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芮贤良

作品数：26 被引量：102H指数：6
供职机构：北京生物工程研究所更多>>
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相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>

合作作者

文献类型

  • 25篇中文期刊文章

领域

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  • 4篇免疫保护
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作者

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年份

  • 5篇1999
  • 1篇1998
  • 1篇1997
  • 5篇1996
  • 4篇1995
  • 3篇1993
  • 3篇1992
  • 3篇1991
共 26 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
志贺氏菌芳香族氨基酸缺陷减毒株的构建被引量：1
1999年
目的构建一种新型痢疾疫苗，使其较完整地保留保护性抗原，又不致丧失其侵袭力。方法用PCR技术从野生型福氏2a志贺氏菌2457T中克隆出aroA基因，在体外进行精确的缺失突变，并通过体内同源重组，构建成ΔaroA突变体RS426。结果这种突变体仍保持了侵袭能力和保护性O抗原的表达，但其毒力已明显降低，不能产生豚鼠角结膜炎，小鼠半数致死量明显提高。结论免疫保护试验显示，RS426可在小鼠中产生对福氏2a野生菌100％的保护作用。
刘英杰芮贤良徐永强苏国富
关键词：志贺氏痢疾杆菌同源重组细菌性痢疾
Southern　blot和Western　blot分析鉴定志贺氏菌侵袭毒力表达
1995年
应用Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ结合Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析了６１株福氏２ａ的侵袭毒力表达（ｉｐａＢＣ和ＩｐａＢＣ）。结果表明：６１株福氏２ａ的侵袭基因位于７．６ｋｂ、２．５ｋｂ和１．６ｋｂ的ＥｃｏＲＩ酶切片段。５８株广州分离株及福州分离株Ｆ００３、Ｆ４１０侵袭蛋白表达良好，而福州分离株Ｆ００８无侵袭蛋白表达，但ｉｐａＢＣ基因探针杂交阳性，显示Ｆ００８的ｉｐａ的表达调控基因有部分缺失。作者认为Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析具有特异、准确、快速的特点，不仅适用于鉴定志贺氏菌侵袭毒力表达而且可用于其它致病菌的相关毒力表达研究。
王红芮贤良俞守义苏国富陈云战杨芳娣
关键词：志贺氏菌SOUTHERNBLOT
痢疾志贺氏Ⅰ型菌毒素基因的克隆与表达被引量：1
1991年
从痢疾志贺氏Ⅰ型菌 W30864株中提取染色体 DNA,用 EcoRI 完全酶解,电泳回收3—7kb 的片段,与载体 pUC19质粒连接重组,用大肠杆菌痢疾样毒素(SLT)基因探针进行筛选,得到了阳性重组子。实验表明志贺氏毒素基因是位于约4.5kb 的 EcoRl 片段上,包含毒素的 A 亚单位基因和 B 亚单位基因。在对克隆株的毒性测定中,采用 Hela-S3细胞试验,证明所产生的痢疾毒素具有杀死细胞的能力。此毒素可引起肠积水和充血,可使小鼠肢体麻痹并致死,克隆重组株的痢疾毒素产量是亲本野生株 W30864的16倍。此外,实验中还对克隆株和产生 SLT 的菌株的毒素产量做了比较。
李丰生黄培堂芮贤良黄翠芬
关键词：痢疾志贺氏菌毒素基因克隆
rhGM-CSF基因真核表达载体的构建及其在COS-7细胞和小鼠体内的表达被引量：2
1996年
将ｈＧＭＣＳＦ基因克隆至真核表达质粒ｐＣＤＳ中，构建成重组质粒ｐＣＧ１。用电穿孔法将质粒ｐＣＧ１导入ＣＯＳ７细胞和直接注射小鼠骨骼肌内，ＥＬＩＳＡ检测显示质粒ｐＣＧ１转染ＣＯＳ７细胞后４８、７２、９６ｈ和肌注质粒ｐＣＧ１后ｄ１０、ｄ１５、ｄ２０、ｄ２５小鼠体内均有ｈＧＭＣＳＦ的表达。生物学活性检测显示含肌注ｐＣＧ１的小鼠血液有维持ＴＦ１细胞生长的作用。
张述苏国富鲍云华芮贤良叶棋浓吴进冬隋拥君王恒梁徐永强
关键词：HGM-CSF真核细胞
宋内Ⅰ相抗原和霍乱CT-B共表达的免疫保护效果观察被引量：5
1996年
将编码宋内氏痢疾菌(Shigella sonnei)I相O抗原的基因和霍乱弧菌(Vibrio choler-ae)的CT-B基因克隆至带asd基因的质粒PYA248,得重组质粒PMGL105。将该重组质粒转入asd基因缺失的减毒伤寒沙门氏菌X4072,构成了一个不带抗药性基因的载体-宿主平衡致死系统。一系列实验表明,该重组菌X4072(PMGL105)能稳定地表达宋内I相O抗原和霍乱弧菌的CT-B抗原。小鼠免疫保护实验表明,该重组菌对有毒的宋内氏I相痢疾杆菌及霍乱弧菌的攻击均具有良好保护作用。
李德玲苏国富芮贤良黄翠芬
关键词：霍乱免疫保护
用竞争性RT-PCR方法定量检测p53基因的表达被引量：4
1999年
目的：建立定量检测ｐ５３基因表达的方法。方法：采用竞争性逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法定量检测了组织和细胞内抑癌基因ｐ５３ｍＲＮＡ含量的变化，同时用狭线杂交的方法进行了对照。结果：竞争性ＲＴ－ＰＣＲ和狭线杂交均反映了ｐ５３基因表达变化的趋势，两者的结果相吻合。与狭线杂交相比，竞争性ＲＴ－ＰＣＲ具有灵敏度高、专一性好、简便、快速等特点，尤适合于定量检测微量样品和表达水平较低的基因。结论：竞争性ＲＴ－ＰＣＲ是一种较好的定量检测基因表达水平的方法。
魏小龙茹祥斌王青定芮贤良
关键词：聚合酶链反应P53基因RT-PCR
志贺氏毒素B亚单位基因的克隆与表达及其免疫保护作用的研究
1995年
本研究首次从野生的志贺氏Ⅰ型痢疾杆菌(简称志Ⅰ)克隆了志贺氏毒素基因,其表达量为野生株的16倍。经次级克隆获得无毒性而有保护作用的志贺氏毒素 B 亚单位在大肠杆菌的高效表达,B 亚单位被纯化至电泳纯,分别制备了 B 亚单位特异的多克隆和单克隆抗体,其研究深度达国际先进水平。对 B 亚单位作为口服苗的一系列条件进行深入研究,分别将 B 亚单表达在细胞周质、细胞表面、分泌至胞外和与 LacZ 融合,观察哪一种表达方式在小鼠内引起更好的免疫反应;采用了四种不同的启动子和二种克隆载体,探索了哪一类启动子和克隆载体适用于构建口服苗。结果表明,中等强度、不需诱导和体内诱导的启动子和
苏国富徐永强李丰生芮贤良黄培堂黄翠芬
关键词：克隆载体多克隆免疫保护作用痢疾杆菌表达量
志贺氏福氏5型菌外膜蛋白ipa BC基因的高效表达及其免疫保护作用的研究
1993年
芮贤良徐永强苏国富黄培堂李丰生罗素英黄翠芬
关键词：外膜蛋白免疫保护基因表达
稳定、无抗药的痢疾福氏2a和宋内双价菌苗候选株的构建被引量：10
1996年
通过体内外基因重组,将大肠杆菌粘附因子cs3基因定位整合到痢疾杆菌福氏2a疫苗株T32菌染色体的asd基因内,使asd基因灭活;将来内O抗原基因克隆至无抗药性表达载体pXL378,获得重组质粒pXL390,将其转化asd-的T32受体菌,构建成福氏2a和宋内双价苗苗株FS01。实验表明:重组质粒pXL390在不带任何抗菌素基因的情况下,在asd-的T32受体菌内是稳定的。FS01株遗传稳定,能表达两种痢疾菌的PLS-O抗原,无明显毒性作用。动物试验表明,以FS01株皮下免疫的小鼠对福氏2a和宋内有毒株的腹腔攻击有100％的保护。
芮贤良徐永强王红苏国富黄翠芬
关键词：志贺氏痢疾杆菌痢疾
大肠杆菌K_(99)遗传工程活疫苗对绵羊的安全性及免疫原性试验研究被引量：1
1992年
用大肠杆菌K_(99)遗传工程活疫苗,按100亿活菌/只剂量于产前6周给149只妊娠杂交绵羊皮下接种,有28.86％的羊只出现临床反应,但所有免疫母羊均正常分娩,其所产羔羊均发育正常。对免疫母羊所产羔羊(66只)吮吸初乳后,给口服250亿强毒菌攻击,死亡率为4.55％,其发生腹泻持续期平均为1.78天,排菌持续期平均为2.94天。与未免疫对照组比较,差异极显著。本试验初步证明该疫苗对绵羊的安全性与免疫原性良好.
尹德萱郭海牛凤兰常晓琴郭湘林阎治川张治平马耀岚刘应江黄培堂李丰生钟声王叙甫芮贤良
关键词：绵羊免疫大肠杆菌疫苗
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