胡孝素 作品数:79 被引量:143 H指数:7 供职机构: 四川大学华西基础医学与法医学院寄生虫学教研室 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 美国中华医学基金 国家教育部博士点基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
用McAb-AST及骨髓涂片法对四川省汶川县犬感染利什曼原虫的调查研究 被引量:15 1991年 作者等用单克隆抗体-抗原斑点试验(McAb-AST)及骨髓穿刺涂片法对汶川县125只犬进行感染利什曼原虫调查,骨髓涂片法查出原虫的阳性犬46只,感染率为36.8%,较之历年来陇南、川北报道的犬感染率为高,不但查明了当地犬感染利什曼原虫的严重性,且为本年在白蛉繁殖季节前消除这些传染源提供了确切依据。为了研究对犬利什曼病的简易、准确的调查方法,我们同时用McAb-AST对该125只犬的血清,检测其循环抗原,结果与骨髓涂片阳性符合率为97.8%,总符合率95.2%,可望取代骨髓涂片法。 胡孝素 林芳清 阚兵 吴远祥 张安治 李国茹 陈明 张先钦 蒋能富 张显林关键词:利什曼原虫 单克隆抗体 杜氏利什曼原虫39kDa抗原基因的克隆表达抗原诊断 敬保迁 胡孝素 覃智 唐恩杰 马肖菊 该研究运用分子克隆技术、DNA杂交技术、分子免疫技术、计算机技术及信处技术对黑热病病原体-杜氏利什曼原虫抗原编码基因进行深入系统地研究,获得39KDA抗原的表达克隆,表达蛋白可用作黑热病的血清学诊断抗原,编码基因为单拷贝...关键词:关键词:杜氏利什曼原虫 抗原基因 血清学诊断 基因表达 杜氏利什曼原虫无鞭毛体蛋白基因原核表达重组质粒的构建 2011年 目的:构建杜氏利什曼原虫无鞭毛体蛋白(amastin)编码基因的原核表达重组质粒pET-amastin。方法:提取杜氏利什曼原虫基因组DNA进行PCR扩增,将扩增出的无鞭毛体蛋白基因片段导入质粒载体pET-32a(+),构建原核表达重组质粒pET-amastin。结果:扩增出大小约550 bp的无鞭毛体蛋白基因,重组质粒pET-amastin经鉴定正确。结论:成功构建杜氏利什曼原虫无鞭毛体蛋白基因原核表达重组质粒pET-amastin。 李金福 陈建平 田玉 马莹 胡孝素关键词:原核表达 基因克隆 Difference in DNA sequences in SSU rDNA variable regions among pathogens isolated from different epidemic foci of visceral leishmaniasis in China 2002年 To confirm the existence of point mutations in the SSU rDNA variable regions of 5 Leishmania donovani (L d ) isolates from different epidemic foci in China Methods Specific SSU rDNA fragments from nuclear DNA of 7 Leishmania species/isolates were amplified by PCR and then cloned into pGEM R T Easy Vectors After that, the specific fragments were sequenced by an automated DNA sequencer Results Sequence analysis showed that the amplified DNA fragments of 7 Leishmania species/isolates were all 392 bp in length All 5 point mutations were located in two unique sequence blocks (UQ Ⅰ and UQ Ⅱ), and no insertions or deletions were found The identities of comparison of Leishmania in GeneBank were more than 98% Conclusion Five point mutations exist in the SSU rDNA variable region of 5 L d isolates from different epidemic foci of visceral leishmaniasis (VL) in China Sequence differences of the SSU rDNA variable region exist among L d isolates from different foci 胡孝素 卜玲毅 马莹 王雅静 敬保迁 易桃林全文增补中 用RAPD技术对利什曼原虫kDNA、nDNA的分析 被引量:6 2002年 目的 :用RAPD技术分析利什曼原虫的kDNA及nDNA。方法 :用 7种随机引物扩增L .infantum和L .donovaniGS2的kDNA和nDNA ,分析扩增结果并计算两虫种间kDNA和nDNA共享度F值。结果 :7种随机引物对两虫种的kDNA、nDNA均扩增出各自特有带型。L .infantum和L .donovaniGS2两虫种间kD NA、nDNA扩增片段的F值分别为 0 2 2 7和 0 2。结论 :kDNA和nDNA均可作为利什曼原虫的RAPD扩增模板 ,这 7种引物均可用于对L .infantum和L .donovaniGS2进行RAPD分析。该两虫种kDNA、nDNA的共享度较低 ,说明二者遗传距离较远。在进行RAPD分析时 ,提取全DNA (包括kDNA和nDNA) 芦殿梅 胡孝素 乔中东 马莹关键词:RAPD NDNA 利什曼原虫 扩增 杜氏利什曼原虫无鞭毛体蛋白N端胞外区基因(ast1)的克隆及表达 被引量:1 2009年 构建杜氏利什曼原虫无鞭毛体蛋白N端胞外区基因(ast1)的原核表达重组质粒pET32a(+)-ast1,并在大肠杆菌BL21中进行表达。从杜氏利什曼原虫基因组DNA中扩增无鞭毛体蛋白基因并用SOSUI和Tmpred方法预测其跨膜区结构;根据跨膜区预测的结果,扩增基因ast1并将其连接到原核表达载体pET32a(+)中,重组质粒命名为pET32a(+)-ast1,并在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。SDS-PAGE和免疫印迹分析表明,在约27kDa处获得重组目的蛋白rAST1的表达,显示成功构建杜氏利什曼原虫原核表达重组质粒pET32a(+)-ast1,并在大肠杆菌BL21中获得有效表达。 陈宪 陈建平 徐佳楠 王昕 路睿 芦殿香 胡孝素关键词:杜氏利什曼原虫 新疆克拉玛依地区皮肤利什曼病病原体SSU rRNA基因及kDNA的PCR-SSCP分析 被引量:5 1998年 应用PCR-SSCP银染技术,对皮肤利什曼病(CL)病人(P17)的病原体SSUrRNA基因及kDNA进行分析。将新疆克拉玛依地区皮肤利什曼病患者病变组织及有关利什曼原虫种株,L.infantum,L.tropica,L.donovaniXinjiang“771”株,分别抽提各标本的基因组DNA和kDNA后,再用相应的引物,R222和R333PCR扩增SSUrRNA基因(397bp片段)和13A、13B扩增kDNA微环(120bp片段)。PCR扩增的SSUrRNA基因(397bp片段)经非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,银染显色后,CLP17病原体的ssDNA的迁移率与L.tropica者接近,而与L.infantum者亦相差较小。PCR扩增的CLP17病原体和L.infantum的kDNA微环(120bp)片段,经SSCP分析,CLP17病原体的Mc1和Mc2分别为0.8259、0.7222,L.infantum的MF1和MF2分别为0.9074、0.7962。MC与MF相比,二者相差较小;CLP17病原体和L.tropica的kDNA微环(120bp片段),经SSCP分析,CLP17病原体的MC1和MC2分别为? 郑学礼 胡孝素 陈建平 章涛关键词:皮肤利什曼病 PCR-SSCP SSU RRNA基因 利什曼原虫中国分离株SSU rDNA多变区序列分析 被引量:7 2001年 目的分析我国荒漠、山丘疫区利什曼原虫分离株的 SSU r DNA多变区序列差异。方法 n DNA进行PCR扩增 ,将扩增出的 SSU r DNA基因的特异片段克隆于 p GEMR-T Easy Vector上 ,采用通用引物 M1 3进行 PCR扩增 ,全自动测序仪测序。结果序列分析显示本文报道的荒漠、山丘疫区的 2株利什曼原虫 (L.d.XJ771、L.d.SC6)的 SSU r DNA序列大小均为 3 92 bp;序列差异发生在两个独特序列区 (UQ- 和 UQ- ) ,无移码突变 ;与 Gene Bank中的利什曼原虫比较分析 ,同源性在 98%以上。结论我国荒漠、山丘疫区利什曼原虫分离株之间的 SSU r DNA多变区的碱基序列有差异 ;荒漠疫区分离株 L.d.XJ771与国际标准株 L.d.DD8的 SSU r 卜玲毅 胡孝素 敬保迁 马莹 易桃林关键词:利什曼原虫 聚合酶链反应 克隆 基因变异 胶体金结合低温包埋技术对杜氏利什曼原虫抗原进行超微定位研究 王子龙 胡孝素 王远萍关键词:免疫技术 抗体 抗原 胶体金 胶体金标记杜氏利什曼原虫抗原超微结构定位研究 1990年 用低温包埋剂Lowicry1 K4M在-30℃下包埋杜氏利什曼原虫前鞭毛体,切片后在电镜下观察到前鞭毛体结构保存较好。用单克隆抗体2H_6-E_5和1H_7-C_2-E_7分别对它们所识别的杜氏利什曼原虫前鞭毛体抗原进行胶体金标记定位,结果发现保护性抗体2H_6-E_3识别的抗原主要分布于前鞭毛体膜外侧面,为进一步研究该抗原的组成、性质和功能建立了一定基础。同时发现1H_7-C_2-E_7识别的抗原主要分布于前鞭毛体膜内侧面,膜外侧面也有分布。 王子龙 胡孝素 王远萍 杨志梅 李光蓉关键词:抗原 原虫