肽，以大肠埃希茼为指示曲种，采用平板滤纸片法检测抗菌活性，并观察其对金黄色葡萄球菌等多种细菌的抗菌活性。结果经50％～80％硫酸铵盐析沉淀、Sephadex G-100、G-50凝胶过滤往层析分离得到一活性峰，该活性峰埘大肠埃希菌及金黄色葡萄球菌等细菌显示较强的抗菌作用，进一步用反相高效液相色潜纯化，该活性峰由3个活性组分构成。结论家蝇幼虫分泌物中含有3个抗菌组分，对多种革兰氏阳性及阴性菌具有较强的抗菌活性。
- 国果吴建伟
- 关键词：家蝇幼虫分泌物抗菌肽分离纯化抗菌活力
- 鲜蛆替代国产鱼粉对海兰棕壳蛋鸡产蛋性能的影响被引量：14
- 2002年
- 目的 :观察猪粪饲养的蝇蛆替代国产鱼粉作饲料对海兰棕壳蛋鸡产蛋性能的影响。方法 :用猪粪饲养蝇蛆 ,收集 3龄鲜蛆直接替代国产鱼粉饲养 4 0周龄海兰棕壳蛋鸡 ,设不同量鲜蛆替代组和鱼粉对照组 ,观察蛋鸡的日平均产蛋率、日平均产蛋量和平均蛋重 ,记录饲料消耗量和蛋鸡死亡数 ,用SPSS统计软件分析结果。结果 :用鲜蛆蛋白半量替代饲养蛋鸡 ,蛋鸡产蛋能力优于常量国产鱼粉蛋白饲养 ,用鲜蛆等量和低于半量鱼粉蛋白量饲养蛋鸡 ,能取得与常量鱼粉蛋白相同的饲养效果。用猪粪饲养的鲜蛆直接饲养蛋鸡不会增加疫病的发生。结论 :鲜蛆饲养海兰棕壳蛋鸡的产蛋性能优于国产鱼粉 。
- 吴建伟彭文峰陈美
- 关键词：蝇科鱼粉产卵蝇蛆产蛋性能
- 家蝇黏蛋白mucin-46基因的序列分析
- 2014年
- 目的:分析和预测家蝇黏蛋白mucin-46基因及其编码蛋白的结构和特性。方法:利用EST测序技术从家蝇幼虫cDNA文库中获得家蝇黏蛋白mucin-46基因cDNA序列,采用美国国家生物技术信息中心(NCBI)、瑞士生物信息学研究所的蛋白分析专家系统(Expasy)中的相关工具,对该基因及其编码蛋白的基本理化性质、疏水性、信号肽、二级结构和亚细胞定位等方面进行预测和分析。结果:家蝇黏蛋白mucin-46基因的cDNA序列具有完整的开放阅读框(ORF),全长1 383 bp,编码460个氨基酸;其编码的蛋白质理论分子量为46.42 kDa,等电点4.13;无信号肽及跨膜区,属于亲水性蛋白,具有4个几丁质结合功能域,含有4个糖基化位点及多个蛋白磷酸化作用位点;二级结构β折叠(E)和无规则卷曲(L)的比例是14.13∶85.87,没有α螺旋(H)结构类型;主要分布于细胞核。结论:应用生物信息学方法从家蝇cDNA文库中筛选出了家蝇黏蛋白mucin-46基因序列并预测了其结构及功能等生物学信息,为进一步研究家蝇围食膜蛋白的功能奠定了一定的基础。
- 裘学丽国果吴沁怡赵学军付萍张勇吴建伟
- 关键词：家蝇黏蛋白
- 家蝇GAPDH基因的克隆、表达及作为内参的可靠性分析被引量：6
- 2016年
- 目的探讨家蝇甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)基因在不同饲料饲养、不同发育期及不同组织的转录和表达情况,评价其作为家蝇功能基因研究内参的稳定性。方法运用PCR技术扩增GAPDH基因完整编码序列,生物信息学方法预测该基因及其编码蛋白功能。构建pET-28a(+)-GAPDH重组质粒,转化到大肠埃希菌Transetta(DE3)中进行诱导表达,纯化重组蛋白制备多克隆抗体。运用Real-time PCR和Western blot检测家蝇不同发育期、三龄幼虫不同组织和不同饲养物处理下GAPDH基因的表达情况。结果家蝇GAPDH基因ORF全长999bp,编码332个氨基酸,理论分子质量37.3ku,等电点为8.57,具有GAPDH家族的蛋白保守结构域;构建的重组质粒经PCR及测序鉴定正确;SDS-PAGE分析显示重组质粒在Transetta(DE3)中表达,纯化后的表达产物与目的蛋白大小相符,Western blot显示该蛋白可被相应血清识别;Real-time PCR分析GAPDH基因在不同饲料饲养3龄幼虫、不同发育期均保持较好的转录稳定性,同时,Western blot分析GAPDH分子在家蝇不同发育期及3龄幼虫不同组织中均有表达,且表达量无明显差别。结论 GAPDH基因在不同发育期、不同组织及不同饲养物饲养的家蝇表达稳定,可作为家蝇可靠性内参基因使用。
- 胡红元任春丽尚小丽陈明明王宇王涛吴建伟
- 关键词：家蝇克隆表达内参基因
