王永林
- 作品数：502 被引量：1,811H指数：18
- 供职机构：贵州医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金贵州省中药现代化科技产业研究开发专项项目贵州省科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生理学化学工程农业科学更多>>
- 稳定表达CYP2A13和CYP2A13/POR的Flp-In CHO重组细胞系的构建
- 2022年
- 目的分别构建稳定表达细胞色素P450家族2亚家族A成员13(cytochrome P450 family 2 subfamily A member 13,CYP2A13)的Flp-In CHO细胞系(CYP2A13-CHO)和稳定表达CYP2A13和细胞色素P450氧化还原酶(POR)的Flp-In CHO细胞系(CYP2A13-POR-CHO),并从中筛选代谢活性较好的细胞系。方法课题组前期通过慢病毒转染构建了稳定表达POR的Flp-In CHO细胞系(POR-Flp-In CHO)。该文构建了pcDNA5/FRT-CYP2A13重组质粒,利用Lipofectamine^(TM) 2000转染试剂将pcDNA5/FRT-CYP2A13重组质粒分别转染到Flp-In CHO细胞和POR-Flp-In CHO细胞中。通过荧光定量PCR(qRT-PCR)、Western blot和黄曲霉素B1(AFB1)/4-甲基亚硝胺-1-3-吡啶基-1-丁酮(NNK)细胞毒实验来检测CYP2A13的表达及其活性,并比较了CYP2A13-CHO和CYP2A13-POR-CHO两种重组细胞系的代谢活性。结果与未转染的细胞相比,CYP2A13-CHO和CYP2A13-POR-CHO的CYP2A13 mRNA和蛋白的表达量均明显增加。且与CYP2A13-POR-CHO相比,CYP2A13-CHO细胞对AFB1、NNK的敏感度更高。结论建立了稳定表达CYP2A13且代谢活性较好的CYP2A13-CHO细胞系,为后续筛选能被CYP2A13代谢活化的前致癌物提供了工具。
- 孙莉陆定艳刘欢何俊奇孙佳孙佳王永林李勇军杨畅
- HPLC法测定天泉通颗粒中芍药苷的含量被引量：3
- 2004年
- 目的:建立HPLC法测定天泉通颗粒中芍药苷的含量。方法:采用Hypersil C18柱(150mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水(30∶70),紫外检测波长为230nm。结果:芍药苷进样量在0.201~3.22μg范围内与峰面积线性关系良好,平均加样回收率为99.1%,RSD为2.0%(n=9)。结论:本法简便,测定结果准确、重现性好,可控制天泉通颗粒的质量。
- 何迅王爱民王永林
- 关键词：HPLC芍药苷
- 一种应用于大鼠肝组织的取样装置
- 本实用新型公开了一种应用于大鼠肝组织的取样装置，包括套筒，所述套筒的竖直方向上贯穿设有与其滑动连接的穿刺针，所述套筒上套接有限位装置，所述穿刺针上套接有与其固定连接的滑块，所述滑块与套筒的内侧壁滑动连接，所述套筒的一侧设...
- 刘亭刘香香杨健李勇军王永林
- 文献传递
- 野黄芩素及其葡萄糖醛酸结合物在大鼠体内的药动学研究被引量：4
- 2014年
- 目的建立测定大鼠血浆中野黄芩素及其代谢产物葡萄糖醛酸结合物浓度的UPLC-MS／MS法，并讨论两者在大鼠体内的药代动力学过程。方法色谱采用Waters BEH C18色谱柱，流动相为0．1％甲酸乙腈-0．1％甲酸水溶液，梯度洗脱，质谱采用多反应监测（MRM）进行正离子检测野黄芩素。大鼠静脉给予野黄芩素，测定给药后不同时间的野黄芩素的血药浓度；采用酶解方式间接测定野黄芩素葡萄糖醛酸结合物的血药浓度，以DAS2．0软件获得药动学参数。结果野黄芩素在0．116—28．2mg·L-1呈良好线性相关，提取回收率为80．5％～90．0％，精密度、准确度、稳定性良好。药代动力学研究结果表明静脉给予野黄芩素后其原型及其葡萄糖醛酸结合物药代动力学过程均符合二室模型。结论本研究所建立的方法具有灵敏度高，重现性好，操作简便等特点，可用于同时测定野黄芩素及其葡萄糖醛酸结合物在体内的浓度，便于原型药物及其代谢物产物的药动学研究。
- 刘跃黄勇董永喜王永林郑林
- 关键词：血药浓度MS药动学
- 白及非多糖组分对大鼠血小板活化及血液流变学的影响被引量：15
- 2017年
- 目的探讨白及非多糖组分(白及95%乙醇提取物经D101大孔树脂柱层析水洗脱去除水溶性成分后再用80%乙醇洗脱的组分,BS-80EE)对血小板活化及血液流变学的作用。方法观察不同浓度的BS-80EE给大鼠灌胃后,对大鼠血小板膜糖蛋白CD62P、血小板计数(PLT)、血小板平均体积(MPV)、血小板压积(PCT)和血小板分布宽度(PDW)的影响,并采用扫描电镜观察大鼠血小板的形态变化;同时检测BS-80EE对大鼠血液流变学中各项指标的影响。结果 BS-80EE可剂量依赖性地增加CD62P的活化率;减少PLT、PCT值,对MPV、PDW没有明显作用;各剂量组血小板均伸出长长的伪足,并聚集成团;BS-80EE可使大鼠全血黏度、全血还原黏度、血浆黏度、红细胞聚集指数(EAI)、刚性指数(ERI)及电泳指数(EEI)均增加,变形指数(EDI)降低,对红细胞压积、血沉无显著影响。结论 BS-80EE可通过促进血小板发生活化、形变、聚集,增加血液黏度而发挥止血作用。
- 赵菲菲蔺良才杨馨李靖董莉王永林廖尚高
- 关键词：白及血小板活化CD62P血液流变学止血
- 贵州马兰草重金属与有机氯农药残留分析被引量：5
- 2015年
- 目的:考查贵州省不同产地马兰草中重金属的含量及有机氯农药残留情况。方法:采用高压消解对样品进行处理,采用石墨炉-原子吸收光谱法和氢化物-原子荧光光谱法测定马兰草中铅、镉、铜、砷及汞含量,气相色谱法测定马兰草中α-六六六(α-BHC)、β-六六六(β-BHC)、δ-六六六(δ-BHC)、γ-六六六(γ-BHC)、五氯硝基苯(PCNB)、对,对-滴滴涕(p,p'-DDT)、邻,对-滴滴涕(o,p'-DDT)、对,对-滴滴滴(p,p'-DDD)以及对,对-滴滴依(p,p'-DDE)9种有机氯农药残留。结果:除部分样品砷超标外,其他重金属和有机氯农药残留均符合国家限量标准。结论:所建立的方法快速、准确、灵敏,可为马兰草以及马兰草为原药材来源的中药制剂质量控制提供参考。
- 王正王永林廖尚高关焕玉李勇军刘俊宏何迅
- 关键词：原子吸收重金属农药残留量有机氯
- 前列舒乐胶囊的抗炎作用及对小鼠免疫功能的影响被引量：3
- 2000年
- 前列舒乐对巴豆油所致小鼠耳肿胀及醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增高有明显抑制作用 ,并能显著增加小鼠脾脏指数、胸腺指数 ,对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能及溶血空斑细胞 (PFC)形成亦有显著增强作用。
- 陶玲王永林黄能慧李诚秀李勇军
- 关键词：前列舒乐胶囊抗炎巨噬细胞动物实验
- 大鼠肠道菌群对羊耳菊提取物的代谢作用研究被引量：11
- 2017年
- 考察大鼠肠道菌群对羊耳菊提取物中主要成分的代谢作用,将羊耳菊提取物与大鼠肠道菌液在厌氧条件下共同孵育24 h,通过正丁醇液液萃取处理后,采用色谱联用技术(UPLC-Q-TOF-MS/MS)对代谢产物进行定性分析,并结合布鲁克公司研发的数据处理工具Metabolite Tools,Data Analysis等对代谢信息进行综合分析。通过比较空白样品图谱,肠菌样品图谱以及两者的差异图谱,各色谱峰的准分子离子,碎片离子,分析羊耳菊提取物在大鼠肠道菌群作用下可能产生的代谢产物。结果提示,羊耳菊提取物在肠道菌群作用下,检测到14个代谢产物,主要包括单咖啡酰基奎宁酸的异构,水解的小分子化合物和咖啡酸的还原,甲基化和乙酰化等代谢产物,同时仅检测到1个二咖啡酰基奎宁酸的甲基化代谢产物。以此推测,咖啡酰基奎宁酸类成分在肠道菌群的作用下可能多数水解为分子量小,疏水性更强的代谢产物,使得其更容易被肠道吸收。
- 巩仔鹏侯靖宇侯靖宇吴林霖李梅李勇军王爱民兰燕宇李勇军
- 关键词：肠道菌群代谢产物
- UPLC-MS/MS同时测定大鼠血浆中异荭草素,野黄芩苷和木犀草苷及其药代动力学研究被引量：7
- 2012年
- 目的:建立利用UPLC-MS/MS同时测定大鼠血浆中异荭草素、野黄芩苷和木犀草苷等3种黄酮的分析方法,并研究大鼠静脉注射3个剂量的注射用复方荭草后的药代动力学特征。方法:血浆样品采用酸化后甲醇沉淀蛋白,采用WatersAcquity BEH C18色谱柱,流动相为0.1%甲酸乙腈-0.1%甲酸水梯度洗脱,采用电喷雾电离源(ESI),扫描方式为多反应离子监测(MRM)。结果:3种黄酮成分在大鼠血浆中线性关系良好,提取回收率78.56%～101.91%,日内、日间精密度和准确度良好,各物质在大鼠体内的平均滞留时间均较短(<22 min)。结论:该方法特异、快速、准确和灵敏,可用于注射用复方荭草在大鼠体内的药动学研究。
- 黄勇何峰郑林张治蓉兰燕宇王永林
- 关键词：UPLC-MS/MS
- 头花蓼总黄酮、总鞣质和没食子酸类化合物的制备方法
- 本发明涉及一种头花蓼总黄酮和总鞣质及没食子酸类化合物的制备方法，包括步骤：将头花蓼40-80％乙醇(或甲醇或丙酮)冷浸或回流提取物上D<Sub>101</Sub>大孔树脂，70-85％乙醇(或甲醇)洗脱，洗脱液浓缩后上M...
- 廖尚高王永林张丽娟兰燕宇王爱民李勇军何迅黄勇詹哲浩
- 文献传递
