朱智强
- 作品数：27 被引量：18H指数：2
- 供职机构：首都儿科研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金北京市中医管理局青年科学研究资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 羟基脲诱导神经管畸形小鼠模型及与其他小鼠模型的比较研究被引量：1
- 2021年
- 目的本研究拟通过干扰新的叶酸相关代谢-核苷三磷酸还原成相应的脱氧核苷三磷酸通路中的关键酶-核苷酸还原酶,诱导构建神经管畸形(NTDs)小鼠模型,并且与前期构建的NTDs小鼠模型进行比较。方法实验小鼠选用C57BL/6J小鼠,购自北京华阜康公司,雌鼠60只,雄鼠30只,小鼠年龄7~8周,体重18~20 g,常规饲养于SPF级动物房。小鼠饲养一周后,晚上18∶00按照雄雌(1∶2)进行合拢,早上分笼将有阴栓的小鼠标记为孕0.5 d(E 0.5)。按照随机分组的方法将小鼠分为6组。其中实验组5组,在神经管闭合前的孕7.5 d(E 7.5),给予5种剂量的羟基脲进行腹腔注射;正常对照组,采用0.9%的氯化钠水溶液注射。采用不同剂量的羟基脲(HU)腹腔注射C57BL/6J孕鼠,诱导构建最佳小鼠NTDs模型,筛选出HU的最佳造模剂量为NTDs组。利用Western blot方法和免疫组化方法观察神经上皮细胞增殖和凋亡的情况,与前期诱导的NTDs小鼠模型中的结果进行对比。结果HU可诱导出NTDs的小鼠模型,免疫组化检测结果显示,畸形胚胎中的PCNA的阳性细胞低于正常胚胎组;Caspase3的阳性细胞高于正常组(P<0.05)。PCNA蛋白在NTDs组中的表达水平明显低于正常对照组(P<0.05),Cleaved Caspase-3蛋白在NTDs组中的表达水平明显高于正常对照组(P<0.05),并且与前期诱导模型的结果一致。结论本研究通过干扰核苷酸还原酶,引起了神经管发育过程中细胞增殖和凋亡的失衡,从而诱导构建出NTDs小鼠模型,为进一步研究NTDs的机制提供了新的动物模型。
- 官臻王秀伟朱智强岳慧轩李莘秦佳星牛勃王建华
- 关键词：羟基脲神经管畸形细胞增殖凋亡小鼠
- 一种引流管液中的微生物收集装置
- 本实用新型涉及医学和实验动物医疗器械技术领域，具体为一种引流管液中的微生物收集装置，包括装置主体，所述装置主体的一侧安装有引流液收集端，所述引流液收集端的一侧设置有收集接口端，所述引流液收集端的右侧连接有引流管出口端，所...
- 朱智强崔晓岱张霆谢向辉邱颖段顺王浩然韩金
- 一种引流管样本收集装置
- 本发明涉及医学和实验动物医疗器械技术领域，且公开了一种引流管样本收集装置，包括：吸附装置，所述吸附装置安装于装置主体内；用于吸附尿液中的微生物或蛋白质的吸附材料，所述吸附材料填充于吸附装置内；本发明，结构创新，不仅能选择...
- 朱智强张霆崔晓岱 谢向辉邱颖 段顺 王浩然 韩金
- 甲氨蝶呤对早期神经胚基因表达的影响被引量：3
- 2014年
- 目的:利用甲氨蝶呤(methotrexate,MTX)干预孕鼠,探讨MTX对早期神经胚基因表达的影响。方法:用MTX(4.5 mg/kg体重)干预孕鼠,通过NimbleGene表达谱芯片、Real time-PCR及免疫组化等方法进行差异表达基因的筛选和验证。结果:MTX处理后神经管畸形(NTDs)发生率为32.1%。表达谱芯片筛选出166个差异表达基因,其中4个凋亡相关基因(Endog,Trp53,Casp3,Bax)均表现为上调(fold change>1.5,P<0.05),3个增殖相关基因(Ptch1,Pla2g4a,Foxg1)均表现为下调(fold change<0.67,P<0.05);NTDs胚胎神经上皮Caspase-3表达显著升高(P<0.05),phospho-histone H3(pH3)表达显著降低(P<0.05)。结论:MTX影响了早期神经胚的基因表达,尤其是引起了凋亡、增殖相关基因表达的异常,这可能在叶酸缺乏引起NTDs发生的相关机制之一。
- 季成王秀伟王建华官臻朱智强谢秋张霆牛勃
- 关键词：神经管畸形甲氨蝶呤凋亡增殖
- 地龙祛痰组份的纯化效率及其溶菌作用
- 2018年
- 目的了解地龙祛痰组份的纯化效率,检测其对不同类型核酸的降解作用、溶菌酶活性以及EDTA对其溶菌活性的影响。方法酸、碱变性沉淀及丙酮沉淀法制备祛痰组份粗提物,Bradford法检测蛋白含量,Yasuda法检测比活力,紫外光吸收法、琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳检测对不同类型核酸的降解作用,比浊法检测地龙祛痰组份对溶壁微球菌的降解作用,将所得数据用多因素方差分析,比较EDTA对酶比活力的影响。结果 1000g鲜地龙纯化出4.12g粗提物,比活力纯化倍数为69。对环状、线状双链和单链DNA均有降解作用。对RNA无降解作用。含和不含EDTA的反应体系中,溶菌酶样比活力分别为400U/mg和410U/mg;EDTA对溶菌酶样作用没有差异(P>0.05)。结论地龙祛痰组份纯化后蛋白含量减少,脱氧核糖核酸酶样活性提高,对不同类型的DNA具有降解作用,不能降RNA,具有溶菌酶样活性。EDTA不影响其溶菌酶样活性。
- 朱智强孙春容王秀伟官臻牛勃
- 关键词：地龙祛痰脱氧核糖核酸酶溶菌酶比活力
- 胸苷酸合成酶抑制剂在制备构建神经管畸形小鼠模型中的应用
- 本发明涉及胸苷酸合成酶抑制剂在制备构建神经管畸形小鼠模型中的应用，具体而言，是采用胸苷酸合成酶抑制剂干预孕鼠，造成胸腺嘧啶脱氧核苷的代谢障碍，引起鼠胚胎发育异常，从而建立神经管畸形小鼠模型；所述应用，可行性强，容易操作，...
- 官臻牛勃张霆王秀伟王建华朱智强王芳
- 一种生物抑菌制剂及其应用
- 本发明属于制药领域，提供了一种生物抑菌制剂，所述制剂由蚯蚓提取物、核酸酶激活剂和溶菌酶组成，所述蚯蚓提取物的含量为0.01g/L‑2g/L，所述核酸酶激活剂的含量为1mM‑1000mM，所述溶菌酶的含量为0.1 g/L‑...
- 朱智强孙春荣王秀伟官臻杨爱云
- PI3K/Akt信号通路在小鼠胚胎神经发育中的作用及机制
- 2023年
- 目的探究磷脂酰肌醇-3-激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(phosphatidylinositol-3-kinase/serine-threonine kinase,PI3K/Akt)信号通路对小鼠胚胎神经发育的影响及作用机制,进一步阐明PI3K/Akt信号通路相关胚胎神经发育异常的分子机制。方法实验动物为C57BL/6J小鼠,胚胎第7.5天(embryonic day,E7.5)孕鼠随机分为6组,实验组分别腹腔注射12.5、25、50、75、100 mg/kg的LY294002(PI3K/Akt信号通路抑制剂),对照组注射生理盐水。E13.5解剖,观察小鼠胚胎畸形情况。确定最佳造模剂量后,取该组小鼠胚胎神经及脊柱样本,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测细胞凋亡及音猬因子(sonic hedgehog,Shh)信号通路关键基因的mRNA表达水平,采用免疫印迹法检测蛋白质表达水平。实验细胞选用小鼠神经干细胞NE-4C细胞系,采用噻唑兰法(methylthiazolyldiphenyl tetrazolium bromide,MTT)检测不同浓度LY294002处理后细胞存活情况;采用原位末端标记(TdT-mediated dUTP nick-end labeling,TUNEL)实验检测细胞凋亡;采用流式细胞术检测细胞周期。统计学方法采用单因素方差分析和Dunnett’s t检验。结果动物实验结果显示,LY294002给药组出现神经管畸形(neural tube defect,NTD)表型;50 mg/kg组的NTD发生率80.7%(46/57),均为脊髓脊膜膨出和脊柱裂,选为最佳造模剂量。RT-qPCR结果显示,与对照组相比,给药无畸形组、脊髓脊膜膨出组及脊柱裂组的细胞凋亡标志物肿瘤抑制基因(tumor suppressor gene P53,P53)和半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶3(cysteinyl aspartate-specific proteinase 3,Caspase3)的相对mRNA表达均上升(P<0.01),磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸-3-激酶催化亚基α基因(phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate-3-kinase catalytic subunit alpha,PIK3CA)及Shh信号通路关键基因[平滑蛋白(smoothened,Smo)、神经胶质瘤相关癌基因同源物(glioma-associated oncogene homolog,Gli)1及Gli2]的相�
- 李莘郭晓兰郭金王秀伟官臻梁颖超于佳璐朱智强杨爱云王建华
- 关键词：神经管畸形音猬因子信号通路
- 碳酸锂对小鼠胚胎神经发育细胞周期关键基因的影响
- 2025年
- 目的通过小鼠和细胞模型,探究碳酸锂(Li_(2)CO_(3))在小鼠胚胎神经发育过程中对细胞周期及其关键基因的影响。方法利用课题组前期建立的Li_(2)CO_(3)诱导的神经管畸形(NTDs)小鼠模型,以350 mg/kg Li_(2)CO_(3)在胚胎第7.5 d干预C57BL/6J孕鼠,观察子代发育情况;利用0.5、1、1.5、2、2.5、3、5及10 mM的Li_(2)CO_(3)处理小鼠神经干细胞NE4Cs及小鼠胚胎成纤维细胞NIH3T3细胞系,采用噻唑兰、5-乙炔基-2-脱氧尿苷标记及流式细胞术检测细胞存活、增殖及周期;实时荧光定量聚合酶链式反应及免疫印迹技术检测细胞周期关键基因的表达。结果350 mg/kg Li_(2)CO_(3)影响胚胎发育,特别是神经系统发育,NTDs发生率32.7%(18/55);低浓度Li_(2)CO_(3)处理后明显提高细胞存活率,减少G1期细胞,增加S期与G2/M期,促进细胞增殖;小鼠和细胞模型中均发现Li_(2)CO_(3)干预后细胞周期关键基因cyclin A、cyclin D1、Cdk2及Cdk4表达显著上升(P<0.01)。结论Li_(2)CO_(3)通过上调细胞周期关键基因cyclin A、cyclin D1、Cdk2及Cdk4的表达,扰乱细胞周期引起细胞异常增殖,导致NTDs发生。
- 李莘郭晓兰郭金王秀伟官臻梁颖超于佳璐朱智强杨爱云王建华
- 关键词：碳酸锂细胞周期神经管畸形
- 一种生物抑菌制剂及其应用
- 本发明属于制药领域，提供了一种生物抑菌制剂，所述制剂由蚯蚓提取物、核酸酶激活剂和溶菌酶组成，所述蚯蚓提取物的含量为0.01g/L‑2g/L，所述核酸酶激活剂的含量为1mM‑1000mM，所述溶菌酶的含量为0.1 g/L‑...
- 朱智强孙春荣王秀伟官臻杨爱云
