2025年3月27日
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徐红娜
作品数:
4
被引量:1
H指数:1
供职机构:
浙江大学
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
生物学
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合作作者
于洪巍
浙江大学化学工程与生物工程学系...
王博
浙江大学
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E.COLI
机构
4篇
浙江大学
作者
4篇
徐红娜
3篇
于洪巍
2篇
王博
传媒
1篇
浙江大学学报...
年份
1篇
2015
2篇
2013
1篇
2011
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一种酶羟化3β-胆固醇乙酸酯制备7β-羟基-3β胆固醇乙酸酯的方法
本发明涉及一种制备7β-羟基-3β胆固醇乙酸酯的方法,尤其涉及了一种酶羟化3β-胆固醇乙酸酯制备7β-羟基-3β胆固醇乙酸酯的方法,包括下列步骤:将化合物3β-胆固醇乙酸酯溶解于助溶剂中,将溶解后的3β-胆固醇乙酸酯溶液...
于洪巍
王博
徐红娜
文献传递
一种酶羟化3β-胆固醇乙酸酯制备7β-羟基-3β胆固醇乙酸酯的方法
本发明涉及一种制备7β-羟基-3β胆固醇乙酸酯的方法,尤其涉及了一种酶羟化3β-胆固醇乙酸酯制备7β-羟基-3β胆固醇乙酸酯的方法,包括下列步骤:将化合物3β-胆固醇乙酸酯溶解于助溶剂中,将溶解后的3β-胆固醇乙酸酯溶液...
于洪巍
王博
徐红娜
文献传递
羧酸酯酶BioH的克隆表达及其水解活性的定向进化
2013年
通过分子克隆手段获得大肠杆菌来源的羧酸酯酶BioH,采用定向进化的方法提高该酶的水解活性以提升其应用价值.通过PCR扩增,从大肠杆菌K12菌株中克隆得到羧酸酯酶BioH基因,目的基因长度为771bp,含256个氨基酸;将其连接到pET30a(+)质粒上并转入BL21(DE3)宿主细胞中,经诱导表达得到所需的目的蛋白,该蛋白分子质量约为28.2ku.野生型的BioH水解对硝基苯丁酸酯(P—NPB)的活性为18U/mg,且该酶具有良好的热稳定性.以PNPB为底物进行高通量筛选,其水解底物为对硝基苯酚(PNP),在405nm处有最大吸收峰.挑选出水解活性提高的突变体,并通过2轮定向进化过程,成功筛选到7个水解活性提高的优良突变体,它们的活性分别提高了20%~100%.结构分析表明,突变体的突变位点均分布在远离活性中心的位置.
徐红娜
于洪巍
关键词:
克隆
定向进化
水解活性
利用定向进化提高羧酸酯酶E.coli BioH水解活性和酰化活性的研究
羧酸酯酶(EC3.1.1.1),是指主要催化水解羧基类化合物的一类酯酶,已有的研究表明,E.coli羧酸酯酶BioH在大肠杆菌生物素合成途径中起到了非常重要的作用。从大肠杆菌K12菌株中克隆得到羧酸酯酶BioH,测得野生...
徐红娜
关键词:
羧酸酯酶
定向进化
水解活性
高通量筛选
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