贾思远
- 作品数：16 被引量：38H指数：4
- 供职机构：南方医科大学珠江医院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 烟碱型乙酰胆碱受体在离体海马小胶质细胞上的表达与定位
- 目的探讨烟碱型乙酰胆碱受体(α7-nAChR)在体外培养海马小胶质细胞上的表达和定位。方法取新生SD大鼠的海马组织,进行胶质细胞的混合培养,然后分离纯化小胶质细胞,采用免疫荧光染色检测CD11b/c进行小胶质细胞的鉴定;...
- 贾思远雷露雯王克万王勇
- 关键词：海马小胶质细胞烟碱型乙酰胆碱受体
- 文献传递
- 小儿重症急性坏死性筋膜炎的救治
- 2011年
- 小儿急性坏死性筋膜炎是一种严重的小儿外科感染性疾病,主要表现为皮肤及皮下组织的进行性坏死,其病程进展迅速、病情险恶,一旦延误诊治,往往造成患儿死亡[1].我院烧伤科自2000年至2009年间共收治8例,现报告如下.
- 石胜军陶少华贾思远陈广平
- 关键词：急性坏死性筋膜炎小儿外科感染性疾病救治重症
- EOLA1基因突变体的克隆和鉴定
- 2003年
- 目的 对ECV3 0 4细胞株EOLA1基因进行克隆测序以及mRNA水平检测。方法 采用RT PCR扩增EOLA1基因片断 ,连接到T载体进行测序。结果 测序发现一种目的基因mRNA剪接突变体 ,其第 3外显子起始部分比Genebank数据库相应序列多出 19个碱基。RT PCR显示剪接突变体与野生型EOLA1基因具有不同的表达水平和LPS反应性。结论 发现一个EOLA1基因剪接突变体 。
- 苏踊跃齐洁罗向东贾思远梁光萍陈渝刘月明
- 关键词：EOLA1基因克隆
- 酵母双杂交筛选与分化抑制因子Id1′相互作用的蛋白
- 2003年
- 目的 筛选成人肺组织文库中与分化抑制因子Id1′相互作用的蛋白。方法 构建重组诱饵质粒pHybLex Zeo Id1′ ,转化入酵母细胞EGY48 pSH18 3 4,检测重组质粒有无非特异激活报告基因 ;通过筛选成人肺组织文库 ,获取真阳性文库质粒 ,进行测序和同源性比较 ,获得真阳性克隆。结果 经测序证实 ,重组诱饵质粒pHybLex Zeo Id1′构建成功 ;将重组质粒转化入酵母细胞EGY48 pSH18 3 4,经检测无非特异激活功能。进一步通过对文库进行筛选 ,获得一个真阳性克隆 ,通过测序和同源性比较证实该阳性克隆是酪氨酸蛋白激酶Fyn。结论 分化抑制因子Id1′与Fyn在酵母细胞中存在相互作用。
- 贾思远罗向东齐洁苏踊跃陈渝
- 关键词：分化抑制因子1酵母双杂交FRN
- 人HSP75基因重组腺病毒载体构建及在C17.2神经干细胞的表达
- 2015年
- 目的构建HSP75基因重组腺病毒载体,观察HSP75蛋白在C17.2神经干细胞中的表达。方法采用PCR方法从含人HSP75基因质粒中扩增HSP75基因,连接到腺病毒穿梭质粒的多克隆位点区域,构建重组穿梭质粒p HBAd-MCM-HSP75-GFP,在LipofiterTM转染试剂的介导下与腺病毒辅助骨架质粒p HBAd-BHGloxΔE1,3 Cre共转染HEK293细胞,整合包装成重组腺病毒,TCID50法测定病毒滴度。使用荧光显微镜、流式细胞仪和Western blotting观察重组腺病毒在C17.2细胞中的感染情况及HSP75蛋白的表达水平。结果通过酶切鉴定、测序、PCR鉴定,HSP75基因已正确插入穿梭质粒中,并与病毒骨架质粒整合包装成重组腺病毒;重组腺病毒滴度为1.0×1010PFU/ml;Western blotting检测,转染后的神经干细胞表达HSP75蛋白。结论 HSP75重组腺病毒载体成功构建,对C17.2神经干细胞具有较高的表达效力。
- 王艳陈庆状蒋德旗李明星贾思远朱宁王勇
- 关键词：重组腺病毒载体C17.2神经干细胞
- 分化抑制因子ID1’基因酵母双杂交诱饵载体的构建及自激活作用的检测被引量：2
- 2003年
- 目的 :构建酵母双杂交用分化抑制因子ID1’基因的诱饵载体 ,并检测其自激活作用。方法 :PCR扩增ID1’基因全长 ,酶切后与诱饵载体pHybLex/Zeo连接形成重组诱饵载体 ,电穿孔方法转化到酵母细胞EGY48中 ,β -半乳糖苷酶滤膜分析检测重组诱饵载体对报告基因LacZ的自激活情况。结果 :扩增出ID1’基因全长 ,成功构建了重组诱饵载体pHybLex/Zeo -ID1’ ,经酶切和测序鉴定正确 ;重组诱饵载体无自发激活报告基因功能。结论 :重组诱饵载体构建成功 ,对报告基因无自激活作用 。
- 贾思远齐洁罗向东
- 关键词：分子生物学分化抑制因子酵母双杂交诱饵载体
- 热应激对血管内皮细胞增殖的影响及其机制初探被引量：4
- 2003年
- 目的 探讨热应激条件下对血管内皮细胞增殖的影响 ,进一步从DNA损伤后P5 3mRNA、P2 1mRNA表达改变角度探讨增殖调控的机理。方法 以建立的血管内皮细胞热应激 (4 3℃ ,2小时 )为实验模型 ,应用流式细胞仪观察热应激后血管内皮细胞株ECV30 4的细胞周期变化 ,单细胞凝胶电泳方法观察热应激对血管内皮细胞DNA的损伤 ,RT PCR检测P5 3mRNA、P2 1mRNA表达改变情况。结果 热应激可使血管内皮细胞DNA产生显著损伤 (P <0 .0 5 ) ,继而P5 3mRNA表达增高 ,并促进P2 1mRNA的上调表达 ,最终使细胞产生G1期阻滞。结论 热应激可损伤血管内皮细胞DNA ,并通过P5 3、P2
- 贾思远罗向东齐洁
- 关键词：热应激血管内皮细胞MRNA
- 烟碱型乙酰胆碱受体在离体海马小胶质细胞上的表达与定位被引量：2
- 2009年
- 目的探讨烟碱型乙酰胆碱受体（α7-nAChR）在体外培养海马小胶质细胞上的表达和定位。方法取新生SD大鼠的海马组织，进行胶质细胞的混合培养，然后分离纯化小胶质细胞，采用免疫荧光染色检测CD11b／c进行小胶质细胞的鉴定：采用RT—PCR和免疫荧光双标分别检测α7-nAChR在小胶质细胞中的表达和定位。结果免疫荧光染色显示分离纯化的细胞表达小胶质细胞特异性抗体CD11b／c；RT—PCR能扩增出长度为450bp的α7-nAChR目的条带．免疫荧光双标检测显示小胶质细胞CD11b／c和α7-nAChR染色阳性，分别呈红色和绿色荧光，叠加后呈棕黄色，且细胞膜荧光信号较强。结论α7-AChR在体外培养的海马小胶质细胞中能正常表达．定位在细胞膜的功能性α7-nAChR较丰富。
- 贾思远雷露雯王克万王勇
- 关键词：海马小胶质细胞烟碱型乙酰胆碱受体
- 热应激对血管内皮细胞DNA损伤效应的研究被引量：6
- 2003年
- 目的 :观察血管内皮细胞株ECV30 4在不同热应激条件下DNA受损情况。方法 :实验采用单细胞凝胶电泳法(SCGE)检测在不同热应激条件 ( 4 1℃ 2h、 4 3℃ 2h、 4 5℃ 2h)对ECV30 4细胞DNA的单链损伤情况。结果 :在不同的热应激条件下 ,固定热应激时间 ,随着热应激温度的逐步增加 ,采用SCGE法所观察到的受损细胞数显著增多 ,P <0 0 5 ,相应的慧尾长度显著增加 ,P <0 0 5。结论 :热应激对内皮细胞的DNA致伤肯定 ,可使ECV30 4细胞DNA发生不同程度的单链断裂。
- 贾思远贾豫东罗向东
- 关键词：热应激单细胞凝胶电泳
- Lgr6基因质粒转染人脐带间充质干细胞对小鼠皮肤创面的修复作用
- 2013年
- 目的探讨富含亮氨酸重复序列的G-蛋白偶联受体6(Lgr6)基因与人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)构建的组织工程细胞是否更快更好地修复小鼠皮肤创面。方法体外培养hUC-MSCs,构建pIRES2-EGFP-Lgr6表达载体,将表达Lgr6的质粒转染到hUC-MSCs中,然后种植于重症联合免疫缺陷小鼠背部全层皮肤烧伤创面(实验组),同时设种植转染空载质粒的hUC-MSCs作对照组。于术后7、14、21 d观察创面愈合率,并做HE染色和免疫组织化学。结果 hUC-MSCs能正确表达Lgr6靶蛋白,术后7、14、21 d实验组创面愈合率均明显高于对照组。HE染色显示,实验组新生表皮较厚,细胞层数较多且分层较明显,皮肤附属器增多,总体创面愈合情况均较对照组好;在再生表皮和真皮层中均发现有绿色荧光蛋白标记的细胞,且部分细胞表达人源性角蛋白14。结论 Lgr6基因转导入hUC-MSCs可应用于修复小鼠皮肤创面,修复效果较好。
- 石胜军陈广平贾思远
- 关键词：人脐带间充质干细胞皮肤创面
