徐威
- 作品数：83 被引量：338H指数：9
- 供职机构：沈阳药科大学更多>>
- 发文基金：辽宁省高校创新团队支持计划国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学化学工程更多>>
- 噻唑并[3,2-b]-1,2,4-三嗪-2-羧酸衍生物及其制备方法和应用
- 本发明属于医药技术领域，涉及噻唑并[3,2‑<I>b</I>]‑1,2,4‑三嗪‑2‑羧酸衍生物及其制备方法和在制备抗菌药中的应用。公开了一种高收率、低成本的噻唑并[3,2‑<I>b</I>]‑1,2,4‑三嗪类衍生物的...
- 胡春蔡东金辄杜月刘晓平徐威徐赫男黄二芳
- 文献传递
- 5‑（取代亚苄基氨基）‑4‑取代苯基异恶唑‑3‑羧酸乙酯衍生物的制备方法
- 本发明公开了一种具有抗菌活性的5‑（取代亚苄基氨基）‑4‑取代苯基异恶唑‑3‑羧酸乙酯衍生物的制备方法。本发明的化合物具有如下结构通式的化合物及其该类化合物的立体异构体和药学上适用的盐。本发明还公开了5‑（取代亚苄基氨基...
- 徐威陈羽仉蕊
- 文献传递
- 透明颤菌血红蛋白基因在生黑葡萄糖酸杆菌中的克隆与表达
- 2016年
- 目的在生黑葡萄糖酸杆菌中克隆并表达透明颤菌血红蛋白基因(Vitreoscilla Hemoglobin gene,vgb)。方法构建重组质粒p UC19-vgb并电转化生黑葡萄糖酸杆菌。采用十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfonate,SDS)-聚丙烯酰胺凝胶电泳和一氧化碳(carbon monoxide,CO)-示差光谱进行血红蛋白表达和生物活性测定。结果 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳显示有大量与目的蛋白大小相当(约15 ku)的蛋白表达。CO-示差光谱在420 nm处有一吸收峰,显示重组质粒p UC19-vgb成功转化入生黑葡萄糖酸杆菌,并表达具有生物活性的透明颤菌血红蛋白(Vitreoscilla Hemoglobin,VHb)。结论成功构建vgb重组质粒,并实现在生黑葡萄糖酸杆菌中表达VHb。
- 陈羽徐威刘华松位星张世野
- 关键词：透明颤菌血红蛋白
- 1株产α-糖苷酶抑制剂放线菌的筛选与鉴定被引量：2
- 2017年
- 利用酶的催化特性从520株土壤分离放线菌中筛选对α-淀粉酶和α-蔗糖酶均具有抑制作用的产α-糖苷酶抑制剂菌株,并对其进行菌株归属鉴定。试验结果表明:从土壤分离放线菌中筛选到对α-淀粉酶酶活力抑制率在75%以上的菌株45株,从这45株放线菌中筛选到1株对α-蔗糖酶抑制率在40%以上的菌株。通过对其进行形态学观察、生理生化特性鉴别,并结合16S rRNA基因序列分析,初步判定该菌株为天蓝色链霉菌Streptomyces coelicolo。
- 刘华松陈羽戴伟巧陈一鸣赵晓云徐威
- 关键词：Α-淀粉酶放线菌抑制剂
- 人肝癌细胞中原癌基因Pokemon上调Shp2的表达被引量：1
- 2012年
- 目的研究人肝癌细胞中Pokemon对Shp2表达的影响。方法通过RT-PCR、Real time PCR和Western blot方法检测人肝癌细胞系QGY-7703和人正常肝细胞系HL-7702中Pokemon和Shp2的mRNA和蛋白表达水平差异;并通过瞬时转染si-Pokemon RNA沉默QGY-7703细胞中Pokemon使其低表达,再检测Shp2的mRNA和蛋白水平变化。结果 Pokemon在人肝癌细胞系QGY-7703中的表达水平高于人正常肝细胞系HL-7702,Shp2的表达水平高低与Pokemon表达一致;在QGY-7703细胞中沉默Pokemon表达之后,Shp2的表达也相应降低。结论原癌基因Pokemon作为一种转录因子,可能调控Shp2的表达。
- 金秀丽孙钦升杨红伟刘峰蒋宇扬徐威
- 关键词：POKEMON肝癌原癌基因
- H7N9流感病毒血凝素HA在毕赤酵母中的表达及免疫原性分析被引量：6
- 2015年
- 目的利用毕赤酵母表达制备H7N9流感病毒血凝素[HA 1-525个氨基酸（aa）],并对其免疫原性进行研究。方法经全基因合成获得H7N9流感病毒[A/Hangzhou/1/2013（H7N9）]全长HA,以其为模板,PCR得到片段HA^1-525,通过NspⅤ和NotⅠ双酶切连入pPICZαA载体,转入毕赤酵母X33,ELISA筛选阳性克隆。发酵培养后,表达上清经PEG20000沉淀获取HA^1-525,并用糖苷内切酶H（endo H）酶切分析其N-糖链。将制备的HA^1-525免疫BALB/c小鼠,经ELISA检测特异性HA7抗体滴度,红细胞凝集抑制实验分析血抑活性。结果培养上清用抗HA7抗体经ELISA检测,重组菌成功表达HA7,且Western印迹检测发现有特异性弥散条带,经endo H酶切后,HA^1-525为均一条带,相对分子质量约58×10^3,与理论大小相当,表明HA^1-525存在甘露糖基化结构。HA^1-525两次免疫小鼠后可产生1∶36 000的抗体滴度。以H7N9裂解苗为抗原,检测其血抑活性为1∶700。结论利用毕赤酵母表达的H7N9流感病毒HA1-525可以诱导小鼠产生针对HA7的中和抗体。
- 王莎唱韶红刘波巩新徐威吴军
- 关键词：血凝素类毕赤酵母
- 应用高速逆流色谱法分离茎点霉属真菌代谢物中脂肪酸成份的研究被引量：3
- 2010年
- 利用高速逆流色谱对一株茎点霉属内生真菌的代谢物质脂肪酸部分进行了分离。采用的两相溶剂系统为正庚烷:乙酸乙酯:甲醇:水=8.5:1:8.5:1,上相做固定相,下相做流动相。分离得到三个脂肪酸组分A5、A6、A7,经高效液相分析,纯度都在99%以上,其回收率分别为96.3%、93.5%,94.8%。经EI-MS、1H-NMR测定,确定A5为硬脂酸,A6为油酸,A7为亚油酸。
- 王志强杨志钧陈代杰徐威
- 关键词：高速逆流色谱脂肪酸
- 透明颤菌血红蛋白基因在产黄顶孢霉中的整合表达
- 氧传递直接或间接影响着需氧生物的初级代谢和次级代谢,作为次级代谢产物抗生素的生物合成对培养环境中氧的供应相当敏感。在抗生素发酵中由于液相介质中氧的低溶解度和菌丝体的高粘性,常导致溶氧不足,造成抗生素产量的降低。VHb的研...
- 徐威曹栋蒲静张成刚陈林生
- 文献传递
- 利用电转化和三亲杂交方法高效转化根癌农杆菌被引量：4
- 2003年
- 目的探索根癌农杆菌的高效转化方法。方法考察质粒经电击转化法转化根癌农杆菌 (A grobacteriumtumefaciensLBA440 4)的影响因素 ,并优化其转化条件 ;研究采用三亲杂交方法 ,将带有vgb基因簇的重组质粒 pYG3 0 8导入A .tumefaciensLBA440 4;经PCR扩增反应进行验证。 结果外加电场强度和脉冲时间是决定电转化效率的关键因素 ,两者适当组合才可获得高转化效率 ;采用对数期中期的细菌和提高细菌浓度均可提高转化效率。用三亲杂交方法转化A .tumefaciensLBA440 4,可得到较高的转化效率。所获抗性转化子的质粒DNA酶切图谱正确。结论带有双元载体 (含vgb基因 )
- 徐威朱春宝朱宝泉姚新生
- 关键词：电击转化基因转移多聚酶链式反应
- 草分枝杆菌亮氨酰-tRNA合成酶的克隆与表达
- 2016年
- 采用PCR技术从草分枝杆菌(Mycobacterium phlei)基因组中扩增出亮氨酰-t RNA合成酶基因leu RS,依次克隆入p MD19-T Simple克隆载体及p ET28a(+)表达载体,并在大肠埃希菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中表达。表达产物用Ni^(2+)螯合的His Trap^(TM) HP亲和色谱纯化,测定纯化所得目的蛋白的酶活力。结果显示,经PCR扩增得到2.8 kb的DNA片段,重组质粒p ET28a(+)-leu RS经酶切鉴定和测序分析,表明构建正确。SDS-PAGE显示,有与目的蛋白大小相当(相对分子质量约1.10×10~5)的蛋白质表达,表达的重组蛋白占菌体可溶性蛋白的32.8%,纯化后的蛋白质纯度达93.8%,酶活力为13.2 u/ml。
- 仉蕊陈羽刘华松徐威
- 关键词：亮氨酰-TRNA合成酶草分枝杆菌纯化
