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抑制survivin基因对人卵巢癌SKOV3细胞顺铂药物敏感性的影响(英文)被引量：2: 2011年; 目的:探讨应用RNA i技术下调survivin基因对人卵巢癌SKOV3细胞增殖、凋亡及顺铂敏感性的影响。方法:构建survivin基因shRNA真核表达载体,转染人卵巢癌SKOV3细胞。定量PCR和Western blotting观察SKOV3细胞survivin mRNA和蛋白表达的改变;噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖活性和药物敏感性;流式细胞仪检测细胞凋亡。结果:SKOV3-siRNA组细胞survivin mRNA及蛋白表达下降,同时细胞增殖能力明显降低,细胞凋亡率显著增加(P<0.05)。SKOV3-siRNA组细胞对顺铂的化学敏感性升高,顺铂的IC50值降低(P<0.05)。结论:下调survivin基因表达能够抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖能力,诱导细胞凋亡,增强细胞顺铂药物敏感性。因此,survivin基因可能成为抗肿瘤治疗的潜在靶点。; 韩建秋吴维光王勇梅葛红雨; 关键词：SURVIVIN RNA干扰化学敏感性卵巢癌

环境污染物邻苯二甲酸酯类对睾丸间质细胞的雄性生殖毒性作用被引量：5: 2011年; 邻苯二甲酸酯类(phthalate acid esters,PAE)已经成为学术界普遍关注的一类重要的环境有机污染物,其毒性作用的主要靶器官是雄性生殖系统,睾丸间质细胞是PAE生殖毒性的靶细胞之一。文中就PAE对睾丸间质细胞的毒性作用作一综述,为预防PAE的生殖毒性提供理论依据。; 葛红雨吴维光; 关键词：邻苯二甲酸酯类睾丸间质细胞毒性作用

RNAi沉默STAT3基因对人卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的影响被引量：1: 2010年; 目的:探讨应用RNAi技术沉默信号转导与激活因子3(Signal transducers and activators of transcription 3,STAT3)基因对人卵巢癌SKOV3细胞的影响。方法:根据siRNA(Small interference RNAs,iRNA)设计原则,结合pSilencer2.1-U6-neo质粒特点,针对STAT3基因设计并合成2条寡聚DNA片段,退火后克隆入pSilencer2.1-U6-neo质粒,应用脂质体将重组质粒转染SKOV3细胞。通过RT-PCR及Western blot检测STAT3基因不同水平的表达,采用MTT实验、流式细胞仪检测细胞增殖、凋亡的变化。结果:目的siRNA实验组细胞STAT3蛋白及mRNA表达水平均明显下降,细胞增殖能力显著降低,而细胞凋亡率则显著升高。结论:应用RNAi技术沉默STAT3基因可以降低卵巢癌SKOV3细胞STAT3的表达,进而抑制细胞的生长、增殖及诱导细胞的凋亡。; 韩建秋吴维光葛红雨王勇梅; 关键词：卵巢癌 STAT3基因增殖凋亡

抑制STAT3基因表达对人宫颈癌HeLa细胞定植和侵袭的影响被引量：2: 2010年; 目的采用RNA干扰(RNAi)技术抑制人宫颈癌HeLa细胞信号转导及转录活化因子3(STAT3)基因的表达,观察其对HeLa细胞定植和侵袭能力的影响。方法针对STAT3基因设计并合成编码小干扰RNA(siRNA)的寡核苷酸,克隆入pSilencer2.1-U6-neo质粒中,从而构建针对STAT3基因的短发夹状siRNA真核表达质粒,用脂质体法将其转染入人宫颈癌HeLa细胞。利用RT-PCR技术和Western blot方法分别检测STAT3 mRNA和蛋白表达水平;通过软琼脂克隆形成实验和体外侵袭实验检测HeLa细胞的定植和侵袭能力。结果针对STAT3基因的短发夹状siRNA真核表达质粒成功转染人宫颈癌HeLa细胞;转染成功的HeLa细胞的STAT3基因mRNA及蛋白表达均下降;HeLa细胞在软琼脂中形成的克隆数和穿透Matrigel膜的细胞数均明显减少。结论针对STAT3基因的短发夹状siRNA真核表达质粒通过下调STAT3基因表达,抑制宫颈癌细胞的定植和侵袭能力。; 吴维光陈亚琼葛红雨韩建秋王勇梅; 关键词：宫颈癌信号转导及转录活化因子3 RNA干扰

抑制STAT3基因表达对宫颈癌SiHa细胞放射敏感性的影响被引量：1: 2010年; 目的通过RNA干扰技术抑制宫颈癌SiHa细胞转录活化因子3(signal transduction and activators of transcription3,STAT3)基因的表达,观察细胞放射敏感性的变化。方法构建pSTAT3-siRNA真核表达质粒并转染宫颈癌SiHa细胞,RT-PCR及Western blot法分别检测STAT3基因mRNA及蛋白表达。采用6MV直线加速器分别以不同剂量(0、2、4、6、8 Gy)X线照射细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡率,克隆形成实验检测细胞放射敏感性变化。结果与对照组细胞相比,pSTAT3-siRNA转染组细胞STAT3基因mRNA和蛋白水平表达均下降(P<0.05)。细胞经X线照射后,与对照组比较,pSTAT3-siRNA转染组细胞凋亡率升高,SF2值降低(P<0.05)。结论 pSTAT3-siRNA真核表达载体能够抑制宫颈癌SiHa细胞STAT3基因表达,增强其对放射线损伤的敏感性。; 吴维光葛红雨韩建秋王永梅; 关键词：宫颈癌 STAT3基因 RNA干扰

RNAi抑制HIF-1α基因逆转卵巢癌多药耐药的实验研究被引量：4: 2010年; 目的探讨靶向缺氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)载体表达的小干扰RNA(small interferingRNA,siRNA)逆转卵巢癌细胞多药耐药的可行性。方法构建靶向HIF-1α短发夹状siRNA基因表达载体,脂质体介导转染人卵巢癌COC1/DDP细胞。Western blot法检测HIF-1α蛋白和P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的表达;实时定量PCR(real time PCR)检测HIF-1α和多耐药基因1(mdr-1)mRNA的表达;MTT法检测COC1/DDP细胞对化疗药物顺铂的抗性。结果转染HIF-1α短发夹状siRNA真核表达载体的COC1/DDP细胞,低氧条件下HIF-1α蛋白及mRNA表达水平下降,同时mdr-1基因的mRNA及其编码的P-gp蛋白水平也明显下降,对顺铂的药物敏感性增加。结论HIF-1α短发夹状siRNA真核表达载体可有效地抑制卵巢癌COC1/DDP细胞HIF-1α和mdr-1基因的表达,逆转卵巢癌细胞的多药耐药。; 葛红雨吴维光韩建秋王勇梅; 关键词：卵巢癌药物耐受性低氧诱导因子1Α

邻苯二甲酸酯类化合物对睾丸间质细胞毒性作用的研究进展被引量：7: 2011年; 目前在我国江河、湖泊、饮用水和蔬菜等中均已经检测到邻苯二甲酸酯类（phthalic acid esters,PAEs）,我国环境中PAEs类的污染问题已越来越多地受到人们的关注[1]。PAEs是一类人工合成的脂溶性有机物。PAEs对人类的健康特别是男性生殖系统的健康具有潜在的威胁，越来越多的研究表明PAEs可损害雄性的生育力，其中睾丸间质细胞是其作用的靶细胞之一。; 葛红雨吴维光; 关键词：邻苯二甲酸酯类睾丸间质细胞毒性作用

沉默STAT3基因对人卵巢癌化疗敏感性的影响被引量：3: 2010年; 背景与目的:信号转导因子与转录激活因子3(STAT3)是近期研究较多的一种基因,在多种实体瘤如乳腺癌、胃癌和卵巢癌等中均有异常表达和活性增强。本研究旨在探讨STAT3短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)真核表达载体对卵巢癌细胞SKOV3化疗敏感性的作用。方法:构建STAT3基因shRNA真核表达质粒,并转染卵巢癌SKOV3细胞。试验分为SKOV3、SKOV3NS和SKOV3siRNA3组,以RT-PCR及免疫蛋白印迹法分别检测各组STAT3基因的mRNA及蛋白表达水平。细胞经20μmol/L顺铂(DDP)作用后,MTT法检测细胞生长抑制率,流式细胞术(FCS)检测细胞凋亡率。结果:MTT法检测肿瘤细胞的生长抑制率,SKOV3组、SKOV3NS组和SKOV3siRNA组细胞抑制率分别为0.46±0.13、0.44±0.11和0.71±0.12。与SKOV3组、SKOV3NS组相比,SKOV3siRNA组细胞抑制率明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05);而SKOV3NS组与SKOV3组比较,细胞抑制率差异无统计学意义(P>0.05)。SKOV3组、SKOV3NS组和SKOV3siRNA组细胞凋亡率分别为18±4、17±3和35±4。与SKOV3组、SKOV3NS组比较,SKOV3siRNA组细胞凋亡率明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05);而SKOV3NS组与SKOV3组比较,细胞凋亡率差异无统计学意义(P>0.05)。SKOV3组、SKOV3NS组和SKOV3siRNA组细胞STAT3mRNA检测结果分别为0.50±0.08、0.48±0.07和0.31±0.09。与SKOV3组、SKOV3NS组比较,SKOV3siRNA组细胞STAT3mRNA表达水平明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05);而SKOV3NS组与SKOV3组细胞比较,STAT3mRNA表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。SKOV3组、SKOV3NS组和SKOV3siRNA组细胞STAT3蛋白检测结果分别为0.54±0.09、0.56±0.08和0.32±0.09。与SKOV3组、SKOV3NS组比较,SKOV3siRNA组细胞STAT3蛋白表达明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05);而SKOV3NS组与SKOV3组比较,细胞STAT3蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:针对STAT3基因的shRNA真核表达载体能有效地抑制卵巢癌SKOV3细胞STAT3基因表达,增强其对化疗药物DD; 王勇梅吴维光葛红雨韩建秋; 关键词：卵巢肿瘤 RNA干扰 STAT3 化疗敏感性

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葛红雨

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