曲莉
- 作品数：2 被引量：8H指数：2
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院基础医学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人Man2c1转基因小鼠模型的建立被引量：4
- 2006年
- 目的为在体内研究MAN2C1的生物学意义而建立转hMan2c1基因的小鼠。方法构建pIRES2-EGFP-hMan2c1重组表达载体,经体外转染实验鉴定转染的基因能在COS-7细胞表达后,注射入ICR小鼠受精卵,以制备转基因小鼠。用基因组PCR鉴定目的基因在宿主基因组DNA的整合。用RT-PCR和Western blot分析hMan2c1在转基因小鼠的表达。结果在116只原代小鼠中,有7只hMan2cl基因组PCR阳性。在所检测的20只F1代小鼠中,有9只hMan2c1基因组PCR阳性。在所检测的21只F2代小鼠中,有16只基因组PCR阳性。用鼠尾组织RT-PCR和Western blot检测hMan2c1基因表达,确定基因组PCR阳性的7个系中有4个系阳性。结论建立了4个稳定表达hMan2c1的转基因小鼠系,为深入研究MAN2C1的生物学意义打下了基础。
- 向志光蒋东东曲莉鞠吉雨周异群田云刘音张连峰朱立平
- 关键词：转基因小鼠
- 6A8α-甘露糖苷酶表达抑制使Jurkat细胞间的黏附性增强被引量：5
- 2004年
- 目的 探讨 6A8α 甘露糖苷酶表达抑制对人T淋巴母细胞Jurkat生物学行为的影响。方法 采用反义核酸技术抑制细胞中 6A8α 甘露糖苷酶的表达。用PCR检测转导基因在基因组中的整合。用单抗 6A8作探针 ,Western印迹和免疫荧光染色流式细胞术检测细胞中 6A8α 甘露糖苷酶的表达状况。用ConA结合试验检测细胞蛋白质的糖基化改变。普通光学显微镜观察细胞的形态。用DNA芯片技术分析AS细胞和M细胞mRNA表达的差异。用RT PCR和免疫荧光染色流式细胞术验证基因芯片结果的可靠性。结果 制备了 6A8α 甘露糖苷酶表达抑制的Jurkat细胞 (AS)。与对照细胞 (野生型细胞W和转导空载体的细胞M)相比 ,AS细胞在培养中黏附成大团块。DNA芯片分析见与M细胞相比 ,AS细胞中有 19个基因的表达上调 ,2 0个基因的表达下调。上调的基因中有一些与细胞间黏附相关 ,如CD5 4、CD11a、CD2 4、CD82、整合素αX、整合素α7、整合素αE、IL 1R、IL 2Rγ和TNFSF9。RT PCR肯定了DNA芯片分析的可靠性。免疫荧光染色流式细胞术进一步肯定了CD5 4和CD11a在AS细胞表达的上调。结论 6A8α 甘露糖苷酶表达抑制使Jurkat细胞间黏附增强 ,CD5 4和CD11a等黏附分子表达的增高可能与此相关。
- 曲莉向志光史耕先刘音崔巍杨海鹏朱立平
- 关键词：JURKAT细胞黏附性糖基化
