周泷
- 作品数:11 被引量:6H指数:1
- 供职机构:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金哈尔滨市科技创新人才研究专项资金更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 副猪嗜血杆菌种特异性基因的筛选与鉴定
- 2014年
- 为筛选副猪嗜血杆菌(HPS)种特异性的基因,采用抑制消减杂交(SSH)技术,以HPS DNA为Tester,以猪胸膜肺炎放线杆菌(APP)DNA为Driver,通过2轮消减杂交和2次PCR扩增,将第2次PCR产物连接pMD19-T载体,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,筛选阳性克隆后测序,经Southern Blot验证和BLAST分析,获得6个HPS特异基因片段。研究为建立副猪嗜血杆菌基因鉴别诊断方法及ELISA抗原靶标的鉴定奠定基础。
- 李继昌崔宁刘娇周泷张艳禾谢芳李刚牛惠王春来
- 关键词:副猪嗜血杆菌抑制消减杂交
- 胸膜肺炎放线杆菌血清7型S8ΔclpP/ΔapxⅡC/Δfur三基因缺失弱毒株的构建及生物学特性研究
- 胸膜肺炎放线杆菌(APP)是引起猪传染性胸膜肺炎的一种重要病原菌.为进一步致弱其毒力,制备基因缺失弱毒疫苗,本研究以本实验室构建的APP血清7型S8菌株双基因缺失株S8△clpP/△apxⅡC为亲本株,通过同源重组和蔗糖...
- 周泷谢芳刘娇崔宁李艳玲牛惠李刚张艳禾王春来
- 关键词:胸膜肺炎放线杆菌
- 文献传递
- 副猪嗜血杆菌细胞致死膨胀毒素CDT各亚基功能研究
- 副猪嗜血杆菌(Haemophilusparasuis,H.arasuis)是猪革拉瑟氏病的病原菌,该病以猪多发性浆膜炎和脑膜炎为主要特征.细胞致死膨胀毒素(Cytolethal Distending Toxins, CD...
- 李艳玲李建军张艳禾周泷崔宁刘娇李刚谢芳王春来
- 猪胸膜肺炎放线杆菌ClpP蛋白酶基因缺失株的构建及其生物学活性
- 本研究构建clpP基因缺失的胸膜肺炎放线杆菌突变株,采用结晶紫染色法和荧光显微镜观察比较c1pP基因缺失株和APP亲本株的生物被膜形成能力。结果成功筛选获得一株c1pP基因缺失的胸膜肺炎放线杆菌突变株,通过对突变株生物学...
- 谢芳周泷张艳禾李刚王春来
- 关键词:猪胸膜肺炎放线杆菌基因缺失生物学活性
- 文献传递
- 副猪嗜血杆菌细胞致死膨胀毒素对细胞毒性机制的研究
- <正>副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,H.parasuis)是引起剐猪嗜血杆菌病的病原,该病主要表现为多发性浆膜炎、关节炎及脑腆炎。细胞致死膨胀毒素(Cytolethal distending t...
- 牛惠李艳玲周泷李大鹏张艳禾李刚谢芳王春来
- 关键词:副猪嗜血杆菌细胞毒性分子机制
- 文献传递
- 胸膜肺炎放线杆菌血清7型S8ΔclpP/ΔapxⅡC/Δfur三基因缺失弱毒株的构建及生物学特性研究被引量:1
- 2014年
- 为进一步致弱胸膜肺炎放线杆菌(APP)毒力,制备基因缺失弱毒疫苗,本研究以本实验室构建的APP血清7型S8菌株双基因缺失株S8ΔclpP/ΔapxⅡC为亲本株,通过同源重组和蔗糖负向筛选的方法,再将铁摄取调节基因fur缺失,构建了无抗生素标记的三基因缺失突变株S8ΔclpP/ΔapxⅡC/Δfur。生物学特性研究表明,该缺失株与野生株S8相比,体外生长速度未发生明显变化,但溶血能力显著下降,与亲本株相比,铁摄取利用轻微降低。致病力试验结果表明,仔猪经气管接种该缺失株毒力显著低于野生型菌株,并且1×109cfu/mL剂量对猪不产生明显的呼吸道症状和肺部病变,表明该缺失株高度安全,可以作为APP基因缺失弱毒活疫苗的候选株。
- 周泷谢芳刘娇崔宁李艳玲牛惠李刚张艳禾王春来
- 关键词:胸膜肺炎放线杆菌基因缺失致弱
- 猪胸膜肺炎放线杆菌ClpP蛋白酶基因缺失株的构建及其生物学活性
- 谢芳周泷张艳禾李刚王春来
- 副猪嗜血杆菌细胞致死膨胀毒素CdtC亚基的克隆表达及细胞毒性分析被引量:2
- 2013年
- 细胞致死膨胀毒素(CDT)由CdtA、CdtB和CdtC三个亚基构成,是细菌的一种重要毒力因子。为研究副猪嗜血杆菌(H.parasuis)CDT的CdtC亚基的功能,本研究根据G enBank中cdtC基因序列设计引物,扩增cdtC基因,并克隆到原核表达载体pET-28a(+)中进行诱导表达。SD S-PAGE和w estern blot检测目的蛋白主要以包涵体形式存在,分子量约为25 ku。将纯化后的重组蛋白复性后进行体外细胞毒性试验。结果表明,CdtC蛋白对Vero细胞和PK-15细胞有较强的细胞毒性作用。本研究为研究细胞致死膨胀毒素CDT的致病机制奠定了基础。
- 李艳玲李建军周泷崔宁刘娇张艳禾李刚谢芳王春来
- 关键词:副猪嗜血杆菌细胞毒性
- 胸膜肺炎放线杆菌血清7型S8△clpP/△apxⅡC/△fur三基因缺失弱毒株的构建及保护效力评价
- 猪传染性胸膜肺炎(Porcine Contagious Pleuropneumonia, PCP)是由胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae, APP)引起的一种猪的呼吸道疾病,...
- 周泷
- 关键词:胸膜肺炎放线杆菌基因缺失保护效力
- 文献传递
- 副猪嗜血杆菌自转运三聚体VtaA1蛋白的表达及其免疫保护效力研究被引量:1
- 2014年
- 为鉴定副猪嗜血杆菌(HPS)自转运三聚体VtaA1蛋白免疫保护效率,本研究以血清5型HPS株基因组为模板,通过PCR方法扩增VtaA1编码基因的N-端、C-端和中间区段,并将各基因片段克隆于表达载体pET-28a(+)中构建重组表达质粒pET-VtaA1N、pET-VtaA1C和pET-VtaA1M,将重组质粒分别转化到E.coli BL21(DE3)感受态中,在22℃和37℃条件下经IPTG诱导表达,目的蛋白均以包涵体形式存在。VtaA1M和VtaA1C用亲和层析纯化,但VtaA1N无法纯化。将纯化后的VtaA1M和VtaA1C分别免疫5周龄昆明小鼠并制备免疫血清,ELISA检测结果显示VtaA1M和VtaA1C血清效价分别在1∶105和1∶404以上,表明VtaA1M和VtaA1C具有良好的免疫原性。免疫的小鼠分别用HPS血清5型分离株攻毒,结果显示VtaA1M和VtaA1C免疫的小鼠对该强毒株的攻击均能够提供60%的保护,表明VtaA1M和VtaA1C可以作为亚单位疫苗的有效成分。
- 刘娇崔宁周泷牛慧张艳禾李刚谢芳唐月敏倪宏波王春来
- 关键词:副猪嗜血杆菌原核表达免疫保护