姚潇
- 作品数：28 被引量：89H指数：4
- 供职机构：陕西师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学文化科学更多>>
- 超声激活血卟啉对SW-480癌细胞的杀伤作用被引量：11
- 2003年
- 采用1.1MHz,0.9W/cm2低强度超声,结合血卟啉对体外培养的人肿瘤细胞SW-480进行声照处理,通过噻唑蓝(MTT)法、PI,HO双荧光染色等方法,根据癌细胞形态结构和功能的变化,探讨超声激活血卟啉对肿瘤细胞的杀伤作用。结果表明:血卟啉对癌细胞无明显的损伤,超声加血卟啉处理30s是引起SW-480细胞受损的敏感位点,90s为杀伤癌细胞的优选时间段;杀伤作用呈癌细胞显微结构逐步破坏的变化,并随声照时间的延长而加剧;声照时间在30s至90s区间细胞具有明显凋亡特征,提示超声激活血卟啉杀伤癌细胞机制中可能存在诱导肿瘤细胞凋亡的作用。
- 刘全宏张坤张凤月齐浩尚志远姚潇
- 关键词：血卟啉杀伤作用超声光敏剂声动力学疗法肿瘤治疗
- CPP32研究进展被引量：2
- 1998年
- CPP32是一个由277个氨基酸组成分子量约为32KD的蛋白酶。编码CPP32的基因有α、β两种形式,但两种基因形式编码的蛋白酶在功能上相同。CPP32与细胞凋亡密切相关。在蛋白酶级联切割的凋亡过程中,CPP32处于核心位置,可能起非常重要作用。上游蛋白酶对其进行切割加工,使其活化;活化的CPP32又切割加工下游底物,导致细胞凋亡。
- 姚潇叶棋浓袁仕取
- 关键词：细胞凋亡蛋白酶
- 志贺菌福氏2a入侵上皮细胞诱导表达的毒力相关基因筛选与鉴定被引量：1
- 2004年
- 采用体内表达技术的研究策略筛选了志贺菌福氏2a侵入上皮细胞后诱导表达的基因,用基因突变技术进一步对它们的功能进行了鉴定.结果共筛选到13个胞内诱导基因,其中2个DNA甲基化相关基因、1个代谢相关基因、1个转录调控基因、3个插入成分、3个反义转录体、3个未知功能基因.突变体分析发现,3-甲基糖基化酶 ,柠檬酸裂合酶的编码基因和未知功能基因wcaJ的突变体在细胞和动物感染实验中都显示其存活增殖能力的降低,表明这些基因可能参与了志贺菌在上皮细胞内的存活和增殖.同时也表明,这种在上皮细胞内的存活增殖能力是志贺菌主要的毒力体现之一.但是,未知功能基因yaiC的突变体只在动物体内表现出明显的毒力缺陷,在上皮细胞内没有明显的增殖缺陷,这表明yaiC基因参与其他毒力作用机制.研究结果对深入认识志贺菌的致病机理有重要意义.
- 史兆兴王恒樑胡堃冯尔玲姚潇黄留玉苏国富黄培堂黄翠芬
- 关键词：毒力相关基因基因筛选基因鉴定痢疾
- 肿瘤细胞株中新型Gsα缺失突变体与CPP32的相互作用被引量：1
- 1998年
- 蛋白酶尤其是ＩＣＥ家族的蛋白酶是细胞死亡机制的核心成分。ＩＣＥ蛋白酶家族中，ＣＰＰ３２（又称Ｙａｍａ，Ａｐｏｐａｉｎ）在不同形式的凋亡途径中起核心作用，可引起包括肿瘤细胞在内的细胞凋亡。目前发现，ＣＰＰ３２可切割多种底物，如ＰＡＲＰ、Ｕ１－７０ｋ、Ｄ...
- 叶棋浓姚潇王恒梁王恒梁黄翠芬苏国富
- 关键词：肿瘤细胞株细胞凋亡突变体CPP32
- 一种体内研究病原体致病机理的新方法——信号标签诱变技术被引量：1
- 2002年
- 信号标签诱变技术是以整个基因组为基础的研究病原体致病机制,可在体内对毒力基因进行高通量筛选的一种新方法。近几年应用该技术已对十多种病原微生物进行了筛选。这些筛选中除了找到已知的毒力基因外,还都鉴定到了未知的毒力因子。本文就该技术的原理、优缺点、应用的必要条件、技术的改进及应用该技术鉴定到的毒力基因等作一综述。
- 姚潇黄留玉杨伯伦苏国富
- 关键词：病原体致病机理毒力基因
- 白血病细胞中新型G_sα缺失体与CPP32的相互作用(英文)被引量：1
- 1998年
- CPP32/Yama/Apopain/Caspase-3在不同形式的细胞凋亡途径中起核心作用。目前发现,CPP32可切割多种底物,但以CPP32为引诱蛋白用酵母双杂交系统分离与其相互作用的分子方面的研究,在国内外尚未见报道。为进一步了解肿瘤细胞信号转导途径,本文用该系统筛选与CPP32(作为引诱蛋白)相互作用的蛋白质。将CPP32引诱蛋白表达载体和肿瘤细胞文库质粒导入到酵母细胞HF7C中,用Trp-Leu-His-营养缺陷培养基初步筛选文库中插入cDNA所编码的序列与CPP32相互作用的菌落,再进一步检测β-半乳糖苷酶活性,结果从200多个Trp^+Leu^+His^+酵母菌落中获得7个LacZ^+阳性的酵母菌落。经分离阳性菌中的文库质粒和序列分析发现,在人白血病细胞株Jurkat中,新型G_sα缺失体(其正常蛋白与腺苷酸环化酶信号转导途径的激活相关)可与CPP32相互作用。纯化大肠杆菌中表达的G_sα缺失体及CPP32,用ELISA法进一步证实了这种相互作用。结论推测白血病细胞(至少某种白血病细胞)中CPP32参与了腺苷酸环化酶信号转导途径。
- 叶棋浓姚潇王恒梁张述逯好英苏国富黄翠芬周廷冲
- 关键词：CPP32白血病细胞细胞凋亡
- 人白血病细胞株中G_(sα)转录物的新型异常剪接被引量：1
- 1998年
- Gsα是与激活腺苷酸环化酶信号转导途径相关的蛋白质 .不同的Gsα mRNA是由不同形式的剪接或利用不同的启动子产生的 .报道人白血病细胞株中Gsα转录物的一种新型异常剪接 .以来自Jurkat细胞株的人白血病文库cDNA及人白血病细胞株HL_6 0mRNA反转录后的cDNA第一链为模板 ,PCR扩增出Gsα基因完整编码区 (命名为GsαLeu) .DNA序列分析表明 ,GsαLeu与正常Gsα相比有 2个区域发生不改变阅读框架的缺失 ,一个位于正常Gsα第 2 3个氨基酸与第 2 49个氨基酸之间 ,另一个位于第 2 5 4个氨基酸与第 2 6 0个氨基酸之间 ,GsαLeu的这种结构提示其在白血病中起着重要的作用 .将GsαLeu完整编码区插入pGEX_2T融合蛋白表达载体的凝血酶位点下游 ,高效表达了GST/GsαLeu融合蛋白 ,表达产物经亲和层析 ,一步获得了电泳纯的GST/GsαLeu,为进一步研究GsαLeu的功能打下了基础 .
- 叶棋浓姚潇王恒梁张述刘怀田苏国富黄翠芬周廷冲
- 关键词：剪接PCR白血病细胞株
- 用酵母双杂交系统筛选与痢疾杆菌侵袭素IpaC相互作用的蛋白被引量：5
- 2004年
- 利用酵母双杂交技术筛选与IpaC相互作用的真核细胞蛋白。首先将IpaC全长基因克隆到诱饵蛋白载体pGBKT7中 ,以构建的pGBKT IpaC为靶蛋白质粒 ,筛选人HeLa细胞cDNA文库。在 2× 10 6个克隆中得到 2 2个阳性克隆。其中 2个阳性克隆编码人胶原酶蛋白片段。并且进一步证明与胶原酶片段相互作用的IpaC结构域在 6 2aa～ 170aa之间。提示IpaC可能在胶原酶参与的生物学过程中发挥作用。
- 阎晓宇姚潇王恒樑冯尔玲史兆兴苏国富游松黄留玉
- 关键词：痢疾杆菌酵母双杂交系统IPAC胶原酶
- 表达CtxB的非抗生素标记载体的构建
- 2001年
- 目的构建用于表达CtxB的非抗生素基因作为选择标记的载体。方法用PCR从质粒pMT999中,扩增获得2.9kb的汞抗性基因与pBR322的复制起始区ori相连得到重组质粒pBRH02。然后将含有β-内酰胺酶启动子的CtxB基因插入pBRH02中,构建表达质粒pBRC09。结果pBRC09经转化大肠杆菌、痢疾杆菌,用GM1-ELISA均检测到CtxB在上述菌株中的有效表达。结论利用汞抗性基因和pBR322的复制起始区,成功地构建成以非抗生素为选择标记的表达CtxB的重组质粒。
- 王恒樑冯尔玲刘梅廖翔史兆兴姚潇黄留玉苏国富
- 关键词：霍乱毒素
- 痢疾菌体内诱导基因表达文库的构建被引量：1
- 2001年
- 目的构建筛选痢疾菌福氏2a体内诱导基因的融合基因表达文库。方法以自杀载体pGP704为骨架,用氯霉素乙酰转移酶基因作为报告基因,构建了用于筛选体内诱导基因的载体pGP-cat。把痢疾菌福氏2a基因组DNA的随机酶切片段0.6-1kb亚克隆到pGPcat载体报告基因上游的BglⅡ位点,构建了融合基因文库。结果与痢疾菌福氏2a2457T结合转移后,获得融合基因表达文库。以氯霉素为选择标记,经过体外初步筛选,得到3.2%的具有氯霉素抗性的菌株。结论构建的融合基因表达文库适用于筛选福氏2a痢疾菌的体内诱导基因。
- 史兆兴王恒樑冯尔玲姚潇廖翔黄留玉苏国富黄翠芬
