张雅坤
- 作品数：5 被引量：10H指数：2
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- 相关领域：生物学医药卫生天文地球更多>>
- 人源基因载体pHrn介导p53基因在Bel-7402中的抗癌研究(英文)被引量：2
- 2007年
- 利用人源基因载体结合人巨细胞病毒(CMV)增强子,人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)启动子及肿瘤抑制基因p53构建肿瘤抑制载体,研究它们在肝癌细胞株Bel-7402中的功能.将CMV增强子(CMVe)与肿瘤特异性启动子hTERTp组合,分别结合GFP及精氨酸型和脯氨酸型肿瘤抑制基因p53,构建GFP表达载体pchEGFP以及p53表达载体pchp53Arg和pchp53Pro;脂质体2000转染肝癌细胞株Bel-7402;24h后利用荧光显微镜以及流式细胞仪检测GFP的表达;RT-PCR、蛋白质印迹检测p53基因的表达;利用Hoechst33258、Annexin V/PI染色,检测p53促使肿瘤细胞的促凋亡情况.结果表明:GFP荧光表达载体在Bel-7402细胞中能有效表达;RT-PCR及蛋白质印迹检测到精氨酸型和脯氨酸型p53基因在Bel-7402细胞内表达;Hoechst33258染色及Annexin V/PI染色检测细胞凋亡实验没有得到明显的细胞凋亡结果.结果表明:实验所构建的肿瘤抑制载体在肝癌细胞Bel-7402能有表达,并能形成外源性p53蛋白,但没有检测到明显的p53促使肝癌细胞调亡的结果.这可能与p53对hTERT的负调控作用有关.
- 薛志刚李剑尹彪张雅坤刘雄昊潘乾龙志高戴和平夏昆邬玲仟梁德生夏家辉
- 关键词：P53
- 一种基于单台站地震观测数据的重复地震识别方法
- 本发明公开了一种基于单台站地震观测数据的重复地震识别方法，属于重复地震识别技术领域，包括：获取模板地震、台站和连续波形数据；使用多段互相关方法计算多段互相关系数，筛选潜在的重复地震事件；计算模板地震事件与潜在的重复地震事...
- 高大维 侯新荣郭振威 江世宇 聂子婷王旭张雅坤
- 人源基因载体和自体成肌细胞介导DMD基因治疗的初步研究
- 杜氏肌营养不良(DMD)是一种严重的X连锁隐性遗传的致死性疾病。其发病机制是由于DMD基因的突变导致dystrophin蛋白缺失或功能丧失所致。至今临床上尚无有效的方法治疗DMD，基因治疗的兴起，为从根本上彻底治疗该病带...
- 张雅坤
- 关键词：DMD基因基因转移杜氏肌营养不良成肌细胞遗传性疾病
- 增强型自杀基因载体治疗宫颈癌的体外实验研究被引量：8
- 2006年
- 目的探讨运用增强子增强hTERT启动子转录活性后,调控双自杀融合基因CDTK载体对人宫颈癌HeLa细胞的体外杀伤作用。方法将SV40增强子、CMV增强子、CMV增强子/启动子及SV40-CMV双增强子分别与hTERT启动子组合构建成报告基因载体,转染HeLa细胞后用双荧光素酶系统分析其活性差异;然后构建pHr-SCT/CDTKG治疗载体转染HeLa细胞,用流式细胞仪检测转染效率,RT-PCR检测融合自杀基因mRNA表达,HPLC检测5-FU浓度,MTT分析载体杀瘤的效果。结果HeLa细胞中增强子能使hTERT启动子活性提高6～13倍,其中SV40-CMV双增强子/hTERT启动子的活性最高,达到CMV增强子/启动子的近3倍;体外转染pHr-SCT/CDTKG后可检测到CDTK的mRNA的表达;细胞上清中5-FU最高浓度为50.83ug/mL;当5-FC浓度为200ug/mL、GCV浓度为10ug/mL时,HeLa细胞的相对细胞存活率为48.7%。结论SV40-CMV双增强子联合hTERT启动子能高效靶向的调控CDTK融合自杀基因杀伤宫颈癌细胞,因而是一种很有前景的基因治疗宫颈癌的策略。
- 王丽娜张雅坤周银李剑尹彪李琼潘乾薛志刚夏昆梁德生夏家辉
- 关键词：HTERT启动子增强子基因治疗宫颈癌
- 基于深度学习和DTW计算地震相对旅行时差方法
- 本发明公开了一种基于深度学习和DTW计算地震相对旅行时差方法，属于地震信号处理技术领域，包括获取需要进行相对旅行时差计算的地震数据，并利用Obspy等地震学软件对其进行预处理。同时生成PhaseNet所需要的输入文件；将...
- 高大维聂子婷郭振威王博琛侯新荣江世宇张雅坤王旭郝林波
