沈城
- 作品数：5 被引量：11H指数：1
- 供职机构：上海海洋大学更多>>
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- 相关领域：农业科学自动化与计算机技术更多>>
- 中华绒螯蟹EcR基因全长cDNA克隆及表达分析被引量：10
- 2014年
- 为了研究蜕皮激素受体（EcR）在中华绒螯蟹蜕皮和性腺发育过程中的作用,本实验采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）以及cDNA末端快速扩增（RACE）技术,克隆了中华绒螯蟹EcR基因全长cDNA序列。运用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）方法,分析该基因在不同组织、蜕皮过程及卵巢发育阶段的表达特征,并研究了甲基法尼酯（MF）对卵巢中EcR的调控作用。结果显示,中华绒螯蟹EcR cDNA全长2 156 bp,编码422个氨基酸,其序列与招潮蟹相似性最高,为89%。荧光定量PCR结果显示,EcR在Y器官中表达量最高;在卵巢和肌肉中少量表达;在肝胰腺、鳃、心脏、胃、肠、胸神经节和脑神经节中微量表达。在中华绒螯蟹不同蜕皮时期中,Y器官中EcR表达量在D期和E期的表达量最高;肝胰腺中EcR表达量从AB期到D期有上升的趋势,到E期有所降低;肌肉中EcR表达量在AB期最高;鳃中EcR表达量在D期最高。在中华绒螯蟹卵巢发育过程中,EcR在卵巢发育Ⅰ-Ⅳ期的表达量有上升趋势,到Ⅴ期表达量降低;体外注射实验中,MF1（注射1μg）组的EcR表达量与对照组和生理盐水组无显著差异,而MF2（注射2μg）组的EcR表达量显著上升;离体培养实验中,MF1组（10^-8mol/L）和MF2组（10^-7mol/L）显著高于对照组和生理盐水组。研究表明,EcR基因在中华绒螯蟹蜕皮和卵巢发育过程有重要作用,MF可以调控EcR基因在卵巢中的表达。
- 王瑶杨志刚沈城姚琴琴曾奇韬刘启彬成永旭
- 关键词：中华绒螯蟹基因克隆蜕皮卵巢发育
- 环境胁迫下中华绒螯蟹离水回避反应的测试装置与使用方法
- 本发明公开的环境胁迫下中华绒螯蟹离水回避反应的测试装置，其包括：箱体；设置在箱体内的回避台，铺设在箱体的箱底面上兼具注气、注药和注水功能的注入装置；该注入装置通过管道和阀门与气泵、储水罐、储药罐连接；在箱体上方悬挂有一摄...
- 何杰吴旭干杨筱珍成永旭王春李萌卢义沈城
- 千金对河蟹幼蟹生长的影响及其在体内的蓄积
- 2014年
- 设定急性(96 h)和慢性(40 d)试验,以初步探讨千金对河蟹幼蟹生长的影响,用高效液相色谱测定千金在河蟹体内的蓄积,并在急性试验中间隔12 h测定千金在水中96 h内的浓度变化,计算其降解率。结果表明,急性试验中(千金浓度分别为11、5.5、2.8μg/mL),随着水体中千金浓度的升高,幼蟹死亡率呈上升趋势;在最高浓度(11μg/mL)组,河蟹幼蟹死亡率最高、为33.33%,与其他两组有显著性差异。慢性试验中(千金浓度分别为1.10、0.54、0.22μg/mL),不同浓度千金浸泡对幼蟹的重量、死亡率、蜕壳率和平均蜕壳天数均未产生明显影响。在急性和慢性试验中,千金在肝胰腺中含量均为最高,其最高蓄积量(在最高千金浓度组)为8.61μg/g,与其他各组间有显著性差异。浓度分别为11、5.5、2.8μg/mL的千金在水中降解速度很快,48 h内的降解率分别为83.91%、68.73%和53.09%,48 h后降解率增加明显变缓。结合急性和慢性试验的结果表明,千金不会导致河蟹大量死亡,不会对河蟹的蜕壳与生长产生明显影响,并且千金在河蟹体内并没有大量蓄积。
- 沈城杨筱珍张金彪洪宇航何杰王瑶成永旭
- 关键词：千金河蟹蓄积
- 日本白鲫BMP15和GDF9基因片段的克隆及组织表达分析被引量：1
- 2012年
- 根据斑马鱼GDF9、BMP15基因的保守序列设计引物,采用RT-PCR方法扩增获得日本白鲫GDF9、BMP15基因片段。日本白鲫GDF9基因片段长778 bp,编码145个氨基酸;BMP15基因片段长811 bp,编码270个氨基酸。氨基酸序列分析表明日本白鲫GDF9与斑马鱼的同源性最高,为78%,与其他物种的同源性在58%～78%之间;日本白鲫BMP15与斑马鱼同源性最高,为80%,与其他物种的同源性在30%～80%之间。系统进化树分析显示,鱼类的GDF9基因独立聚成一支,其中日本白鲫的GDF9基因与斑马鱼的GDF9基因聚成一支;鱼类的BMP15基因独立聚成一支,其中日本白鲫的BMP15基因与斑马鱼的BMP15基因聚成一支。半定量PCR结果显示,BMP15 mRNA在脾脏、肝脏、鳃、脑、心脏、肌肉、肾脏、卵巢中均有表达,其中卵巢中表达量最高;GDF9 mRNA在肝脏、脑、心脏、肌肉、卵巢中均有表达,而在脾脏、鳃、肾脏中表达量极低或不表达,在卵巢中表达量最高,为进一步研究日本白鲫GDF9与BMP15基因的结构与功能奠定了基础。
- 王瑶陈阿琴杨志刚刘志伟郭子好曾奇韬沈城
- 关键词：日本白鲫GDF9BMP15基因克隆
- 环境胁迫下中华绒螯蟹离水回避反应的测试装置与使用方法
- 本发明公开的环境胁迫下中华绒螯蟹离水回避反应的测试装置，其包括：箱体；设置在箱体内的回避台，铺设在箱体的箱底面上兼具注气、注药和注水功能的注入装置；该注入装置通过管道和阀门与气泵、储水罐、储药罐连接；在箱体上方悬挂有一摄...
- 何杰吴旭干杨筱珍成永旭王春李萌卢义沈城
- 文献传递
