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聚乙二醇修饰小分子药物的研究进展被引量：3: 2015年; 以高聚物作为载体,携带各种活性化合物组成药物释放系统,在现代医疗中发挥了巨大的作用。高分子偶联物不仅可以改变药物的药动学特征,还可以通过偶联特异性的物质使药物具有主动靶向性。目前研究最广泛的高分子载体是聚乙二醇。聚乙二醇通过与肽链、抗体、酶等活性化合物偶联,可以提高药物溶解度,延长循环半衰期,减少非特异性摄取,增加靶向性。已有很多聚乙二醇修饰的药物上市,也有很多尚处于临床研究阶段。大部分聚乙二醇化药物的临床研究表明,聚乙二醇修饰的药物确实可以提高药效、降低毒副作用。但关于聚乙二醇修饰小分子药物的设计依然需要进一步研究和完善。我们主要讨论聚乙二醇修饰小分子药物的设计和应用。; 张海艳王堃胡春生邹云鹏杨晓曦张庆林; 关键词：小分子药物聚乙二醇靶向

PHGF对放创皮肤难愈伤口促愈作用的实验研究: 目的：本实验主要观察携带人肝细胞生长因子的重组质粒(PHGF)对小型香猪放创复合伤皮肤难愈伤口促愈的影响。方法：中国医用小型香猪16只(15～18kg)，按体重随机分为单纯创伤对照组(单伤组)，创伤+照射组(伤照组)，创...; 马琼杜丽崔玉芳蔡金玲程晓晨卢育新胡春生张庆林吴祖泽; 关键词：放创复合伤 Γ射线肝细胞生长因子

肝细胞生长因子对神经损伤的保护及镇痛作用研究进展被引量：3: 2015年; 肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)是一多功能细胞生长因子,对组织器官再生、伤口愈合、血管新生起着重要的调节作用。另外,HGF是一种神经营养因子,具有促进运动神经元、感觉神经元和副交感神经元的存活,对神经具有营养和保护作用,在中枢神经系统中起到重要的作用。HGF对缺血性脑损伤、脊髓损伤和周围神经损伤具有保护和修复作用,而且对肢体缺血、糖尿病性神经病变导致的慢性疼痛具有镇痛作用。本文就近年来HGF对神经系统的保护和修复作用以及镇痛作用及其机制的研究现状进行综述。; 胡春生吴祖泽张庆林; 关键词：肝细胞生长因子基因治疗神经保护胶质细胞

重组质粒pUDK-HGF的中试纯化工艺被引量：1: 2011年; pUDK-HGF是携带人肝细胞生长因子的裸质粒,目前已进入I期临床试验,因此需要大量符合药学规格的质粒DNA。文中建立了pUDK-HGF中试规模纯化制备的新工艺。流程包括:发酵、离心收获菌体、碱裂解、超滤浓缩碱裂解液、Sephacryl S-1000层析除去RNA并更换缓冲液、plasmidselect捕获超螺旋质粒DNA、琼脂糖凝胶6BFF除盐。新工艺可获得浓度为2.0 mg/mL、纯度在1.70以上的裸质粒原液,符合相关质量标准,并避免使用动物源性的酶及有毒试剂。; 胡春生王延亮卢育新程晓晨刘琳张通张庆林; 关键词：重组质粒纯化肝细胞生长因子

激活NF-κB信号通路的土壤微生物代谢产物提取物的筛选被引量：1: 2013年; 目的筛选能够明显影响核离子(NF)-κB信号通路的土壤微生物代谢产物。方法微生物接种液体培养基中,于180 r/min、30℃摇床培养,3 d后,加入终浓度70%的乙醇裂解过夜。裂解物离心,取上清,旋转蒸发浓缩并冷冻干燥,获得微生物代谢产物提取物,采用双荧光素酶报告基因分析方法进行筛选,将pNF-κB-luc、pRL-TK质粒共转染HEK293细胞,转染后6 h加入微生物代谢产物或TNF-α(阳性对照),继续培养24 h后,检测荧光素酶活性。结果在第一轮筛选中,发现30种代谢物能够激活NF-κB信号通路;28种代谢物能够抑制NF-κB信号通路。在第二轮筛选中,有13种代谢物能够明显激活NF-κB信号通路,没有明显抑制NF-κB信号通路的代谢物。在第三轮筛选和最后验证中,发现6种代谢物均能激活NF-κB信号通路。结论从525种土壤微生物代谢物中筛选得到6种具有明显激活NF-κB信号通路作用的微生物代谢产物提取物。; 邹云彭程晓晨卢育新胡春生张庆林; 关键词：核因子-ΚB 荧光素酶报告基因

微环DNA研究进展被引量：4: 2011年; 质粒载体在基因治疗中占据重要地位。传统质粒DNA在真核生物中可能会引起严重的炎症反应,未甲基化的CpG序列可能抑制基因的表达,最好的解决办法是在生产质粒载体过程中将细菌调控序列整体消除。微环DNA是一种新颖的小环超螺旋表达框,它是传统质粒在大肠杆菌体内通过位点特异性重组得到的。微环DNA缺乏抗性标记基因、复制原点等细菌序列,增强了在临床上的安全性。体内、外研究表明,微环DNA提高了转基因表达效率。我们就重组酶系统及微环DNA的生产、纯化和转染效率等方面的研究进行了综述。; 胡春生张通张庆林; 关键词：纯化重组酶

重组质粒pVAX1-PENK大规模制备研究: 2013年; 目的：建立质粒pVAX1-PENK的大规模制备2--艺。方法：对大肠杆菌工程菌DH5α-pVAX1-PENK进行补料发酵，利用自行发明的连续碱裂解过程对菌体进行裂解，经超滤浓缩后，用Sepharnse 6 Fast Flow层析柱分离DNA与RNA，再经Plasmidselect Xtra层析柱分离超螺旋质粒DNA与开环或线性质粒DNA，最后经Source 15Q层析柱精制质粒DNA。结果：发酵获得质粒pVAX1-PENK的产率为182mg／L，经碱裂解及层析分离后，最终制备的质粒DNA超螺旋比例大于98％，总回收率为60.5％，纯度（D260nm／D280nm）为1.8～2.0。结论：建立的质粒DNA生产工艺可以制备大量高纯度的质粒DNA，并避免了使用动物源性的酶及有毒试剂。; 蔡珍珍胡春生卢育新程晓晨柳伟张庆林; 关键词：发酵分离纯化

基因治疗用质粒DNA生产面临的问题及研究进展被引量：4: 2011年; 基因治疗已成为21世纪一些重大疾病的有效治疗策略,目前携带治疗基因的重组质粒已作为基因药物进入临床研究。对用于基因治疗的生物制品的生产与质量控制都有相当严格的要求。虽然已建立大规模符合药学规格的质粒DNA生产工艺,能满足临床需求,但在这些生产工艺中还存在一些难以克服的瓶颈,如:载体构建、细胞裂解、细菌染色体DNA去除、细菌内毒素去除、生产过程中质量控制等。就近年来大规模生产临床用质粒DNA遇到的相关问题及解决方案作一综述。; 胡春生张庆林张通; 关键词：基因治疗质粒DNA 碱裂解纯化

聚酮类化合物异源表达研究进展被引量：3: 2013年; 聚酮化合物具有抗感染、抗真菌、抗肿瘤、免疫抑制等生物活性,在临床上应用非常广泛。我们简要介绍了3种聚酮合酶的基因簇特点,即以模块形式存在的Ⅰ型聚酮合酶、包含重复使用结构域的Ⅱ型聚酮合酶和以查尔酮酶为代表的Ⅲ型聚酮合酶,以及大环内酯类、四环素类、蒽环类、聚醚类聚酮化合物异源表达研究现状,综述了异源表达宿主在不同聚酮化合物的表达方面存在的优势及其挑战。; 胡春生吴祖泽张庆林; 关键词：异源表达聚酮合酶生物合成

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胡春生