白志勇
- 作品数：4 被引量：21H指数：3
- 供职机构：北京医科大学第一医院更多>>
- 发文基金：卫生部科学研究基金美国中华医学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 白血病细胞DNA甲基转移酶活性改变及其意义被引量：3
- 1999年
- 为探讨急性白血病DNA甲基转移酶(MTase)活性改变的规律及其与降钙素(CT)基因甲基化发生率的关系,采用~3H标记同位素示踪微量分析法测定白血病细胞MTase的活性;应用甲基化敏感的限制性内切酶消化,结合设有内外参照的多聚酶链反应(PCR)技术检测CT基因甲基化率(CTMR);采用半定量反转录PCR法测定MTase的mRNA表达水平。发现29例急性白血病病人骨髓单个核细胞CTMR平均值为(47.2±22.O)％,明显高于正常人骨髓单个核细胞对照组。15例急性白血病MTase活性平均值为(9.1±4.6)％,较非恶性血液病对照组明显为高;11例缓解期白血病MTase活性平均值(4.1±2.6)％,与对照组无明显区别;3/4例急性白血病治疗缓解后MTase活性下降。5例急性白血病同时测定CTMR及MTase,发现其CTMR及MTase均显著高于对照组。4种白血病细胞系CTMR较对照分别高19-36倍,MTase活性高14-48倍,MTasemRNA表达高41-134倍。结果提示:MTase活性增高及CT基因高甲基化是急性白血病的高发现象。MTase活性增高可能是白血病细胞CT基因高甲基化的原因。MTase mRNA表达增高可能是白血病细胞MTase活性增高的原因。抑制MTase活性,开辟治疗白血病的新途径是值得探索的课题。
- 白志勇武淑兰徐国宾
- 关键词：白血病DNA甲基转移酶DNA甲基化降钙素降钙素基因
- HL-60细胞降钙素基因高甲基化的发生机制
- 2000年
- 目的 :探讨HL 6 0细胞降钙素基因高甲基化的发生机制。方法 :采用HL 6 0细胞 ,以正常骨髓单个核细胞为对照 ,应用甲基化敏感的限制性内切酶消化 ,结合设有内外参照的PCR技术 ,检测CT基因甲基化状态 ;应用同位素微量分析法检测DNA 胞嘧啶 甲基转移酶 (DNA cytosin methyltransferase,MTase)活性 ;应用RT PCR技术检测MTase基因表达水平。结果 :HL 6 0细胞经甲基化敏感的内切酶HpaⅡ消化后仍可扩增出清晰的CT基因特异条带 ,提示CT基因 5′端呈高甲基化状态 ;HL 6 0细胞MTase活性平均测定值为 5 39.9Bq ,是正常骨髓单个核细胞 (平均 2 1 8Bq)的 2 9.8倍 ;MTase基因的mRNA表达水平以MTase与β actin内参照RT PCR产物的比值表示 ,HL 6 0细胞 (0 .72 )为正常对照 (0 .0 2 )的 36倍。结论 :HL 6 0细胞CT基因呈高甲基化状态 。
- 赵明明白志勇白晓川徐国宾武淑兰
- 关键词：HL-60细胞甲基化白血病
- 8种肿瘤细胞系降钙素基因甲基化模式及其与甲基转移酶活性的关系被引量：9
- 2001年
- 目的:探讨肿瘤细胞降钙素(calcitoninCT)基因甲基化模式及其与DNA甲基转移酶(methyltransferaseMTase)活性变化的关系。方法:以6种实体肿瘤细胞系和2种白血病细胞系为研究对象,采用设有内、外参照的多聚酶链反应(polymerasechainreactionPCR),结合限制性内切酶和激光扫描技术,检测CT基因5′端甲基化率(methylationrateof5′regionofCTgeneCTMR);采用同位素示踪微量分析法检测MTase活性。结果:肿瘤细胞系和白血病细胞系的CTMR及MTase活性均显著高于正常对照细胞;CTMR增高与MTase活性增高具有相关性。结论:在恶性肿瘤细胞中普遍存在CT基因高甲基化及MTase活性增高。MTase活性增高为CT基因高甲基化形成的可能机制之一。
- 白晓川白志勇武淑兰
- 关键词：肿瘤降钙素基因DNA甲基化DNA甲基转移酶
- 同位素示踪微量法测定白血病细胞DNA-甲基转移酶活性被引量：12
- 2000年
- 目的:建立3H标记同位素示踪微量分析法用于白血病细胞MTase活性测定,并评价其准确性、敏感性及可靠性;了解急性白血病患者骨髓细胞MTase活性改变的规律。方法:以Poly[d(IC)d(IC)]为甲基受体,3HSAM为甲基供体,测定骨髓单个核细胞和白血病细胞系的MTase活性。以细胞裂解蛋白作用2h所得的每分计数值表示酶活性。每次测定设不加Poly[d(IC)d(IC)]的阴性对照,以HL60细胞MTase活性为100%,所测样本值均和其相比,以相对数表示结果。结果:当细胞裂解蛋白质量在0.25～7.5μg之间时,本法线性良好,Y每分计数=2864X+142(r=0.998,P<0.01)。方法灵敏度为2.4×104Bq,批间变异系数11.4%(n=9),批内变异系数5.9%(n=4)。15例急性白血病MTase活性平均值为(9.1±4.6)%,较11例非恶性血液病对照组[平均(2.1±1.6)%]明显升高。11例缓解期急性白血病MTase活性平均(4.1±2.6)%,和对照组无明显区别。结论:同位素微量分析法测定MTase活性灵敏度高、重复性好。MTase活性增高是急性白血病的高发现象。急性白血病缓解后MTase活性下降。MTase活性测定可能对监测白血病病情变化有一定意义。
- 白志勇徐国宾武淑兰
- 关键词：白血病同位素标记甲基转移酶
