范阔海
- 作品数：88 被引量：125H指数：6
- 供职机构：山西农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山西省回国留学人员科研经费资助项目山西省青年科技研究基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 一种杂交瘤细胞株及其应用
- 本发明公开了一种杂交瘤细胞株及其应用，属于生物医学技术领域。该杂交瘤细胞株已于2021年12月08日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.45006，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路...
- 侯震李宏全尹伟范阔海孙娜孙盼盼
- 猪红细胞ECR1-like膜结合肽段、多克隆抗体、制备方法及应用
- 本发明属于猪红细胞ECR1‑like膜结合肽段抗体技术领域，具体涉及一种猪红细胞ECR1‑like膜结合肽段、多克隆抗体、制备方法及应用。猪红细胞ECR1‑like膜结合肽段的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，为I...
- 尹伟李宏全范阔海孙娜孙耀贵
- 文献传递
- 黄芪多糖对红细胞调控T淋巴细胞增殖的影响被引量：9
- 2015年
- 选择小鼠脾脏和外周血T淋巴细胞作为研究对象,通过体外试验探讨黄芪多糖的免疫调节作用。用不同剂量的黄芪多糖作用于红细胞和T淋巴细胞共同培养体系,48h后,应用MTT比色法检测细胞的增殖活性,研究黄芪多糖对红细胞免疫调控功能的影响。结果表明,小鼠红细胞、植物血凝素(PHA),单独作用对T淋巴细胞的增殖均有显著的促进作用,且红细胞对PHA激活的T淋巴细胞的增殖也有促进作用,但是二者没有明显的协同促进作用;黄芪多糖不能促进体外培养T淋巴细胞增殖,甚至还抑制PHA诱导的T淋巴细胞的增殖活性;但黄芪多糖可以协助红细胞对淋巴细胞的免疫调控功能,双方共同作用,引起淋巴细胞数目的增加和增强增殖功能。
- 尹伟马骞寰姜俊兵范阔海孙娜孙耀贵杨丽华李宏全
- 关键词：黄芪多糖红细胞淋巴细胞免疫调控
- 荧光探针法研究铅离子对小牛胸腺DNA构象的影响被引量：1
- 2009年
- [目的]利用荧光探针法研究铅离子与DNA的作用方式。[方法]采用紫外可见分光光度法检测了DNA的纯度,采用荧光滴定法研究了铅离子对DNA构象的影响。[结果]随着铅离子的加入,DNA-EB复合物的荧光强度逐渐降低。在DNA-EB体系中加入铅离子后,荧光强度随着铅离子浓度的增加而降低,且荧光峰位略有红移。按生物分子的荧光寿命τ0为10ns计算,DNA-EB与铅离子的双分子猝灭常数分别为1.01×1013和4.0×1014L/(mol.s),二者均大于生物分子的最大动态猝灭常数2.0×1010L/(mol.s),说明由铅离子引起的DNA-EB的荧光猝灭属于静态猝灭。根据斜率和外推截距计算出DNA-EB与猝灭剂的解离常数为1.13×10-5mol/L。铅离子与DNA-EB的结合位点为5.56,结合常数为1.51×1029。[结论]铅离子容易与DNA结合,引起DNA构象的变化。
- 赵霞范阔海
- 关键词：荧光探针小牛胸腺DNADNA构象
- 重组鸡CD40L对ND LaSota疫苗免疫效果的影响
- 2021年
- 本试验旨在评价毕赤酵母表达系统生产的重组鸡CD40L对新城疫LaSota疫苗免疫效果的影响。首先构建表达鸡CD40L的重组毕赤酵母菌株,经纯化培养上清获得重组鸡CD40L。再分别用剂量为1.0μg/羽和0.1μg/羽的重组鸡CD40L和新城疫LaSota疫苗联合免疫7日龄SPF鸡。于免疫后14、21、28 d和35 d通过血凝血抑试验检测血清中新城疫抗体水平,用商品试剂盒检测血清超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力以及丙二醛(MDA)含量。结果显示,重组鸡CD40L联合新城疫LaSota疫苗免疫不能增强疫苗诱导产生的血清抗体水平,不能提高鸡血清SOD活性,但能提高血清GSH-Px活性以及降低血清MDA含量。因此,在本试验所设剂量(1.0μg/羽和0.1μg/羽)下,重组鸡CD40L对疫苗无明显的免疫增效作用,但能够增强鸡的抗氧化能力。
- 刘佳宇温慧之范阔海尹伟孙耀贵孙盼盼李宏全
- 关键词：新城疫疫苗免疫效果
- 一种永生化犬乳腺上皮细胞系的构建方法及应用
- 本发明公开了一种永生化犬乳腺上皮细胞系的构建方法及应用，属于生物技术领域。本发明公开的一种永生化犬乳腺上皮细胞系的构建方法，包括利用乳汁分离法分离犬原代乳腺上皮细胞，通过转染携带嘌呤霉素抗性基因的EF1α‑SV40‑IR...
- 张华李宏全冯子建孙娜孙盼盼尹伟范阔海
- 苦参碱联合黄芩苷对LPS诱导小鼠肺炎的影响被引量：16
- 2018年
- 目的研究苦参碱与黄芩苷联合作用对LPS诱导的小鼠肺炎的影响。方法将42只SPF♀小鼠随机分成空白组、LPS组、苦参碱组、黄芩苷组、联合高剂量组、联合中剂量组和联合低剂量组,每组6只。腹腔注射20 mg·kg^(-1)LPS制备小鼠肺炎模型,在感染30 min后,腹腔注射不同剂量的药物。于感染24 h后处死小鼠,采集血液和肺组织。HE染色观察小鼠肺组织病理学变化;ELISA法检测血清中IL-6和TNF-α含量;q PCR检测肺组织中IL-6、TNF-αmRNA的表达;MPO检测试剂盒检测肺脏MPO活性。结果与空白组相比,LPS组小鼠出现肺泡间隔增厚、炎性细胞渗出、充血等肺炎症状,血清和肺组织中炎症因子IL-6和TNF-α表达量明显升高(P<0.01),MPO活性明显增加(P<0.01)。与LPS组相比,用药组小鼠肺组织病变减轻,肺组织IL-6、TNF-αmRNA表达明显降低(P<0.01),MPO活性也明显降低(P<0.05)。结果表明苦参碱和黄芩苷有抗炎作用,且7.5 mg·kg^(-1)苦参碱和50 mg·kg^(-1)黄芩苷联合使用的药效与30mg·kg^(-1)苦参碱或200 mg·kg^(-1)黄芩苷单独使用时一致。结论苦参碱、黄芩苷和二者联用均表现出较好的抑制炎症作用,而联合低剂量组用药量最少,效果和单独用药组差异无显著性,提示低剂量苦参碱和黄芩苷联用效果较好。
- 王芳孙耀贵尹伟范阔海段智变孙娜李宏全
- 关键词：苦参碱黄芩苷小鼠LPSIL-6
- 咖啡酸对玉米赤霉烯酮诱导小鼠卵巢颗粒细胞凋亡的保护作用被引量：3
- 2020年
- 卵巢颗粒细胞通过与卵母细胞相互作用及其自身分泌作用为卵泡的形成和发育成熟提供特殊的微环境。多种有害刺激可引起颗粒细胞凋亡和代谢失调从而降低卵母细胞质量,对胚胎的形成产生负面影响。玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEA)是畜禽养殖业中常见的造成卵巢颗粒细胞损伤的霉菌毒素,且缺少有效治疗药物。因此,本试验用ZEA造成小鼠卵巢颗粒细胞损伤,探究咖啡酸对ZEA诱导的小鼠卵巢颗粒细胞凋亡的保护作用。通过机械法分离小鼠卵巢颗粒细胞;运用间接免疫荧光法对分离出的细胞进行鉴定;使用MTT法测定咖啡酸对正常小鼠卵巢颗粒细胞活性的影响;选取200、100和50μg·mL-1咖啡酸分别与ZEA共处理颗粒细胞,同时设置细胞对照组和ZEA模型组,24 h后显微镜观察细胞形态及贴壁情况,MTT法检测细胞活力;qRT-PCR技术检测caspase-3 mRNA的表达;Western blot检测cleaved-caspase-3和cleaved-PARP蛋白水平。结果发现,FSHR阳性染色大量出现在试验组细胞胞浆中,提示分离到的细胞是小鼠卵巢颗粒细胞;咖啡酸对卵巢颗粒细胞没有毒性作用且细胞活力均在90%以上;与空白对照组细胞相比,ZEA组细胞体积较小,贴壁较差,细胞间隙增大,细胞活力显著降低(P<0.001),caspase-3 mRNA相对表达量以及cleaved-caspase-3和cleaved-PARP蛋白表达水平显著升高(P<0.001),而给予咖啡酸处理后细胞间隙减小,贴壁紧密,细胞活力显著升高(P<0.001),显著降低ZEA诱导的caspase-3 mRNA含量增加(P<0.001),显著降低凋亡相关蛋白cleaved-caspase-3和cleaved-PARP的表达(P<0.001)。本研究发现,咖啡酸可通过抑制ZEA诱导的细胞凋亡,恢复颗粒细胞活性。
- 裴亚萍赵瑾孙娜孙盼盼孙耀贵范阔海尹伟李宏全
- 关键词：咖啡酸玉米赤霉烯酮卵巢颗粒细胞细胞凋亡
- 犬乳腺上皮细胞的分离鉴定及培养方法优化
- 2023年
- 为建立一种快速分离犬原代乳腺上皮细胞的培养方案,本研究旨在从健康泌乳金毛犬的乳汁中分离原代乳腺上皮细胞,接种于两种不同的培养基后传代培养,探讨不同培养基下细胞的生物学特征,提供犬乳腺上皮细胞简单便捷的分离措施及适宜的培养方法。选取泌乳一周的金毛犬在无菌条件下收集乳汁,离心处理后得到乳腺上皮细胞,分别用完全培养基和基础培养基接种培养,经形态学对比观察,间接免疫荧光检测角蛋白8(Cytokeratin 8)表达情况,绘制两种培养基培养下的第3代乳腺上皮细胞生长曲线;探讨完全培养基培养的第6代乳腺上皮细胞的冻存复苏活力。结果表明:1)乳汁分离可得到大量细胞团块,分别接种两种培养基后都会出现“煎蛋样”贴壁细胞,消化传代后两者均有Cytokeratin 8的高度表达;2)接种于基础培养基的细胞前期以聚集在一起的圆形单克隆细胞团块为主,传至第4代仅有少量细胞存活,细胞随着培养时间增加而状态变差,死亡细胞增多;接种于完全培养基的细胞整体呈“鹅卵石铺路样”成片生长,随着传代次数增加细胞状态稳定,细胞生长曲线呈现“S”形;3)完全培养基培养的第6代乳腺上皮细胞冻存复苏后能快速贴壁并分裂增殖。综上,乳汁分离法成功分离犬乳腺上皮细胞,且与基础培养基相比,完全培养基可以更好地维持细胞活性,促进细胞增殖分裂,且不影响细胞冻存后复苏的活力,为后期快速分离犬乳腺上皮细胞提供较优的培养方案。
- 冯子建孙娜郝志立孙盼盼张华范阔海尹伟杨惠珍钟佳张振彪王建中孙耀贵李宏全
- NFATc1在小鼠毛囊生长周期中的定位和表达
- 2022年
- [目的]本研究旨在探究活化T细胞c1核因子(nuclear factor of activated T⁃cells,cytoplasmic 1,NFATc1)在小鼠毛囊生长周期中的组织定位和表达。[方法]以ICR小鼠毛囊生长期、退化期和相对静止期的背部皮肤组织为试验材料,运用免疫组织化学、荧光定量PCR和Western blotting技术分别检测NFATc1在小鼠不同毛囊生长时期皮肤中的组织定位情况、mRNA和蛋白表达量的差异性。[结果]NFATc1在小鼠毛囊的各个生长周期均有表达,阳性反应物主要位于毛囊的膨大部,其次位于根鞘、皮脂腺和表皮,在退化期的膨大部呈现强阳性表达;NFATc1的mRNA和蛋白表达量在毛囊生长期、退化期和相对静止期均呈现“低表达⁃高表达⁃低表达”的规律。[结论]NFATc1在小鼠毛囊的周期性生长过程中发挥作用,与维持毛囊干细胞静止状态相关。
- 范阔海张敏爱胡燕姣刘艺王慧荣于秀菊
- 关键词：ICR小鼠
