杜志勇 作品数:27 被引量:98 H指数:6 供职机构: 上海交通大学医学院附属瑞金医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 上海市自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
β1整合素反义寡核苷酸对人胰腺癌BXPC-3细胞体外侵袭力的影响 被引量:8 2006年 目的观察β1整合素反义寡核苷酸(ASODN)对人胰腺癌BXPC-3细胞体外侵袭力的影响。方法采用脂质体将不同浓度β1整合素ASODN转染到人胰腺癌BXPC-3细胞中,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western印迹法和Transwell侵袭室方法分别检测细胞β1整合素mR- NA、蛋白表达水平及体外侵袭能力。结果与对照组相比,32~128mg/L ASODN转染后可抑制81整合素mRNA和蛋白的表达(P<0.05),64mg/L ASODN转染使BXPC-3细胞体外侵袭力明显下降(P<0.05)。结论靶向β1整合素的ASODN可有效抑制其在人胰腺癌BXPC-3细胞中的表达,并降低癌细胞体外侵袭力。 黄涛 冯延平 常青 高军 杜志勇 秦仁义 裘法祖关键词:寡核苷酸类 反义 Β1整合素 体内转染生长抑素二型受体基因治疗胰腺癌移植瘤 被引量:3 2006年 目的观察生长抑素二型受体(SSTR2)基因体内转染对胰腺癌移植瘤的治疗作用。方法将缺乏SSTR2表达的胰腺癌细胞株panc-1种植于裸小鼠背部皮下形成移植瘤模型,动物随机分成3组,每组6只;第Ⅰ组不做处理为空白对照组,第Ⅱ组瘤内注射空载体pCMV-6C-脂质体为治疗对照组,第Ⅲ组瘤内注射pCMV-6C-SSTR2-脂质体为治疗组。观察肿瘤生长速度,最后测量瘤体大小及重量,用免疫组织化学方法和免疫印迹技术(Western blot)检测转染效率,用凋亡原位检测方法(Tunel)检测胰腺癌细胞的凋亡率。结果Ⅲ组SSTR2蛋白表达,肿瘤生长速度显著慢于Ⅰ组、Ⅱ组,肿瘤大小(0.318±0.098)cm3显著小于Ⅰ组(2.058±0.176)cm3、Ⅱ组(2.025±0.163)cm3(t值分别为21.190、22.029,P值均<0.05);重量(0.523±0.090)g也显著小于Ⅰ组(1.412±0.146)g、Ⅱ组(1.365±0.116)g(t值分别为11.602、13.233,P值均<0.05);癌细胞凋亡率(1.47±0.13)%显著高于Ⅰ组(0.56±0.09)%、Ⅱ组(0.57±0.11)%(t值分别为13.265、14.362,P值均<0.05)。Ⅰ、Ⅱ组间差异无统计学意义。结论大多数胰腺癌不表达SSTR2可能是其快速生长的重要原因之一;体内转染SSTR2基因后能显著抑制裸鼠移植瘤的生长,显著增加胰腺癌细胞的凋亡。 杜志勇 夏维 田锐 秦仁义关键词:基因治疗 胰腺癌 移植瘤 基因转染 微囊化细胞冻存的研究进展 被引量:1 2010年 背景:细胞微囊化为细胞大规模、高活性体外培养及长期存储提供了新的途径,低温保存是目前保存细胞的重要方法,技术日新月异,复苏细胞在临床和基础研究中的应用越来越多。目的:分析近年来微囊化细胞冻存的相关研究,对微囊化细胞冻存技术的发展作一总结。方法:以"微囊,冻存"为检索词,检索中国期刊网(1979/2010)及维普数据库(1989/2010),限定文章语言种类为中文;以"Cryopreservation,Microencapsule"为检索词,检索PubMed数据库(1979/2010),限定文章语言种类为English。纳入含有微囊化细胞冻存的研究,排除其他形式细胞冻存的研究,结果以各种细胞微囊化后进行冻存处理后产生作用为指标,共检索到43篇文献。结果与结论:随着生物人工肝与以及其他细胞移植研究的深入,对微囊化细胞的需要量将显著增加,微囊化细胞的低温保存技术已成为保正其顺利应用的关键技术之一。目前,微囊化细胞的低温保存技术已经开展了不少研究,有多项研究结果表明复苏后微囊化细胞的存活率和生物学功能都能保持较好的水平,但相关机制仍未完全阐清,各种冻存方法还需要优化。 余松林 韩宝三 杜志勇 吴旭波 吴薇 王加祥 黄芳 李宏为 沈柏用 彭承宏关键词:冻存保护剂 人胆囊癌SP细胞的分离及ABCG2和Oct-4的表达 被引量:4 2008年 目的探索在人胆囊癌细胞系中是否存在具有干细胞特性的SP细胞(side population cells)以及SP细胞、非SP细胞、GBCSD细胞系之间在耐药基因ABCG2和胚胎干细胞表面标志Oct-4表达方面的差异性。方法采用FACS(流式激活细胞分选)技术分选出人胆囊癌SP细胞和非SP细胞,通过RTPCR、Western blot以及流式技术来检测SP细胞、非SP细胞以及GBC—SD细胞系在ABCG2和Oct-4表达方面的差异情况。结果人胆囊癌GBC—SD细胞系中存在着具有干细胞潜能的SP细胞,其所占的比例为(0.64±0.08)%。并且ABCG2在胆囊癌SP细胞中呈现出高表达的状态[(89.56±3.86)%].在非SP细胞中几乎不表达[(1.32±0.49)%],两者之间的差异具有统计学意义(P〈0.05).在GBCSD细胞系中呈弱表达[(12.37±1.61)%]。Oct-4在三种细胞中的表达分别为:(94.87±1.40)%、(88.16±2.34)%、(90.17±1.61)%,三者之间差异没有统计学意义(P〉0.05)。结论人胆囊癌的起源与肿瘤干细胞密切相关并且在胆囊癌细胞系中存在着具有干细胞特性并且高表达耐药基因ABCG2的人胆囊癌SP细胞。 胡均 秦仁义 黄丹 陈敏 王敏 杜志勇 刘文松关键词:胆囊肿瘤 肿瘤干细胞 OCT-4 胰腺癌干细胞研究进展 被引量:1 2011年 胰腺癌是一种恶性程度极高,预后极差的肿瘤,手术切除率低且术后容易复发和转移,并且对放、化疗不敏感.目前,人们在肿瘤的研究中提出了肿瘤干细胞理论.该理论认为,肿瘤内部存在一小部分具有干细胞特性的细胞,即肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs),它具备无限增殖、多向分化、自我更新和极强的成瘤能力,形成肿瘤并维持肿瘤的生长,且对常规的放化疗更不敏感,还可能是肿瘤转移、复发的根源. 杜志勇 韩宝三 彭承宏关键词:干细胞理论 胰腺癌 肿瘤干细胞 手术切除率 恶性程度 细胞特性 胰腺癌放、化疗抵抗诱导上皮间质转化 被引量:5 2009年 目的探讨对放、化疗抵抗的胰腺癌细胞发生上皮间质转化(EMT)的意义。方法采用健择化疗同期进行放疗对多株人胰腺癌细胞系进行干预,持续2周左右,杀死约9 0%左右的各细胞系细胞,获得放疗、化疗抵抗的胰腺癌细胞。高倍显微镜下观察细胞形态学变化。transwell小室试验检测细胞侵袭力。利用W estern-blot检测上皮表型标志物E-cadherin(E-cad)和间质表型标志物波形蛋白(vim-entin)的表达。结果放、化疗抵抗的胰腺癌细胞发生与EMT相符的形态学改变:细胞呈纺锤体状,极性消失,并出现伪足;放、化疗抵抗的3株胰腺癌细胞侵袭力增强,其穿过小孔的数目增加(均P(0.05);E-cad表达下降,vimentin表达上调。结论放、化疗抵抗的人胰腺癌细胞发生EMT,其与胰腺癌治疗抵抗有关。 杜志勇 魏翠凤 田锐 王敏 江建新 秦仁义关键词:胰腺肿瘤 上皮间质转化 Oct-4在不同侵袭转移能力的人胆管癌细胞系中的表达 2008年 目的探讨干细胞因子Oct-4在不同侵袭转移能力的人胆管癌QBC939亚克隆细胞系中的表达。方法运用体外侵袭实验筛选出1个高侵袭转移潜力和1个低侵袭转移潜力的细胞亚系,并对两者的生物学特性进行比较、分析和鉴定。运用RT-PCR,Western-blot的方法检测干细胞因子Oct-4在两个亚克隆细胞系的差异表达。结果分离得到高和低转移能力的人胆管癌QBC939亚克隆细胞系QBC-H和QBC-L,体外侵袭指数分别为263±5.9和154±6.6(P<0.05)。干细胞因子Oct-4 mR-NA和蛋白在QBC-H的表达均高于QBC-L,两者差异有显著性(P<0.05)。结论干细胞因子Oct-4的表达强度与胆管癌QBC939的侵袭转移能力密切相关; 王敏 秦仁义 肖娟 陈敏 胡均 杜志勇 刘文松关键词:OCT-4 肿瘤侵润 细胞亚系 大鼠小体积肝移植后肝再生障碍的实验研究 被引量:1 2011年 目的探讨部分肝移植后肝再生状况和小体积移植物发生肝再生障碍的可能机制。方法实验分为大鼠全肝移植组(OLT)、50%部分肝移植组(50%PLT)和30%部分肝移植组(30%PLT)。分析各组术后肝功能的变化,通过免疫组化观察移植肝标本Cyclin D1和PCNA的表达,并对移植肝组织结构进行电镜观察。结果各组ALT和AST于术后24hr达到峰值,且30%PLT组上升显著。Cyclin D1和PCNA的免疫组化表达中,50%PLT组表达明显上调,而30%PLT组表达则明显抑制。电镜观察发现30%PLT组术后微观结构改变显著。结论 30%PLT组术后肝细胞增殖再生受到明显抑制,推测与肝细胞微环境的恶化和叠加的缺血再灌注损伤有关。 丁家增 严佶祺 张明钧 杜志勇 施敏敏 傅文祎 彭承宏 李宏为关键词:部分肝移植 肝再生 大鼠部分肝移植模型建立的技术要点 被引量:5 2010年 目的为提高大鼠部分肝移植模型的稳定性,探讨手术操作的要点。方法采用二袖套法进行大鼠全肝移植(OLT)、50%部分肝移植(50%PLT)和30%部分肝移植(30%PLT),分析手术和存活状况。结果 OLT组、50%PLT组和30%PLT组肝移植大鼠术后一周存活率分别为91.7%、66.7%和8.3%,差别显著(P<0.01)。部分肝移植大鼠的死亡原因有小体积综合征引起的原发性移植肝无功、肺部感染、肝上下腔静脉吻合口扭曲成角、肝下下腔静脉栓塞和门静脉栓塞。结论:减少游离肝脏的机械损伤、细致的供肝修整、提高吻合口质量、缩短无肝期和下腔静脉阻断时间、注重受体大鼠体温的恢复是部分肝移植模型成功的关键。 严佶祺 张明钧 杜志勇 吴卉 彭承宏 李宏为关键词:部分肝移植 生长抑素受体2转染胰腺癌细胞生物学行为的研究 2007年 目的探讨生长抑素受体2(SSTR2)对胰腺癌恶性行为的影响。方法利用原先已构建的腺病毒载体Adv-GFP-SST2R将人SSTR2全长cDNA转染导入胰腺癌细胞株PC3中,用RT-PCR检测SSTR2mRNA表达。通过肿瘤细胞与基膜成分黏附能力测定、运动能力测定、明胶酶谱法观察转染前后细胞的生物学特性的改变。结果转染Adv-GFP-SST2R的PC3细胞表达SST2RmRNA。SSTR2转染胰腺癌PC3细胞后,胰腺癌细胞与基质的黏附性、运动性下降,明胶酶的分泌能力明显减弱。结论SSTR2转染可明显减轻胰腺癌的恶性行为。 陈敏 申明 胡均 杜志勇 刘文松 王敏 秦仁义关键词:转染 肿瘤浸润 明胶酶类