欧阳振
- 作品数:10 被引量:21H指数:3
- 供职机构:兰州大学第二医院更多>>
- 发文基金:甘肃省科学事业费研究项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 人骨肉瘤细胞株中类肿瘤干细胞的分离培养及鉴定被引量:8
- 2008年
- 目的:从人骨肉瘤株U2-OS中分离并鉴定类肿瘤干细胞。方法:用无血清培养法从骨肉瘤细胞株中分离出肿瘤细胞球,流式细胞术检测骨肉瘤细胞株中Stro-1的阳性表达率,MTT法检测其增殖能力,免疫磁珠分选Stro-1阳性细胞,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法研究Stro-1阳性细胞中Stro-1 mRNA的表达,并将Stro-1阳性细胞和阴性细胞分别接种于NOD/SCID小鼠。结果:U2-OS中CD44的阳性百分率为5.67%,Stro-1阳性细胞形成的细胞球具有增殖和分化的能力,Stro-1阳性细胞中呈现Stro-1 mRNA的高表达,Stro-1阳性细胞能形成骨肉瘤。结论:骨肉瘤细胞株中存在类骨肉瘤干细胞,并具有自我更新和多向分化的能力。
- 欧阳振王栓科康学文王翠芳汪静郭洪章
- 关键词:肿瘤干细胞骨肉瘤细胞培养技术
- 骨肉瘤组织环氧合酶-2、CD_(105)表达与预后
- 2007年
- 目的研究骨肉瘤组织中环氧合酶-2(COX-2)与 CD_(105)表达及其与预后的关系。方法应用免疫组织化学染色的方法检测人骨肉瘤中 COX-2和 CD_(105)的表达,并计算 CD_(105)标记的微血管密度(MVD),同时对预后进行 COX 多因素生存分析。结果 COX-2在骨肉瘤中表达阳性率为77.5%,COX-2的表达与外科分期和肿瘤的转移密切相关(P<0.05);外科分期的Ⅰ期与Ⅱb期、Ⅲ期间的 MVD值的差异有统计学意义(P<0.05),而Ⅰ期与Ⅱa期、Ⅱa期与Ⅱb期之间的差异无统计学意义(P>0.05);转移组的骨肉瘤其 MVD 值高于未转移组,二者之间的差异有统计学意义(P<0.05);COX-2表达与 MVD 值呈正相关(P<0.05)。多因素生存分析显示,Enneking 外科分期、COX-2表达及是否发生转移是影响患者预后的独立危险因素。结论 COX-2在骨肉瘤组织中呈现高表达,其高表达可能促进了骨肉瘤新生血管的生成。COX-2和 CD_(105)标记的 MVD 可以作为骨肉瘤外科分期和是否发生转移的重要指标。
- 欧阳振王栓科王翠芳康学文郭洪章
- 关键词:环氧化酶-2微血管密度骨肉瘤预后
- 全文增补中
- COX-2mRNA、CD105mRNA在骨肉瘤中表达的临床意义被引量:1
- 2007年
- 目的研究环氧合酶-2mRNA(COX-2mRNA)在骨肉瘤中的表达及其与CD105mRNA的相关性。方法应用原位杂交的方法检测人骨肉瘤中COX-2mRNA和CD105mRNA的表达,并计算CD105mRNA标记的微血管密度(MVD)。结果COX-2mRNA在骨肉瘤中表达阳性率为77.5%,COX-2mRNA的表达与外科分期和肿瘤的转移密切相关(P<0.05);外科分期的I期与Ⅱb期、Ⅲ期间的MVD值的差异有统计学意义(P<0.05),而I期与Ⅱa期、Ⅱa期与Ⅱb期之间的差异无统计学意义(P>0.05);转移组的骨肉瘤其MVD值高于未转移组,二者之间的差异有统计学意义(P<0.05);COX-2mRNA表达与MVD值呈正相关(P<0.05)。结论COX-2mRNA在骨肉瘤组织中呈现高表达,其高表达可能促进了骨肉瘤新生血管的生成。
- 欧阳振王栓科康学文王翠芳汪静郭洪章
- 关键词:微血管密度骨肉瘤
- 骨肉瘤干细胞微血管形成相关因子研究
- 康学文王栓科郝俊龙郭洪章欧阳振
- 该课题为甘肃省科学事业费资助项目,编号为:0709TCYA059。应用领域和技术原理:血管的生成使肿瘤能够获得足够的营养物质,因此,在肿瘤发生侵袭、转移的多步骤过程中,无论是起始阶段还是终末阶段,血管生成均发挥着重要作用...
- 关键词:
- 关键词:肿瘤治疗方法抗血管治疗干细胞移植治疗
- 乙酰肝素酶、CD44v6在骨肉瘤组织中的表达及其相关性研究被引量:1
- 2007年
- 〗目的:探讨乙酰肝素酶(heparanase,HPA)、细胞黏附分子CD44v6在骨肉瘤组织中的表达及二者的相关性。方法:应用免疫组织化学染色的方法检测人骨肉瘤组织中HPA和CD44v6的表达。结果:HPA在骨肉瘤组织中表达阳性率为79.6%,CD44v6表达阳性率为55.1%,均显著高于骨软骨瘤中的20.0%和25.0%(P<0.05)。HPA表达与CD44v6表达呈显著正相关(r=0.663,P<0.001),两者表达与骨肉瘤临床分期、转移密切相关。结论:HPA和CD44v6在骨肉瘤组织中高表达可能促进肿瘤的黏附、侵袭和转移。
- 郭洪章王栓科夏亚一汪玉良王翠芳欧阳振
- 关键词:骨肉瘤基因表达乙酰肝素酶CD44V6
- 肿瘤干细胞与骨肉瘤相关研究进展被引量:1
- 2006年
- 肿瘤研究中发现极少数有分化潜能,可无限增殖的亚细胞群具有干细胞特性,肿瘤的发生、生长、转移与之密切相关。肿瘤干细胞主要来源于成体干细胞,也可来源于祖细胞、分化细胞或骨髓细胞。白血病、乳腺癌、恶性脑瘤存在肿瘤干细胞已经明确,在前列腺癌、肺腺癌、肝癌、恶性黑色素瘤等多种肿瘤中也已初步分离出相应的肿瘤干细胞。骨肉瘤是常见的骨组织恶性肿瘤,肿瘤干细胞学说可更好地解释骨肉瘤恶性程度高、转移早、抗化疗等特性。应用无血清悬浮培养方法,干细胞样骨肉瘤细胞已初步得以分离、分析。该文就肿瘤于细胞及干细胞样骨肉瘤细胞的相关研究进展作一综述。
- 郭洪章王栓科康学文欧阳振
- 关键词:肿瘤干细胞干细胞骨肉瘤
- 骨肉瘤组织中COX-2 mRNA、CD44 mRNA和蛋白表达及其两者相关性被引量:2
- 2008年
- 我们用逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR)和免疫组织化学染色的方法研究骨肉瘤组织中COX-2 mRNA、CD44 mRNA和蛋白的表达及两者的相关性。
- 王翠芳欧阳振马延超汪静郝俊龙
- 关键词:COX-2骨肉瘤组织MRNACD44蛋白表达免疫组织化学染色
- 简化无血清培养基分离U2-OS人骨肉瘤细胞系肿瘤干细胞被引量:4
- 2009年
- 背景:已有实验应用成分复杂的无血清培养基从骨肉瘤组织中分离出干细胞样肿瘤细胞。目的:应用简化的无血清培养基在U2-OS人骨肉瘤细胞系中分离培养出骨肉瘤干细胞并对其作肿瘤干细胞的相关检验。设计、时间及地点:干细胞体外培养实验,于2006-02/2007-02在兰州大学第二医院骨科研究所完成。材料:U2-OS人骨肉瘤细胞系购自中科院上海生命科学研究院细胞库。无血清培养基为在DMEM/F12培养基中添加重组表皮生长因子(20μg/L)和重组成纤维生长因子(20μg/L),L-谷氨酰胺(2mmol/L),胰岛素(4U/L),青霉素G(1×l05U/L),链霉素(100mg/L)。方法:取在含血清培养基中贴壁生长的U2-OS细胞,接种于含有表皮生长因子和成纤维生长因子的简化无血清培养基中,形成悬浮生长的骨肉瘤细胞球后观察其增殖、分化能力。用免疫细胞化学染色法检测间充质干细胞标志CD44、CD105蛋白在骨肉瘤细胞球中的表达。反转录-聚合酶链反应法检测U2-OS细胞及其肿瘤干细胞中胚胎多能干细胞管家基因Oct3/4mRNA的表达。主要观察指标:①悬浮细胞球的形成。②肿瘤干细胞增殖活性。③肿瘤干细胞的侵袭能力。④CD44、CD105蛋白在骨肉瘤细胞球细胞中的表达。⑤肿瘤干细胞中Oct3/4mRNA的表达。结果:U2-OS人骨肉瘤细胞系中有极少数的细胞能在简化无血清培养基中增殖形成骨肉瘤细胞球,具有很强的增殖分化能力,其表面具有间充质干细胞的膜分子CD44、CD105,表达胚胎干细胞管家基因Oct3/4mRNA。结论:U2-OS细胞系中存在肿瘤干细胞,简化无血清培养基可用于分离培养骨肉瘤干细胞。
- 郭洪章王栓科杨忠义欧阳振
- 关键词:无血清培养基骨肉瘤肿瘤干细胞
- 人骨肉瘤细胞株U2-OS中分离并鉴定肿瘤干细胞被引量:6
- 2007年
- 目的:采用无血清培养法从人骨肉瘤细胞株U2-OS中分离肿瘤干细胞,检测肿瘤干细胞特异性标志物Stro-1的表达。方法:实验于2006-02/2007-02在兰州大学第二医院骨科研究所完成。①实验材料:人骨肉瘤细胞株U2-OS由中国科学院细胞库提供;DMEM/F12(1∶1)培养基(Gibco公司);胎牛血清(杭州四季青公司);PCR引物由上海生物工程公司合成。②实验方法:取原代培养的骨肉瘤细胞经胰蛋白酶消化制备单细胞悬液,用含表皮生长因子20μg/L、碱性成纤维细胞生长因子20μg/L、L-谷氨酰胺2mmol/L、胰岛素4U/L、青霉素100U/mL和链霉素100U/mL,pH7.2~7.5的无血清DMEM/F12培养基重悬细胞,常规培养5~7d,待培养基中悬浮的肉瘤细胞球体积较大后,用无血清培养基重新吹打成单细胞悬液,按1∶2或1∶3比例传代。③实验评估:从上述骨肉瘤细胞株中分离出的肿瘤细胞球,用MTT法检测其增殖能力,免疫磁珠分选Stro-1阳性细胞,反转录-聚合酶链法检测Stro-1阳性细胞中Stro-1 mRNA的表达,免疫细胞化学染色的方法检测分化后成骨细胞特异性抗原的表达。结果:①肿瘤干细胞增殖活性:增殖潜伏期约为24h,传代后1~2d即可见肿瘤干细胞形成,以后体积逐渐增大。第7天吸光度值最高,与0d吸光度值比较差异有显著性意义(P<0.01)。②免疫磁珠法分选Stro-1阳性细胞:分选的Stro-1+细胞接种于无血清培养基后,24~48h即可形成和原代肿瘤干细胞球形态一样的干细胞球,而Stro-1-细胞却不能形成肿瘤细胞球。③骨肉瘤干细胞中Stro-1mRNA的表达:Stro-1+细胞和Stro-1-细胞mRNA扩增产物的吸光度值二者比较差异有显著性意义(P<0.05)。④肿瘤干细胞分化:分化2周的肿瘤干细胞骨形态蛋白及Ⅰ型胶原酶均呈阳性表达。结论:骨肉瘤细胞株中存在骨肉瘤干细胞,并具有自我更新和多向分化的能力。
- 欧阳振王栓科康学文王翠芳汪静郭洪章
- 关键词:骨肉瘤细胞株分化肿瘤干细胞
- 环氧化酶-2与骨肉瘤被引量:1
- 2006年
- 环氧化酶-2(COX-2)及其抑制荆是近年肿瘤防治研究的热点之一。目前研究表明COX-2通过多种途径参与骨肉瘤的发生、发展和转移,并对病人的预后产生积极影响。选择性COX-2抑制剂能有效地抑制骨肉瘤细胞的增殖、浸润和转移,并能缓解骨肿瘤引起的疼痛、减轻骨破坏,给骨肉瘤治疗带来了新希望。
- 欧阳振王栓科康学文
- 关键词:环氧化酶-2骨肉瘤环氧化酶-2抑制剂